山东省医药卫生科技发展计划项目(2007HZ039)
- 作品数：5 被引量：15H指数：4
- 相关作者：栾希英王国艳王斐斐李广云张思英更多>>
- 相关机构：滨州医学院山东省千佛山医院更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA阻断B7H1在人胎盘间充质干细胞上表达对其黏附和迁移的影响
- 2011年
- 背景:人胎盘间充质干细胞表达的共刺激分子B7H1在其负性免疫调节作用中发挥着重要作用,但B7H1对人胎盘间充质干细胞生物学行为的影响尚未见报道。目的:观察阻断B7H1对人胎盘间充质干细胞黏附和迁移的影响。方法:采用消化法分离、培养人胎盘间充质干细胞,体外扩增培养3代后用于实验。用流式细胞仪及RT-PCR检测人胎盘间充质干细胞对B7H1的表达。用阳离子脂质体法将针对B7H1的siRNA转染入细胞,应用RT-PCR法检测B7H1基因在mRNA水平的变化。然后应用细胞计数法检测人胎盘间充质干细胞的黏附能力,Transwell法检测迁移能力。结果与结论:人胎盘间充质干细胞高表达B7H1,siRNA转染能有效阻断B7H1的表达;接种后0.5h阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率与对照组相比差异无显著性意义,但在接种后1,3h阻断组细胞黏附率均明显高于对照组(P<0.05);Transwell检测结果显示,在SDF-1α单独存在条件下、DMEM-LG完全培养基或者人胎盘间充质干细胞培养上清条件下,阻断组细胞的迁移数量均比对照组显著减少(P<0.01)。结果表明阻断B7H1的表达后,人胎盘间充质干细胞的黏附能力增强,而迁移能力受到抑制。提示B7H1在人胎盘间充质干细胞的黏附和迁移中发挥重要作用。
- 张思英王国艳都海波栾希英
- 关键词：人胎盘间充质干细胞SIRNA迁移
- PD-L1在人胎盘源间充质干细胞对脐血CD8^+T细胞免疫调节中的作用被引量：6
- 2012年
- 目的:研究PD-L1在人胎盘源间充质干细胞(Human placenta mesenchymal stem cell,hPMSCs)介导的对脐血CD8+T细胞活化、周期及对IL-17分泌免疫调节中的作用。方法:RT-PCR及FCM检测hPMSCs对PD-L1的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA阻断PD-L1在hPMSCs上的表达;免疫磁珠分选脐血CD8+T细胞;FCM分析阻断PD-L1后,hPMSCs对PHA刺激下CD8+T细胞活化、周期及PMA活化下CD8+T细胞分泌IL-17的影响。结果:hPMSCs高表达PD-L1分子,PD-L1 siRNA能有效阻断hPMSCs对PD-L1的表达;FCM分析结果显示,hPMSCs能够抑制CD8+T细胞对CD69的表达,但阻断PD-L1后,CD69的表达与未阻断组相比无明显变化;与未阻断组相比,处于G0/G1期的CD8+T细胞数量明显减少,处于S期的细胞数量明显增加;在hPMSCs存在条件下,脐血CD8+T细胞对IL-17的分泌明显增加,阻断PD-L1的表达后,IL-17的分泌被进一步上调。结论:PD-L1在hPMSCs上表达能够协同hPMSCs对脐血CD8+T细胞周期的抑制,并且能够抑制hPMSCs上调CD8+T细胞对IL-17的分泌。
- 王国艳李广云王斐斐张思英都海波栾希英
- 关键词：PD-L1
- PDL2在人胎盘源间充质干细胞对外周血T细胞免疫调节中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的研究程序性死亡配体2（programmed death ligand2，PDL2）在人胎盘源间充质干细胞（human placenta mesenchymal stem cell，hPMSCs）对外周血T细胞活化、增殖及周期免疫调节中的作用。方法RT-PCR、激光共聚焦（1aser scanning confocal microscopy，LSCM）及流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测PDL2在hPMSCs上的表达；应用PDL2siRNA阻断PDL2在hPMSCs上的表达；密度梯度离心法分离纯化T细胞；FCM分析阻断PDL2后，hPMSCs对植物血凝素（PHA）刺激下T细胞活化及波佛脂（PMA）活化下T细胞增殖和周期的影响。结果hPMSCs高表达PDL2分子，PDL2siRNA能有效阻断PDL2在hPMSCs上的表达；FCM分析结果显示，hPMSCs能够抑制CD69在T细胞上的表达，但阻断PDL2后，CD69的表达与未阻断组相比无明显变化；hPMSCs能够显著抑制PMA活化的T细胞的增殖，且阻断PDL2后，其增殖指数被进一步上调；与未阻断组相比，处于G0／G1期的T细胞数量明显减少，处于S期的细胞数量明显增加。结论PDL2在hPMSCs上表达能够协同hPMSCs对外周血T细胞周期的抑制，进而抑制T细胞的增殖。
- 王国艳李广云林艳华王斐斐张丽霞栾希英
- 关键词：间充质干细胞胎盘T细胞
- 表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siR-NA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响。结果除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用。结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用。
- 王国艳王斐斐李恒张丽霞栾希英
- 关键词：PD-L1PD-L2T细胞IL-17
- 人胎盘源间充质干细胞对脐血CD8^+T细胞活化及周期和IL-17分泌的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨人胎盘源间充质干细胞(hPMSCs)对脐血CD8+T细胞活化、周期及IL-17分泌的调节作用,为其在临床细胞治疗中的应用提供理论依据。方法:应用消化法分离、培养hPMSCs,体外扩增培养3代后用于实验;应用免疫磁珠法分选脐血CD8+T细胞;应用流式细胞术(FCM)分析hPMSCs对植物血凝素(PHA)刺激下脐血CD8+T细胞早期表型CD25、CD69表达和细胞周期的影响;佛波酯(PMA)刺激下脐血CD8+T细胞对IL-17分泌的影响。结果:hPMSCs体外可使脐血CD8+T细胞滞留于细胞周期的G0/G1期,下调活化脐血CD8+T细胞早期表型CD25、CD69的表达,上调其IL-17的分泌。结论:hPMSCs体外可通过对脐血CD8+T细胞周期的影响抑制其活化,并且上调脐血CD8+T细胞IL-17的分泌。
- 王国艳张思英李广云王斐斐都海波栾希英
- 关键词：CD8+T细胞IL-17
