广州市科技局资助项目(2007J1-C0141)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：江洁华廖伟娇易建云李翊泉徐韫健更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院广州市海珠区妇幼保健院广州医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌传播的分子机制研究被引量：1
- 2008年
- 目的了解CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希茵中的分布及传播的分子机制。方法用Kirby-Bauer（K-B）药敏法分析43株大肠埃希菌的耐药性；用多重聚合酶链式反应（PCR）扩增ESBLs、AmpC、ISEcp1B、IS903、IS26等插入序列及I类整合子；用套式PCR在I类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒，扩增CTX-M型ESBLs全序列并测序。结果大肠埃希菌对以下抗生素的耐药率从高到低分别是：氨苄西林（97．68％）、头孢曲松（67．44％）、哌拉西林（65．12％）、头孢噻肟（62．79％）、头孢他啶（58．14％）、头孢唑啉（55．81％）、头孢吡肟（53．49％）、头孢西丁（51．16％）、环丙沙星（44．19％）、氨曲南（41．86％）、头孢哌酮／舒巴坦（20．93％）、阿米卡星（0％）、亚胺培南（0％）。亚胺培南有较好的体外抗菌活性；25株大肠埃希茵中检出CTX-M-G1，其中9株同时检出TEM、SHV、CTX-M-G1、ISEcp1B及I类整合子，ECO3、5同时检出IS903，ECO3检出IS26；在EC05中，CTX-M-G1上游是ISEcp1B。提供-35及-10位点两个启动子，一个右反向重复序列（IRR），下游是插入序列IS903组成复合转座子。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。
- 江洁华廖伟娇易建云陈涛苏秀馨李翊泉徐韫健
- 关键词：Β内酰胺酶类大肠杆菌药物耐受性
- ISEcp1B介导铜绿假单胞菌CTX-M型ESBLs传播的分子机制研究被引量：1
- 2008年
- 目的了解CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在铜绿假单胞菌传播的分子机制。方法用K ir-by-Bauer(K-B)药敏法分析26株铜绿假单胞菌的耐药性;用多重聚合酶链式反应(PCR)扩增ESBLs、ISEcp1B插入序列及I类整合子;用套式PCR在Ⅰ类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒。结果26株多重耐药铜绿假单胞菌对下列抗生素的耐药率为:(1)头孢噻肟(69.23%)、哌拉西林(65.38%)、替卡西林/克拉维酸(65.38%)、头孢他啶(57.69%)、头孢吡肟(46.15%)、环丙沙星(50.00%)、氨曲南(46.15%)、阿米卡星(34.62%)、亚胺培南(30.77%)、头孢哌酮/舒巴坦(23.08%);(2)11株铜绿假单胞菌中检出CTX-M-G1,其中4株同时检出TEM、SHV、CTX-M-G1、ISEcp1B及I类整合子,I类整合子内未扩增出β-内酰胺酶;(3)ISEcp1B下游均连接CTX-M型ESBLs,ISEcp1B右端有一个反向重复序列,为转位酶提供作用位点;-35及-10位点各有一个启动子,对下游不同的CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。
- 易建云江洁华廖伟娇陈涛苏秀馨李翊泉徐韫健
- 关键词：铜绿假单胞菌转座子整合子
- 头孢西丁诱导产ACT-1型AmpC酶大肠埃希菌的比较蛋白质组学研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究产AmpC酶大肠埃希菌在头孢西丁诱导前后的蛋白质谱差异，筛选有价值的靶位。方法提取产ACT-1AmpC酶大肠埃希菌在头孢西丁诱导前后的全菌蛋白，应用双向凝胶电泳技术分析和Bluesilver法染色。凝胶图像分析后，对差异蛋白质进行MALDI-TOF质谱分析。结果在所鉴定的8个差异蛋白当中，AmpC酶、外膜蛋白Ⅱ和转座酶表达显著上调，而磷酸转移酶系统的葡萄糖特异性组分ⅡA蛋白、抗碲酸盐蛋白、丙三醇磷酰基二酯酶、硫醇过氧化物酶及细菌分化蛋白FtsZ表达下调。结论所鉴定的这些差异蛋白将为阐明产AmpC酶大肠埃希菌耐药产生的机制提供线索，也为筛选具有潜在价值的靶位提供理论依据。
- 廖伟娇江洁华陈涛苏秀馨潘思争徐韫健易建云魏小平李翊泉
- 关键词：大肠埃希菌AMPC酶耐药性蛋白质组学
- 产ESBLs与AmpC大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分析被引量：5
- 2007年
- 目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与AmpC酶大肠埃希菌(escherichia coli,ECO)和肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KPN)的基因型特征。方法用表型确证试验从临床分离的74株ECO和KPN中筛选出16株产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)、4株产AmpC酶及25株产ESBLs+AmpC菌株。应用多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增菌株的TEM,SHV和CTX-M-G1型超广谱β-内酰胺酶基因和DHA-1,ACT-1型AmpC酶基因,并对PCR产物经凝胶电泳后进行初步的分析。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带TEM,SHV,CTX-M-G1,DHA-1和ACT-1基因的检出率分别为54.2%,50.0%,62.5%,57.1%,35.7%;29.4%,52.9%,41.2%,66.7%,46.7%。相当一部分菌株同时携带2种或2种以上的基因型。结论产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,存在多种耐药基因。应采取积极的措施防止产酶菌株的流行。
