国家自然科学基金(30080030)
- 作品数：14 被引量：39H指数：4
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- 31例中国汉族人外周血白细胞线粒体DNA高变Ⅰ区序列特殊变异分析被引量：3
- 2004年
- 目的 通过分析线粒体DNA序列 ,进一步了解中国汉族人线粒体基因多态性的特点。方法 一步法制备 3 1个无亲缘关系的中国汉族个体的外周血白细胞线粒体DNA ,PCR扩增包括非编码高变Ⅰ区在内的 15 2 8bp核酸片段 ,并直接测序 ,分析高变Ⅰ区序列变异情况。结果 高变Ⅰ区 162 2 3和 163 62核苷酸位点 ,分别出现高频率C→T变异 ( 70 97% ,2 2 /3 1)及T→C变异 ( 4 8 3 9% ,15 /3 1)。结论 线粒体DNA第 162 2 3核苷酸位点T和第 163 62核苷酸位点C很可能是中国汉族人特异性的单核苷酸多态性位点。
- 胡义德贾立明孙玉兰孙恒文刘丽红叶明福钱桂生房殿春
- 关键词：中国汉族人线粒体DNA外周血白细胞人外周血线粒体基因直接测序
- 姜黄素与顺铂联合对人肺腺癌A549细胞增殖抑制作用的体外研究被引量：7
- 2006年
- 目的研究姜黄素和顺铂联合应用对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法采用MTT法观察姜黄素和顺铂对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果姜黄素及顺铂能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性,两者作用人肺腺癌A549细胞48h的半数抑制浓度(IC50)分别为18.4μmol/L、0.966μg/ml。姜黄素10μmol/L、15μmol/L2、0μmol/L与顺铂1μg/ml、2μg/ml联合24h、48h、72h的抑制率显著高于单用顺铂、姜黄素组(P<0.05),两者呈现出相加的抗瘤效果。结论姜黄素在体外对人肺腺癌A549细胞的增殖有明显的抑制作用,能提高顺铂对人肺腺癌A549细胞的敏感性。
- 崔建东胡义德
- 关键词：姜黄素顺铂A549
- 人线粒体DNA序列分析在法医学中的应用研究及其进展被引量：3
- 2006年
- 综述人线粒体DNA(m tDNA)序列分析在法医学种属鉴别、个体识别,以及个体年龄推断中的应用研究及其进展,展望对m tDNA异质性的研究及建立人m tDNA数据库,并具有重要的法医学实践意义。
- 钱海洪胡义德
- 关键词：法医物证学
- 肺鳞癌mtDNA D-环序列微卫星不稳的研究被引量：5
- 2007年
- 目的分析肺鳞癌患者癌组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)非编码D-环区序列的微卫星不稳(mitochondrial microsatellite instability,mtMSI)现象并探讨其意义。方法应用改良一步法制备15例肺鳞癌患者癌组织mtDNA,PCR产物直接测序,对比分析D-环区序列mtMSI情况。结果15例肺鳞癌患者癌组织mtDNAD-环区中,全部出现了mtMSI(100%),在3个不同位点上共发现30个mtMSI。结论肺鳞癌患者mtMSI发生率高,D环区碱基序列的mt-MSI可能与肿瘤的发生发展有关。
- 刘丽红胡义德钱海洪钱频张国强
- 关键词：肺鳞癌线粒体DNAD-环区微卫星不稳
- X射线诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及线粒体DNA基因表达下调被引量：2
- 2007年
- 目的 研究不同剂量X线对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响，并检测其线粒体DNA（mtDNA）基因的差异表达。方法 以同步培养的未受照细胞为对照，8MVX线分别以2、4、6和8Gy的吸收剂量照射A549细胞，MTT比色法分析细胞增殖曲线；并于照射后24h，流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率，电镜观察细胞超微结构，人mtDNA基因表达谱芯片检测靶基因的表达变化。结果X射线抑制A549细胞增殖，以4Gv为显著；随着照射剂量的增加，细胞凋亡率增加，G2／M期细胞比率增加，6和8Gy组表现出G2／M期阻滞，透射电镜下4Gy组可见凋亡的形态改变，8Gy组细胞近碎裂；X射线照射后mtDNA编码基因呈普遍下调表达，包括2Gy组的3种tRNA基因、4Gy组的2种tRNA基因和4种mRNA基因、6Gy组的6种tRNA基因和1种rRNA基因，8Gy组的2种tRNA基因。结论X射线可抑制A549细胞增殖，诱导细胞凋亡及mtDNA编码基因的普遍下调表达。随着辐射剂量的增加，剂量依赖性效应逐步减弱而解除。4Gy为体外研究的相对高效、安全剂量。
