湖北省科技攻关计划(2006AA301A06)
- 作品数：11 被引量：33H指数：3
- 相关作者：陈知水何凡吴敏徐胜元郑翔更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较被引量：3
- 2009年
- 目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β（TGF-β）；TGF-β＋白细胞介素6（IL-6）；TGF-β＋IL-6＋SRL；TGF-β＋IL-6＋CsA。72h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平，观察CD4^＋T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4^＋T淋巴细胞体外分化的影响。结果在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后，TGF-β可诱导Foxp3^＋细胞（调节性T淋巴细胞，Treg）的增殖与分化，而TGF-β＋IL6可诱导Th17细胞的增殖与分化。在培养体系中加入SRL和CsA，均可使Th17细胞的增殖与分化减少；SRL可促进Treg的增殖与分化，而CsA抑制Treg的增殖与分化。结论SRL可以促进CD4^＋T淋巴细胞向Treg增殖与分化，而抑制Th17细胞的增殖与分化；CsA既抑制Treg的增殖与分化，又抑制Th17细胞的增殖与分化。
- 何凡陈知水蔡明徐胜元吴敏
- 关键词：西罗莫司环孢菌素T淋巴细胞
- 门静脉输注供者脾细胞诱导的供者特异性免疫低反应性
- 2009年
- 目的探讨经门静脉输注供者脾细胞能否诱导皮肤移植小鼠产生供者特异性的免疫低反应性及其可能机制。方法取Balb／c小鼠，随机分为空白对照组（经小鼠门静脉输注RPMI1640培养液）、受者脾细胞组（经小鼠门静脉输注Balb／c小鼠脾细胞）、供者脾细胞组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞）、空白移植对照组（经小鼠门静脉输注RPMI1640培养液，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）、实验对照组（经小鼠门静脉输注Balb／c小鼠脾细胞，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）、实验组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞，7d后移植C57BL／6小鼠的皮肤）以及第三方移植组（经小鼠门静脉输注C57BL／6小鼠脾细胞，7d后移植C3H小鼠的皮肤）。记录空白移植对照组、实验对照组、实验组和第三方移植组移植皮肤的存活时间，并观察移植皮肤的病理学变化；脾细胞输注后7d，分别获取空白对照组、受者脾细胞组和供者脾细胞组小鼠的外周血、脾脏和肝脏，用流式细胞仪测定样本中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞（CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞）的比例。结果实验组移植皮肤的存活时间为（19．8±4．6）d，明显长于空白移植对照组、实验对照组和第三方移植组，但仍未达到长期存活。皮肤移植后7d，空白移植对照组和实验对照组的移植皮肤呈现重度急性排斥反应的病理学改变，而实验组移植皮肤呈现中度急性排斥反应的病理学改变。供者脾细胞组外周血、肝脏和脾脏中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞比例明显高于空白对照组和受者脾细胞组。结论门静脉输注供者脾细胞可特异性地延长供者皮肤移植物的存活时间，减轻移植物的排斥反应，该效应可能与受者体内的CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞增加有关。
- 徐胜元何凡吴敏蔡明丁召郑翔陈知水
- 关键词：门静脉免疫耐受
- 抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植治疗组(每日注射3 g/L anti-IL-6 mAb 0.1 mL)和移植模型组(注射等量生理盐水)。ELISA法检测受鼠移植术后第3、6天外周血IL-6的表达水平,观察各组移植心脏存活时间,病理分析检测排斥反应程度,流式细胞术(FCM)检测各组受鼠脾脏及移植心脏中CD4+CD25+调节性T细胞比例变化,RT-PCR检测移植心脏IL-6I、FN-γI、L-17、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平。结果①治疗组外周血IL-6表达水平较模型组明显降低(P<0.01);②治疗组移植心脏存活时间较模型组明显延长[(22.0±2.3)d vs(7.7±0.8)d,P<0.01],排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);③治疗组移植心脏中IFN-γI、L-6I、L-17和RORγt mRNA表达水平较模型组显著下降(均P<0.05),脾脏及移植心脏中浸润的CD4+CD25+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论anti-IL-6 mAb治疗可抑制Th1、Th17型细胞因子的分泌,促进CD4+CD25+Foxp3+T细胞产生,抑制单个核细胞浸润并有效延长小鼠同种移植心脏的存活时间。
- 雷钧何凡吴敏郑翔李舒媛陈知水
- 关键词：心脏移植急性排斥反应白细胞介素6单克隆抗体
- 肝小肠联合移植的术式探讨及术后处理一例被引量：2
- 2012年
- 目的 总结1例保持门静脉连续性的小肠双造口方式肝小肠联合移植病例的手术操作和术后处理的经验。方法受者为短肠综合征合并肝功能不良的男性患者，供者为尸体供者。联合切取器官，确保供者肠系膜上静脉和门静脉的连续性。移植肝静脉采用背驼式吻合，受者自体门静脉和供肝门静脉端侧吻合，胆道端端吻合，供者肝动脉和肠系膜上动脉吻合于受者腹主动脉；移植小肠约2ITI，两端双造口于腹壁，未作肠道吻合。采用人源化抗CD52单克隆抗体诱导治疗，维持期单用他克莫司。行内镜下黏膜活检监测排斥反应。结果术后1个月内，患者发生腹腔感染和疑似排斥反应各1次，分别经过手术和甲泼尼龙冲击治疗后痊愈。随访6个月，受者移植肝和小肠功能恢复良好，但仍有腹泻，需补充静脉营养，体重尚未完全恢复。结论保持门静脉连续性的小肠双造口方式肝小肠联合移植可以简化手术操作，发生外科并发症的风险小，有利于肝脏和小肠功能恢复及术后排斥反应的监测，但是消化液未能进入移植小肠，也影响了受者的恢复。
