国家公益性行业科研专项(201203085)
- 作品数：16 被引量：29H指数：3
- 相关作者：胡鲲杨先乐阮记明赵依妮朱凤娇更多>>
- 相关机构：上海海洋大学中国水产科学研究院东海水产研究所广东海洋大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项国家高技术研究发展计划国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 立达霉在草鱼体内的代谢机制研究
- 2018年
- [目的]研究立达霉在草鱼体内的代谢机制。[方法]采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,检测草鱼在立达霉单次口灌200 mg/kg,浸泡9 mg/L剂量条件下,其肝脏组织中立达霉原药含量及代谢产物的种类,研究立达霉在草鱼肝脏组织中的代谢机制。[结果]在口灌组及浸泡组,肝脏组织中的立达霉以原药(M0)为主,高于75.00%;立达霉在草鱼体内代谢产物主要有4种,分别为代谢物N-(2-羧基-6-苯甲基)-N-(甲氧乙酰基)丙氨酸、N-[(2-羟甲基)-6-甲苯基]-N-(羟乙酰基)丙氨酸、N-(2,6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸和N-(2-羟甲基-6-苯甲基)-N-(甲氧乙酰基)丙氨酸甲酯,各代谢产物所占比例均小于10.00%。[结论]立达霉在草鱼肝脏组织中残留应以立达霉原药作为残留检测标识物。
- 吕新美杨宗英姜莺颖董亚萍董亚萍胡鲲
- 关键词：草鱼代谢
- 基于P-糖蛋白基因表达评价尼罗罗非鱼体内恩诺沙星代谢“首过效应”被引量：7
- 2013年
- 为从药物酶的角度建立一种客观评价鱼类"首过效应"的方法,利用荧光定量PCR法测定尼罗罗非鱼(Oreochomis niloticus Linn)肝、肾组织中P-糖蛋白(P-gp)基因表达量,分析了单剂量(40 mg.kg 1)口服给药恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)后,尼罗罗非鱼肠道、肝组织中mRNA水平的相对表达量与ENR血药浓度的时实相关性。实验结果显示:在尼罗罗非鱼肠道、肝组织中,P-gp基因在分子量127 bp处出现了与预期大小相符的特异性扩增片段。对尼罗罗非鱼口灌给药ENR后,ENR能迅速通过肠道进入血浆,其在肠道、肝和血浆中的消除速度较快,其药物时量曲线关系符合一级吸收的二室开放动力学模型。当血浆中ENR浓度达到最高达峰时(1 h),实验组肠道和肝中P-gp基因的相对表达量相对于对照组均表现出显著性差异(P<0.05);当肠道中ENR浓度达到最高峰时(2 h),实验组肠道P-gp基因的相对表达量则表现出极显著差异(P<0.01);当肝中ENR浓度达到最高峰时(2 h),实验组肝P-gp基因的相对表达量与对照组相比则表现出显著性差异(P<0.05)。该结果证实了鱼类P-gp基因参与药物代谢过程,提供了一种从分子水平揭示水产动物体内药物代谢规律的思路。
- 胡鲲程钢吕利群章海鑫王会聪阮记明陈力房文红杨先乐
- 关键词：P-糖蛋白尼罗罗非鱼恩诺沙星首过效应药物代谢
- 中草药延缓嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药性的研究被引量：5
- 2016年
- 为了延缓主要淡水养殖病原菌——嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的耐药性,以嗜水气单胞菌ATCC 7966为出发菌株,评价了其对恩诺沙星、氟苯尼考、盐酸多西环素、复方硫磺间甲氧嘧啶钠和硫酸新霉素等抗菌药物的敏感性;并以恩诺沙星为受试药物,对ATCC7966进行低浓度耐药性诱导,获得最小抑菌浓度(MIC)提高了256倍的耐药性菌株。测定了茉莉花、薄荷叶、连翘等26种中草药对嗜水气单胞菌耐药性的延缓作用,结果表明:板蓝根、射干、苦参、大青叶、车前草、连翘、黄芩及艾草8种中草药均具有延缓嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药性的作用,其中,连翘延缓耐药性的作用最为明显。复筛实验结果表明,经过20代接种后,连翘实验组的耐药性只上升了2倍(对照组上升了16倍)。
