国家自然科学基金(3107488)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 离子交换树脂吸附L-色氨酸的动力学研究被引量：5
- 2012年
- 通过静态吸附实验,研究了L-色氨酸在001×7型阳离子交换树脂上的等温吸附和吸附动力学特性。采用动边界模型描述L-色氨酸在该树脂上的交换行为,考察了料液浓度、树脂粒径和温度对交换过程的影响。结果表明,L-色氨酸在001×7型阳离子交换树脂上的吸附等温线符合Langmuir等温方程,且随pH降低,树脂的最大平衡吸附量逐渐增大;交换过程的吸附速率随L-色氨酸浓度和温度的升高而增大,但随树脂粒径的增大而减小;离子交换过程的速度控制步骤为颗粒扩散控制。交换过程的反应速率常数k0为1.199×10 5,反应级数为1.7,表观活化能Ea为19.94kJ mol 1,并得到了动力学总方程式。
- 谢友坪敬科举姚传义卢英华
- 关键词：L-色氨酸离子交换树脂动力学
- 人胰岛素原密码子的优化及其在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2012年
- 依据毕赤酵母偏好密码子,设计合成长效人胰岛素原(human proinsulin,HPI)基因序列,所合成的HPI基因全长为200bp,并在其N端添加信号肽(EEAEAEAEPK)以提高目的蛋白表达.将改造后基因克隆到pPIC9K载体中,构建分泌表达型载体pPIC9K-HPI,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.用遗传霉素G418梯度筛选获得高拷贝菌株,在甲醇诱导下表达分子质量为7.87ku的HPI,利用金属螯合层析纯化蛋白质,胰蛋白酶酶切后利用人胰岛素试剂盒测得生物活性,HPI摇瓶最高产量可达35.4mg/L.该研究为获得大量长效胰岛素基因工程产品奠定研究基础.
- 史莹飞敬科举凌雪萍卢英华
- 关键词：胰岛素原基因改造毕赤酵母