- 廖伟娇林丽江洁华易建云
- 关键词：肺炎克雷伯菌超广谱Β-内酰胺酶AMPC酶基因型
- 产CTX-M超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌传播的分子机制研究被引量：6
- 2009年
- 目的研究肺炎克雷伯菌(KPN)中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的其传播机制。方法用K-B药敏法分析53株肺炎克雷伯菌的耐药性;用多重PCR技术扩增ESBLs、AmpCI、SEcp1BI、S903I、S26等插入序列及Ⅰ类整合子,用套式PCR在Ⅰ类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒,用长片段PCR扩增ISEcp1B下游的CTX-M型ESBLs全序列并测序。结果17株肺炎克雷伯菌中检出CTX-M-G1,其中6株同时检出ISEcp1B、TEM、SHV、CTX-M-G1及Ⅰ类整合子,KPN 49、9检出DHAI、S903,KPN 9检出PSE;套式PCR在Ⅰ类整合子内未检出β-内酰胺酶基因,KPN 49整合子内检出二氢叶酸还原酶(dhfr)和核苷转移酶基因(aad2);KPN 49检出CTX-M ESBLs新的基因亚型,全长876 bp,与blaCTX-M-14相比在825 bp处有1个核苷酸不同,导致1个氨基酸不同,第275位由脯氨酸取代谷氨酰胺;KPN 49、9 blaCTX-M-Like的上游是ISEcp1B的遗传元件,提供-35及-10位点两个启动子及1个右反向重复序列(转位酶识别位点),下游是插入序列IS903提供反向重复序列组成复合转座子。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。
- 江洁华廖伟娇徐军易建云陈涛徐韫健李翊泉
- 关键词：肺炎克雷伯菌转座子整合子
- CTX-M型阴沟肠杆菌插入序列的检测
- 2010年
- 目的研究插入序列ISEcp1B及超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamase,ESBLs)、AmpC酶基因在CTX-M型阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae,ECL)中的分布,并分析其与耐药的关系。方法用MIC法分析2株含CTX-M基因的阴沟肠杆菌的耐药性;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增ESBLs、AmpC、ISEcp1B基因及I类整合子,对PCR产物进行DNA测序。结果 2株阴沟肠杆菌对青霉素类、四代头孢菌素、喹诺酮类和呋喃类抗生素耐药,对氨基糖苷类和碳青霉烯类表现为敏感。在ECL15同时检出TEM、CTX-M-G1、ACT-1、I类整合子及ISEcp1B基因;在ECL45同时检出SHV、CTX-M-G1及ISEcp1B基因。ECL45(400 bp)ISEcp1B的右端均连接一个反向重复序列,有-35及-10两个启动子,与CTX-M型ESBLs编码起始距离不相同,与ECL15序列一致,GenBank登录号:EF437434;ECL45(500 bp)无反向重复序列,只有一个-35启动子,与CTX-M型ESBLs编码起始距离不相同,与ECL15序列不相同,GenBank登录号:EF441350。结论在CTX-M型阴沟肠杆菌中检出2种新的插入序列ISEcp1B,其对CTX-M的高水平表达和传播可能起重要的调控作用。
- 廖伟娇江洁华徐韫健李翊泉张丽梅
- 关键词：阴沟肠杆菌
- 插入序列ISEcp1B在革兰阴性杆菌中的分布及基因多态性分析被引量：1
- 2008年
- 目的研究插入序列ISEcp1B基因在革兰阴性杆菌中的分布及多态性分析。方法用K-B药敏法分析143株革兰阴性杆菌的耐药性;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增ESBLs、AmpC及ISEcp1B基因,并进行DNA测序。结果CTX-M-G1及ISEcp1B基因的总检出率分别为41.26%及16.08%;ISEcp1B插入序列的在各菌种的检出率分别为大肠埃希菌9株占20.93%、肺炎克雷伯菌6株占11.32%、铜绿假单胞菌5株占13.89%、阴沟肠杆菌2株占25.00%、弗氏柠檬酸杆菌1株占25.00%;插入序列ISEcp1B阳性株对头孢菌素的耐药率显著高于阴性株(P<0.01),在体外对亚胺培南有较好的抗菌活性;对ISEcp1BPCR产物进行测序,发现其下游均连接CTX-M型ESBLs,暂未见其他类型的β-内酰胺酶;ISEcp1B右端均连接一个反向重复序列,为转位酶提供作用位点;提供-35及-10两个启动子,对下游不同的CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用,启动子与CTX-M型ESBLs编码起始距离长短不一,并有不同程度的突变,呈多态性。结论插入序列ISEcp1B较广泛分布于革兰阴性杆菌,增加了CTX-M型ESBLs水平播散的危险性,并对其表达起调控作用。
- 廖伟娇江洁华陈涛苏秀馨潘思争徐韫健易建云魏小平李翊泉
- 关键词：革兰阴性杆菌转座子