- 董亚萍谢欣燕胡鲲杨先乐
- 关键词：嗜水气单胞菌恩诺沙星耐药性中草药
- 利用复方甲霜灵粉防治鱼苗孵化过程中的水霉病被引量：3
- 2017年
- 水霉病是养殖户最头痛的疾病之一,特别在2002年我国明确提出禁止使用孔雀石绿后,更无特效药可以治疗。水霉病主要发生在冬春季节,鱼体、鳍条、鳃等部位长水霉,能在短时间内造成大批鱼死亡。现在大多养殖场都是集约化高密度养殖,客观上造成水霉病的频发。本病例发生在江西省南昌县某养殖场,笔者到现场查看,并用“复方甲霜灵粉”（“复方立达霉粉”或“美婷”）治疗水霉病,效果明显。现介绍如下,供基层水产疾病技术服务人员和养殖户参考。
- 苏惠冰尹清干杨先乐胡鲲
- 关键词：水霉病甲霜灵孵化过程鱼苗水产疾病
- 盐度对吡喹酮预混剂在草鱼体内吸收及其残留消除规律的影响被引量：2
- 2015年
- 运用高效液相色谱法(HPLC),在以每千克鱼体质量单次口灌500mg剂量条件下,对比吡喹酮预混剂中有效成分吡喹酮在淡水及半咸水草鱼体内的药动学差异。结果显示,在不同的试验组间,血浆、肌肉、肝脏和肾脏在各个时间点的药物浓度存在极显著性差异(P<0.01);淡水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的药物峰质量浓度(Cmax)分别为1.13、1.43、5.55和3.72μg/mL,达峰时间均为1h;半咸水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的药物峰质量浓度(Cmax)则分别为0.98、1.10、3.99和3.20μg/mL,达峰时间均为1h,表明淡水条件下草鱼体内的吡喹酮质量浓度高于在半咸水条件,而对吸收没有造成显著影响;淡水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的消除半衰期分别为14.82、5.99、17.51和5.36h,半咸水试验组的血浆、肌肉、肝脏和肾脏的消除半衰期分别为10.77、5.57、3.49和3.37h,明显比淡水试验组的消除半衰期短,说明在水体中,渗透压可能会影响吡喹酮在草鱼体内的吸收和消除,建议在实际生产中吡喹酮预混剂的用药方案要根据养殖水体情况做适当调整。
- 谢欣燕赵依妮杨先乐胡鲲
- 关键词：半咸水草鱼
- 水霉菌蛋白制备方法的比较与分析
- 2013年
- 比较了3种方法对8种水霉菌(Saprolegnia)破壁处理制备蛋白的效果,并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明,加石英砂和液氮混合研磨处理制备的蛋白效果最好,条带清晰,该方法操作简便、快捷、较为常用,可有效地区分水霉菌株分子遗传学背景的差异,适用于水霉菌分子流行病学研究。
- 宋鹏鹏胡鲲杨先乐
- 哈氏弧菌(Vibrio harveyi)recA基因的克隆与原核表达被引量：3
- 2018年
- SOS反应不仅能够促使细菌本身产生耐药性,而且与细菌耐药基因的水平转移密切相关。rec A是细菌SOS反应的重要基因,影响SOS反应的开启和关闭。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因rec A（recombinase A）,并对rec A基因进行了生物信息学分析。并构建了rec A基因的原核表达载体PGEX-rec A,在大肠杆菌BL21（DE3）中成功诱导表达,对Rec A蛋白的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,rec A基因的开放阅读框为693 bp,编码230个氨基酸,Rec A蛋白理论分子量为25.29 k D。重组蛋白表达的优化条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。
- 常云胜周维高增鸿丁燏
- 关键词：哈氏弧菌RECA基因克隆原核表达
