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裂谷热疫苗研究进展: 2015年; 在非洲和阿拉伯半岛裂谷热已经造成了严重的公共卫生安全和经济危害问题,该病对全球其他国家和地区的动物和人类健康也构成严重威胁。世界动物卫生组织将其列为A类法定报告动物疫病,该病毒还被WHO列为生物战剂之一。本文对裂谷热病毒的病原学、流行病学和疫苗等方面的最新研究进展进行综述。; 李月涛郑学星王翠玲王化磊杨松涛夏咸柱; 关键词：裂谷热疫苗

裂谷热病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2014年; 目的建立一种快速、敏感、特异的Real-time PCR(实时荧光定量PCR)方法,用于裂谷热病毒(RVFV)的检测。方法根据裂谷热病毒N蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-time PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-time PCR方法检测裂谷热病毒所绘制标准曲线的相关系数大于0.99,灵敏度为1.0×101拷贝,高于常规PCR方法(1.0×103拷贝);除裂谷热病毒外的其他7种对照烈性病病原体基因检测均呈阴性;批内重复和批间重复的变异系数均小于1%。结论建立的裂谷热病毒Real-time PCR检测方法敏感性和特异性较高,可用于裂谷热病毒感染快速诊断及流行病学调查。; 盖微微迟航迟航薛向红郑学星王化磊薛向红赵永坤高玉伟黄耕王化磊夏咸柱; 关键词：PCR TAQMAN探针

中东呼吸综合征冠状病毒半巢式PCR检测方法的建立被引量：6: 2015年; 目的建立特异、灵敏的半巢式PCR方法以期用于检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)。方法根据MERS-CoV N蛋白基因设计并合成特异性内侧、外侧引物。通过条件优化,建立MERS-CoV半巢式PCR检测体系,扩增产物测序后与目的序列进行同源比对。以10倍系列稀释重组质粒为标准品,与普通PCR反应进行比较,检测半巢式PCR方法的灵敏度。以其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因为对照,检测半巢式PCR方法的特异性。结果使用建立的半巢式PCR方法扩增的特异片段与GenBank中发表的MERS-CoV基因序列同源性为100%;半巢式PCR检测方法的灵敏度为1.17×101拷贝,比普通一轮PCR扩增的灵敏度(1.17×105拷贝)提高了104倍;用该方法检测MERS-CoV基因为阳性,其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性。结论建立的MERS-CoV半巢式PCR方法具有良好的准确性、灵敏性和特异性,为MERS-CoV感染的诊断提供了一种新的、可靠的检测手段。; 迟航郑学星盖微微王翀张渭蛟王化磊冯娜王铁成赵永坤黄耕高玉伟杨松涛夏咸柱; 关键词：半巢式PCR 特异

中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6: 2014年; 目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测。方法根据中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及一条特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-time PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-time PCR方法检测中东呼吸综合征冠状病毒所绘制标准曲线的相关系数>0.99,灵敏度为1.00×101拷贝,高于常规PCR方法(1.00×102拷贝);用该方法检测中东呼吸综合征冠状病毒基因为阳性,其他6种对照呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均<1%。结论建立的中东呼吸综合征冠状病毒Real-time PCR检测方法灵敏、特异、重复性好,可用于中东呼吸综合征冠状病毒感染的快速诊断和流行病学调查。; 迟航郑学星盖微微王翀王化磊冯娜王铁成赵永坤黄耕高玉伟杨松涛夏咸柱; 关键词：实时荧光定量PCR TAQMAN探针

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中国博士后科学基金(2013M541089)