浙江省科技攻关计划(2008C14082)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张琳法萍萍高基民胡志明梁中锟更多>>
- 相关机构：南方医科大学温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- SA-hIL2双功能融合蛋白的研制及其生物学鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:制备链亲和素标记的人白细胞介素-2(SA-hIL2)融合蛋白,并研究其生物学功能。方法:构建SA-L-IL2-pET24重组表达质粒,在大肠杆菌中表达SA-hIL2融合蛋白,对表达的SA-hIL2融合蛋白采用镍金属螯合(Ni-NTA)层析柱进行纯化,透析复性。CCK-8法检测SA-hIL2融合蛋白对PHA刺激的人外周血淋巴细胞的增值活性,流式细胞仪分析SA-hIL2融合蛋白对生物素化的B16.F10肿瘤细胞表面锚定修饰效率。结果:SA-hIL2在大肠杆菌中实现了高效表达,约占菌体总蛋白的20%,制备的SA-hIL2融合蛋白纯度达到95%,并具有双重活性,即hIL-2促进PHA刺激的人外周血淋巴细胞的增值活性和SA介导的高效结合至已生物素化的B16.F10肿瘤细胞表面的功能(表面锚定修饰效率约95%)。结论:研制的SA-hIL2融合蛋白具有双重活性,可为研制表面修饰的新型肿瘤细胞疫苗提供基础。
- 张琳胡志明法萍萍梁中锟高基民
- 关键词：白细胞介素2链亲和素融合蛋白
