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浙江省科技厅重点资助项目(2005C23014)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：朱函坪姚苹苹谢荣辉徐芳陆群英更多>>
相关机构：浙江省疾病预防控制中心浙江大学更多>>
发文基金：浙江省科技厅重点资助项目浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇汉坦病毒
  • 1篇N蛋白
  • 1篇IGM
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇浙江大学
  • 1篇浙江省疾病预...

作者

  • 1篇朱智勇
  • 1篇严杰
  • 1篇翁景清
  • 1篇陆群英
  • 1篇徐芳
  • 1篇谢荣辉
  • 1篇姚苹苹
  • 1篇朱函坪

传媒

  • 1篇中华流行病学...

年份

  • 1篇2007
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
汉坦病毒N蛋白的重组表达及其用于IgM直接捕捉ELISA的建立和应用被引量：1
2007年
目的克隆并表达汉坦病毒(HV)Z10株(HV-Z10)N蛋白(NP)编码基因,建立基于辣根过氧化酶(HRP)标记重组NP(rNP)的rNP-IgM直接捕捉ELISA,检测肾综合征出血热(HFRS)患者血清并评价其检测效果。方法PCR扩增HV-Z10株NP编码基因,基因工程方法构建NP编码基因原核表达系统pET28a-Z10N-E.coli BL21DE3。SDS-PAGE了解rNP表达情况,离子交换法和Ni- NTA亲和层析法提纯rNP。Western blot检测rNP的特异性免疫反应性。建立HRP标记rNP-IgM直接捕捉ELISA检测HFRS患者血清样品,并与常规HV-IgM间接捕捉ELISA进行比较。结果pET28a-Z10N-E.coli BL21DE3高效表达rNP。提纯rNP SDS-PAGE显示单一蛋白条带,HV-IgG能有效识别rNP并与之结合。94.73%(90/95)HFRS患者血清样品rNP-IgM直接捕捉ELISA检测结果阳性,HV-IgM间接捕捉ELISA阳性率为92.63%(88/95)。两种IgM捕捉ELISAs检测的HFRS患者血清样品A_(450)值分布及对多份不同稀释度血清检测的A_(450)均值变化均相似。结论成功构建了HV-Z10株NP编码基因高效原核表达系统。所建立的rNP-IgM直接捕捉ELISA可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法。
朱函坪姚苹苹徐芳翁景清谢荣辉陆群英朱智勇严杰
关键词：汉坦病毒N蛋白
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