- 魏来陈知水杨传永曹志新明长生杜敦峰陈栋郭晖周琦陈孝平
- 关键词：肝移植小肠移植
- 肝窦内皮细胞在肝脏免疫耐受中的作用被引量：3
- 2009年
- LSEC是一群独一无二的器官常驻抗原提呈细胞。它们位于一个理想的解剖位置,能够高效而迅速地摄取外源性抗原,并通过其表面的MHC II和I类分子将处理后的抗原肽分别提呈给CD4+T细胞和CD8+T细胞,使CD4+T细胞不能向Th1表型分化,甚至变为调节性T细胞;使CD8+T细胞缺乏特异性的细胞毒作用,不能大量分泌IFN-γ和IL-2。同时,LSEC还可以通过多条途径诱导活化的T细胞发生凋亡和影响DC的功能。LSEC的这些功能最终使机体达到对某一抗原的特异性免疫耐受。
- 徐胜元何凡陈知水
- 关键词：肝窦内皮细胞免疫耐受肝脏
- 染料木黄酮在减轻肾间质纤维化中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨染料木黄酮（Genistein）在减轻单侧输尿管结扎模型（UUO）诱导肾间质纤维化中的作用及可能机制。方法将30只SD大鼠随机分为5组，A组：假手术＋DMSO1ml／d×14d；B组：假手术＋Genistein每日20mg／kg体重×14d；C组：UUO＋DMSO1ml／d×14d；D组：UUO＋Genistein5mg／kg体重每日×14d；E组：UUO＋Genistein20mg／kg体重每日×14d。术后14d比较各组大鼠左／右肾重量和长度的比值；酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血清INF-γ和TGF-β1表达；病理观察肾小管扩张和肾间质增生的程度，免疫组织化学观察肾脏α-SMA和ED-1表达。结果C、D、E组左／右肾重量及长度比值均明显高于A、B组，但E组左／右肾重量及长度比值、血清TGF-β1及INF-γ浓度、肾小管扩张分数和肾小管容量分数、α-SMA和ED-1的表达均低于C组。结论染料木黄酮可明显降低由单侧输尿管结扎模型所导致的肾间质纤维化的病理改变，其可能机制是染料木黄酮抑制TGF-β1及INF-γ的表达，从而抑制肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化。
- 何凡蒋继贫徐胜元郑翔陈必成陈知水
- 关键词：染料木黄酮肾间质纤维化TGF-Β1
- 肝癌肝移植术后复发转移的综合治疗
- 2008年
- 目的探讨肝癌肝移植术后复发、转移的综合治疗效果，并分析影响肝癌复发、转移后生存时间的危险因素。方法29例肝癌肝移植术后复发、转移患者，根据不同治疗方式分为综合治疗组（11例）和单纯化疗组（18例）。比较两种治疗方式疗效，采用多元回归分析影响肝癌复发、转移后生存时间的因素。结果与单纯化疗组比较，综合治疗组复发、转移后生存时间明显延长（t=5．617，P〈0．01）。肿瘤TNM分期，病理分型，术后复发、转移时间和复发后治疗方案影响患者的生存时间（t=2．843，3．061，22．781，5．617，P〈0．01）。结论对肝癌肝移植术后复发、转移患者采取综合治疗，可延长患者生存时间，较单纯化疗优越。肿瘤TNM分期，病理分型，术后复发、转移时间和复发后治疗方案是影响复发、转移后患者生存时间的危险因素。
- 何凡陈知水曾凡军杜敦峰刘斌吴敏徐胜元陈孝平
- 关键词：肝肿瘤肝移植复发
- IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究被引量：12
- 2009年
- 目的研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组。观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平。免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况。结果RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达。免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌。结论Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标。
- 雷钧何凡吴敏郑翔李舒媛陈知水
- 关键词：移植排斥反应TH17细胞白细胞介素17干扰素-Γ
- 门静脉输注诱导耐受中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的不同作用
- 2009年
- 目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并比较心脏移植物存活时间。结果:过继输注PVI鼠T细胞后,可以转移耐受;过继输注PVI鼠CD4+T细胞,可使供体来源的C57供心存活时间延长,而对第三系C3H供心存活时间无明显延长。过继输注PVI鼠CD8+T细胞无此效应。结论:在门静脉输注诱导耐受的模型中,CD4+T细胞可以转移耐受,且此耐受为抗原特异性,CD8+T细胞无此效应。
- 何凡陈知水徐胜元蔡明吴敏李红洲
- 关键词：T细胞门静脉输注免疫耐受
- CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用被引量：8
- 2010年
- 目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8^＋T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞占CD4＋T细胞的比例较正常人明显升高,分别为（10.15±1.00）%、（5.30±1.64）%和（3.20±1.18）%,P〈0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T比例明显升高,分别为（15.15±1.50）%和（6.80±1.50）%,P〈0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3＋T细胞增多,CD8＋T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8^＋T细胞浸润,加速肿瘤复发.
- 吴敏何凡徐胜元丁召蔡明李红洲孟凡迎郑翔陈知水
- 关键词：肝移植肝癌肿瘤复发
