教育部留学回国人员科研启动基金(03-406-01)
- 作品数：5 被引量：19H指数：2
- 相关作者：陈长志成少飞杨岷叶清王学宁更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海第二医科大学附属仁济医院江苏省苏北人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 组织工程心脏瓣膜裸鼠体内移植的实验研究
- 2008年
- 目的将人血管混合细胞体外动态种植于脱细胞牛心包构建的组织工程心脏瓣膜(Tissue engineered heart valves,TEHVs)并移植入裸鼠体内,观察其生物学特征变化。方法将体外动态构建的TEHVs移植入裸鼠体内,30d时取材,观察组织、细胞的超微结构变化,种子细胞的生长行为和生物学特征变化,种子细胞与支架材料的黏附性,TEHVs的生物相容性等参数。结果组织学观察见:细胞数量、分层数较移植前增多,并有大量细胞浸润入TEHVs深层组织内;免疫组化显示:TEHVs上细胞的内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤维细胞Fibronectin相关抗原呈阳性表达;扫描电镜见:裸鼠体内移植后细胞数量较移植前增多,细胞表面和细胞之间的网状胶原结构较埋置前增多明显;透射电镜可见:W-P小体、质膜小泡、密斑、密体、微丝等特征性结构。结论TEHVs细胞能够在裸鼠体内定向分化、增殖,生物学特征无改变,TEHVs生物相容性良好。
- 成少飞杨岷陈长志叶清薛松
- 关键词：心脏瓣膜脱细胞牛心包裸鼠
- 脱细胞牛心包种植人血管混合细胞构建组织工程心脏瓣膜
- 2008年
- 目的探讨在脱细胞牛心包上种植人血管混合细胞构建组织工程心脏瓣膜的方法与效果。方法将体外培养的人血管混合细胞种植在脱细胞牛心包材料上，观察种子细胞形态学和免疫组织化学变化和牛心包超微结构变化，并测定内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的活性。结果种子细胞全层覆盖脱细胞牛心包表面，并浸润至组织内部生长；牛心包表面为扁平、片状、分层的细胞覆盖，细胞表面有少量绒毛和纤细的纤维结构。免疫组化显示内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤细胞Fibronectin相关抗原呈阳性表达；种子细胞能分泌纤溶活性物质t-PA和PAI-1。结论人血管混合细胞种植后附着满意，与脱细胞牛心包生物相容性好，生长状况好，并具有内皮功能。
- 成少飞杨岷陈长志叶清薛松
- 关键词：心脏瓣膜脱细胞牛心包
- 牛心包组织工程心脏瓣膜支架脱细胞方法的比较被引量：18
- 2005年
- 目的对比去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法去除新鲜牛心包组织上细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的平台。方法应用3种方法处理新鲜牛心包组织,用光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果和胶原纤维、弹力纤维改变;用热皱缩实验、拉力测试观察基质的物理性能变化;用DNA抽提比较脱细胞前后细胞数量差异。结果 3种方法均能完全去除细胞,与去污剂-酶消化法比较,另2种方法对基质破坏明显。结论去污剂-酶消化法脱细胞效果好,且有良好的保护基质的能力。
- 杨岷陈长志成少飞王学宁叶清王维俊王小妹
- 关键词：去细胞基质组织工程心脏瓣膜脱细胞牛心包
- 心瓣膜组织工程中种子细胞原代联合培养的研究
- 2008年
- 我们采用人大隐静脉组织块法原代联合培养人血管内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞，对其培养、扩增条件加以摸索，对细胞进行鉴定，获得TEHVs所需的种子细胞。
- 杨岷成少飞陈长志朱亚彬王学宁
- 关键词：种子细胞心瓣膜人血管内皮细胞人大隐静脉平滑肌细胞成纤维细胞
- 心瓣膜组织工程中种子细胞原代联合培养的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的：探讨体外原代联合培养、扩增，鉴定同一来源的人血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞的方法，为组织工程心脏瓣膜的构建提供理想的种子细胞。方法：无菌条件下取冠状动脉旁路移植术中剩余大隐静脉3cm～8cm，组织块培养法原代培养混合血管细胞，DMEM培养液培养、扩增混合血管细胞。倒置显微镜、免疫组化方法对内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞进行鉴定。结果：倒置显微镜显示原代细胞及经传代培养后的细胞，呈现内皮样细胞、成纤维样细胞混合生长的特征。免疫细胞化学检测示内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤维细胞纤维连接蛋白相关抗原呈阳性反应。细胞经3～4次传代，细胞数量可增殖达到8×10^6～10×10^6。结论：使用组织块法原代培养可获得内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞，三种细胞经体外联合培养、传代可以达到组织工程心脏瓣膜种子细胞的足够数量。
- 成少飞杨岷陈长志王学宁叶清王维俊童菊芳
- 关键词：心脏瓣膜细胞培养