- 孙玉兰胡义德钱海洪
- 关键词：线粒体DNA凋亡细胞周期阻滞
- 改良一步法制备人外周血白细胞线粒体DNA被引量：13
- 2004年
- 目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法 5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果 获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染 ,用特异性mtDNAPCR引物从 5 8例核酸样品中均能扩增出 15 2 8bp的mtDNA基因片段。结论 改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好。
- 贾立明叶明福刘丽红孙玉兰孙恒文谢启超李军果钱桂生房殿春胡义德
- 关键词：线粒体DNA白细胞抽提
- 肺鳞癌组织mtDNA HVRⅡ序列突变研究
- 2006年
- 背景与目的线粒体DNA是除细胞核外的惟一遗传物质,分成编码区和非编码D-环区。本研究拟分析肺鳞癌患者外周血白细胞、癌旁组织及其癌组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)非编码D-环高变Ⅱ区(hypervariable regionⅡ,HVRⅡ)序列突变的情况,并探讨其意义。方法应用改良一步法提取15例肺鳞癌患者外周血白细胞、癌旁组织及癌组织mtDNA,PCR产物直接测序,对比分析HVRⅡ区序列突变情况。结果15例肺鳞癌患者癌组织mtDNA HVRⅡ中,14例出现了突变(93.33%)。共发现88个突变,其中87个突变位于重链起始区域,尤其是保守序列区及线粒体转录因子1、2结合位点(TFX和TFY)。结论肺鳞癌患者癌组织mtDNA HVRⅡ区突变发生率高,在肺鳞癌发生发展中可能有重要作用。
- 刘丽红胡义德柳君泽钱海洪钱频张国强
- 关键词：线粒体DNAD-环区突变
- 线粒体基因组与肺癌的相关研究进展
- 2004年
- 贾立明刘丽红胡义德叶明福
- 关键词：肺癌线粒体基因组癌发生治疗学多基因线粒体DNA
- 线粒体DNA HVR区Ⅰ序列突变与肺鳞癌关系的研究被引量：2
- 2005年
- 目的 分析肺鳞癌患者外周血白细胞及其癌组织线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)非编码区(又称D 环)高变区Ⅰ(hypervariableregionⅠ,HVRⅠ)序列的突变情况并探讨其意义。方法 应用改良一步法制备13例肺鳞癌患者外周血白细胞及肺鳞癌组织mtDNA ,PCR产物直接测序,对比分析HVRⅠ区序列突变情况。结果 13例肺鳞癌患者癌组织mtDNAHVRⅠ区中,有8例出现了突变,占61 5 4% ;在2 5个不同位点上共发现3 0个突变,其中点突变占5 6 67% (17/3 0 ) ,插入和缺失突变占43 3 3 % (13 /3 0 ) ,并发现1例肺鳞癌病人存在10bp片段的缺失。结论 肺鳞癌患者癌组织细胞mtDNAHVRⅠ区突变发生率高,其中点突变占有重要地位,插入和缺失突变也不可忽视。
- 刘丽红胡义德
- 关键词：肺鳞癌线粒体DNAD-环区突变
- 肺癌患者外周血白细胞线粒体DNA突变研究被引量：1
- 2004年
- 目的 分析mtDNAtRNAThr、tRNAPRO基因及非编码HVRⅠ区序列在肺癌患者及健康成人外周血中的突变情况并探讨其意义。方法 一步法制备外周血白细胞mtDNA ,结合PCR产物直接测序 ,对比分析mtDNAtRNAThr、tRNAPRO基因及非编码HVRⅠ区序列在 17例肺癌患者和 14例健康成人外周血白细胞中的突变情况。结果 肺癌组和健康成人组中 ,仅 1例健康成人mtDNA编码区tRNAThr基因中出现了 1个碱基变异 ,碱基平均变异率为 0 .0 2 37% ,而非编码HVRⅠ区共发现 136个变异 ,碱基平均变异率为 1.2 82 8%。肺癌组和健康成人组碱基平均变异率分别为 1.2 384 %和 1.336 7%。肺癌组中腺癌、鳞癌、小细胞癌的碱基平均变异率分别为 0 .994 2 %、1.2 0 2 1%和 1.75 4 4 %。结论 肺癌患者外周血白细胞mtDNA编码区序列趋于高度保守 ,主要碱基变异发生在非编码HVRⅠ区 ,与健康成人相应区域变异率总体上趋于一致 ,但肺癌组人均碱基变异随年龄增长有增高趋势 ,且小细胞肺癌外周血白细胞mtDNA非编码HVRⅠ区碱基平均变异率有增高趋势。
- 胡义德贾立明刘丽红孙玉兰孙恒文钱桂生房殿春
- 关键词：肺肿瘤线粒体DNA非编码区突变
