吉林省科技厅科研基金(201015225)
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- siRNA抑制PTTG表达对人结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响
- 2013年
- 目的探讨siRNA抑制人垂体瘤转化基因PTTG表达对人结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法 LoVo细胞分为3组:正常细胞对照组、Lipo2000+pGenesil-2.1 HK组(HK阴性对照组)、Lipo2000+pGenesil-2.1-PTTG siRNA组。应用Western印迹法检测转染48 h后各组细胞PTTG蛋白表达,MTT法检测转染24、48和72 h后各组细胞增殖情况,流式细胞术检测转染48 h后各组LoVo细胞凋亡和细胞周期情况。结果 pGenesil-2.1-PTTG siRNA质粒转染LoVo细胞后PTTG蛋白表达明显低于正常和HK阴性对照组。MTT比色分析法显示,pGenesil-2.1-PTTGsiRNA质粒转染LoVo细胞后,在24、48和72 h细胞增殖能力均显著低于正常对照组和阴性对照HK组(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,转染pGenesil-2.1 PTTG siRNA质粒后LoVo细胞G0/G1期细胞百分率均高于正常和阴性HK对照组(均P<0.01),而S期细胞百分率均低于正常和阴性HK对照组(均P<0.01);Annexin V-PI双染结果显示,转染pGenesil-2.1 PTTG siRNA质粒后LoVo细胞凋亡百分率高于正常和阴性HK对照组(均P<0.01)。结论 pGenesil-2.1-PTTG siRNA质粒可明显抑制LoVo细胞PTTG蛋白表达,并进而抑制LoVo细胞增殖,促进其凋亡,使细胞阻滞于G0/G1期。
- 王茂楠夏昕徐松柏刘玉石
- 关键词：垂体肿瘤转化基因RNA干扰结肠癌
