黑龙江省自然科学基金(9717)
- 作品数:5 被引量:37H指数:4
- 相关作者:马春谢振华王爱民刘长振安丽荣更多>>
- 相关机构:哈尔滨医科大学清华大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 肌肽对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用被引量:20
- 2001年
- 本研究采用过氧化氢和谷氨酸纳作用于PC12细胞 ,成功的制作了氧化应激损伤的细胞模型。将培养的细胞进行分组 :正常对照组 ;损伤组 ;分别给予过氧化氢和谷氨酸钠 ;肌肽保护组 ,同损伤组的制备 ,但予先加入肌肽。用MTT法检测了各组细胞的生长状态并测定了LDH活性 ,观察了细胞形态和蛋白电泳等。结果表明 :在保护组 ,MTT的测定结果高于损伤组 ,LDH低于损伤组 ,其细胞生长状态和蛋白质电泳结果也与损伤组有显著差异 ,证明了肌肽对PC12细胞的氧化应激损伤有明显保护作用。
- 刘长振王爱民谢振华聂丹瑶马春杨歌德贺雨虹
- 关键词:PC12细胞肌肽氧化应激损伤
- PC12细胞APE/ref-1cDNA的克隆和表达被引量:4
- 2001年
- APE Ref 1是双功能核蛋白 ,它既能在碱基切除修复过程中切除脱嘌呤 脱嘌啶位点 ,又能促进包括AP 1、Myb和NF κB等受氧化还原调节的转录因子对DNA的结合 .从PC12细胞中抽提总RNA ,经逆转录PCR(RT PCR)扩增出APE ref 1cDNA并克隆到pQE3 1表达质粒上的BamHⅠ和PstⅠ位点间 .经测序表明 ,PC12细胞的APE ref 1cDNA以正确的阅读框架重组进入表达质粒 ,表达重组质粒pQE3 1 APE在宿主菌BL2 1中得到稳定表达 .SDS PAGE鉴定表明 ,带 6个组氨酸的融合蛋白分子量为 3 8kD ,并经Ni NTA琼脂糖亲和纯化得到电泳纯融合蛋白 .Western印迹证明重组蛋白为APE ref 1融合蛋白 .
- 谢振华王爱民刘长振马春
- 关键词:PC12细胞APE/REF-1RT-PCR克隆限速酶
- 肌肽对H_2O_2、Aβ_(25-35)诱发PC12细胞损伤的保护作用被引量:10
- 2002年
- 目的 研究肌肽对H2 O2 和 β淀粉样蛋白片段 (Aβ2 5- 3 5)诱发PC12细胞损伤的保护作用。方法 将培养的PC12细胞分为 3组 :正常对照组 ;损伤组 ,分别加入H2 O2 和Aβ2 5- 3 5;保护组 ,在用H2 O2 、Aβ2 5- 3 5处理前 30min加入肌肽。用LDH法、MTT法观察肌肽的神经保护作用。结果 保护组LDH活性显著少于损伤组 (P <0 .0 1) ;MTT测定结果显著高于损伤组 (P <0 .0 1)。结论 肌肽对H2 O2 和Aβ2 5- 3
- 安丽荣马春李益民杨树才
- 关键词:肌肽AΒ25-35PC12细胞
- PC12细胞中氧化还原因子-1对过氧化氢和谷氨酸损伤的不同反应被引量:1
- 2007年
- 目的通过研究PC12细胞抗氧化应激的氧化还原因子-1(apurinic/apyrimidimic endonuclase/redox factor1,APE/Ref-1)分子在过氧化氢和谷氨酸损伤过程中表达水平的变化,探讨谷氨酸对神经细胞损伤的分子机制。方法以PC12细胞作为神经细胞模型,以200和400μmol/L浓度的过氧化氢或以10和20mmol/L谷氨酸钠处理PC12细胞,用噻唑蓝法(MTT法)检测细胞的损伤程度,以Western blot方法测定APE/Ref-1表达水平。结果过氧化氢对PC12细胞的APE/Ref-1蛋白表达具有诱导作用。谷氨酸对PC12细胞的APE/Ref-1蛋白表达无影响。结论谷氨酸对PC12细胞的损伤过程中,所产生的氧化应激作用的水平很低,远不足以引起抗氧化应激的APE/ref-1蛋白的代偿反应。
- 谢振华刘长振王爱民马春
- 关键词:PC12细胞APE/REF-1H2O2
- Carnosine对Aβ_(25-35)诱发PC12细胞损伤的神经保护作用被引量:7
- 2002年
- 目的 研究 Carnosine对 β淀粉样蛋白片段 (Aβ2 5- 3 5)诱发 PC1 2细胞损伤的神经保护作用。方法 将培养的 PC1 2细胞分为三组 :正常对照组、损伤组和保护组。损伤组用 Aβ2 5- 3 5处理细胞 ,保护组在用 Aβ2 5- 3 5处理前 30 min加入 Carnosine。使用细胞形态学方法、LDH法、MTT法观察 Carnosine的神经保护作用。结果 通过形态学方法 ,保护组细胞数显著比损伤组多 ,受损变圆的细胞数较少。保护组 LDH活性显著少于损伤组(P<0 .0 1 ) ;MTT显著高于损伤组 (P<0 .0 1 )。结论 Carnosine对 Aβ2 5- 3 5诱发 PC1 2细胞损伤有显著的保护作用。
- 安丽荣马春谢振华申峰王爱民
- 关键词:PC12细胞CARNOSINEΒ淀粉样蛋白ALZHEIMER病