- 异育银鲫GABA A受体γ2亚基全长克隆及生物信息学分析
- 2015年
- 近年来GABA A受体亚基特异性在药物筛选、研发过程中的应用得到广泛地关注,其中有关α1、β2和γ2三种功能性亚基的研究最为深入。异育银鲫因其良好的生长、繁殖优势,在国内得到广泛养殖。采用RACE法克隆得到了异育银鲫GABA A受体γ2亚基基因全长cDNA,并进行了生物信息学分析。该基因长2 763 bp,其中CDS区长1437 bp,可编码477个氨基酸的前体蛋白。预测蛋白分子量55.3 k D,理论等电点9.13。异育银鲫体内GABA A受体γ2亚基氨基酸序列N端存在1个长度为35个氨基酸的信号肽,4个长度分别为23、20、23和23个氨基酸的跨膜区,3个N-糖基结合位点和2个O-糖基化位点,1个特异性结构域,其氨基酸序列具有明显的氯离子门控通道家族特征。氨基酸序列与其他物种氨基酸序列的同源性都在89%以上,表明该蛋白属于GABA A受体亚基家族。系统进化树表明异育银鲫与斑马鱼聚为一支,亲缘关系最近。
- 赵依妮胡鲲孙琪杨先乐阮记明周爱玲
- 关键词：异育银鲫GABA克隆生物信息学分析
- 鲫血髓过氧化物酶的表达及其与血药浓度的关联性被引量：1
- 2016年
- 为了研究在吡喹酮代谢过程中,鲫血髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)m RNA表达与血药浓度的相关性,以体重为(80±10.5)g的鲫鱼(Carassius auratus)为试验动物,单剂量(10 mg/kg)口灌吡喹酮(praziquantel,PZQ)后,在鲫血液中选取β-actin为内参基因,通过设计特异性引物,利用荧光定量PCR,分析了不同时间点鲫血MPO m RNA水平的相对表达量的变化;利用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定了吡喹酮在鲫鱼体内的血药浓度,分析两者之间的相关性。结果显示,吡喹酮能够迅速进入血液,并被快速消除,药时数据符合二室开放模型。在1 h时,血液中吡喹酮的浓度达到最大值,为2.85?g/m L,96 h后血液中检测不到吡喹酮;灌药后,MPO基因表达量随时间呈先升后降趋势,在1 h时髓过氧化物酶表达量最高。此外,0.25 h、0.5 h、1 h、3 h与6 h组与对照组差异性极显著(P<0.01),12 h组与对照组差异显著(P<0.05)。48 h与96 h组与对照组差异不显著(P>0.05)。相关性分析发现,MPO m RNA相对表达量与血液中吡喹酮的浓度之间相关系数r=0.96,为高度相关,并且推测MPO可能参与吡喹酮的氧化代谢。结论认为:(1)MPO m RNA相对表达量的升高与外源性药物吡喹酮的摄入有关。(2)血液中吡喹酮的残留量与MPO m RNA相对表达量线性相关。本研究旨在提供一种从分子水平评价水产动物体内药物残留的新思路。
- 刘腾飞马荣荣肖艳翼朱凤娇杨先乐胡鲲
- 关键词：髓过氧化物酶吡喹酮荧光定量PCR血药浓度代谢
- 哈氏弧菌(Vibrio harveyi)lexA基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2018年
- LexA是调节SOS反应的阻遏蛋白,而且与细菌耐药性的形成密切相关。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因lexA,并对lexA基因进行了生物信息学分析;构建了lexA基因的原核表达载体PGEX-lexA,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达成功,还对LexA蛋白表达的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,lexA基因的开放阅读框为621 bp,编码206个氨基酸,LexA蛋白理论分子量为22.68 kD;重组蛋白表达的最优条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。
- 常云胜周维高增鸿丁燏
- 关键词：哈氏弧菌LEXA基因克隆原核表达
