国家自然科学基金(39730390)
- 作品数：46 被引量：408H指数：14
- 相关作者：李广生张文岚华坤徐辉徐茗更多>>
- 相关机构：吉林大学吉林大学中日联谊医院中国疾病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生建筑科学生物学农业科学更多>>
- Bcl-2在染氟大鼠肾小管上皮细胞氧化应激态中的表达被引量：7
- 2005年
- 目的观察不同染氟(NaF,F-)条件下大鼠肾小管上皮细胞氧化应激能力变化及Bcl-2在氧化应激时的表达。方法采用体外原代细胞培养方法,相差显微镜观察大鼠肾小管上皮细胞形态结构变化;测定大鼠肾小管上皮细胞在染氟(F-)0.050、0.250、0.750、1.250mmol/L和不同氟暴露时间条件下,肾小管上皮细胞的增殖活性和丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;利用半定量RT-PCR方法分析大鼠肾小管上皮细胞在氟暴露0.050～0.625mmol/L48hBcl-2的表达。结果相差显微镜下,染氟0.750、1.250mmol/L组部分肾小管上皮细胞缩为圆形和有细胞脱落现象。在24h,0.005mmol/L组(0.48±0.10)、0.025mmol/L组(0.46±0.12)、0.250mmol/L组(0.36±0.04)肾小管上皮细胞的增殖活性较对照组(0.29±0.09)有不同程度升高,但在72h,1.250mmol/L组(0.16±0.02)细胞的增殖活性明显降低。肾小管上皮细胞MDA水平在染氟48h内,0.25mmol/L组(626.15±124.02)、0.75mmol/L组(498.74±119.88)、1.250mmol/L组(441.99±53.57)与对照组(232.62±21.00)比较,升高显著;SOD酶活性在48h内,随着染氟量的增加而有升高,在0.750mmol/L组(1298.66±248.53)、1.250mmol/L组(1664.70±277.68),酶活性明显高于对照组(741.67±265.56);CAT酶活性,在0.
- 徐辉张静敏常明崔伦文李广生
- 关键词：氟化物氧化性应激BCL-2基因氟中毒
- 染氟大鼠骨中10种化学元素的变化被引量：1
- 2004年
- 目的探讨染氟大鼠骨中化学元素的变化。方法采用电子探针X射线显微分析的方法,观察不同钙营养条件下,染氟大鼠骨中化学元素的变化。结果骨氟:常食加氟组(2组)和低钙偏食加氟组(4组)均高于对照组(1组)和低钙偏食组(3组),差异有非常显著意义(P<0.01)。骨钙:按高低顺序为1、2、4、3组,1组与3组比较,差异有显著意义(P<0.05)。骨磷:3组最高与1组比较,差异有显著意义(P<0.05)。骨铜:4组高于1组,差异有显著意义(P<0.05)。骨铅:3组高于1组,差异有显著意义(P<0.05)。骨汞:4组最高与其他组比较,差异有显著意义(P<0.05)。骨砷、铁、锌、镁在各组间差异均无显著意义。结论染氟和低钙可导致大鼠骨损伤,骨中化学元素的改变参与了氟中毒的发病机制,说明氟骨症的形成是多因素作用的结果。
- 李兴华李红岩李广生
- 关键词：骨骼化学元素氟中毒全身性疾病
- 氟化物对培养的破骨细胞基质金属蛋白酶-9的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 观察氟对培养的大鼠破骨细胞基质金属蛋白酶 9(Matrixmetalloproteinase 9,MMP 9)的影响。方法 机械分离新生大鼠四肢长骨的破骨细胞 ,于分离后 2h加入不同浓度的氟化物 ,应用免疫组织化学技术和原位杂交技术检测氟化物干预下培养的破骨细胞MMP 9的蛋白质和mRNA的表达。结果 随着染氟剂量的增加 ,破骨细胞内MMP 9的蛋白质表达增高 ,以 2 0 ,4 0mg/LF 组最为显著 ,同时破骨细胞内MMP 9mRNA表达亦增加 ,1 0 ,2 0 ,4 0mg/LF 组与对照组比较差异有显著性。结论 氟通过提高MMP 9的蛋白质和mRNA表达 。
- 华坤张秀云李广生
- 关键词：氟化物金属蛋白酶-9原位杂交骨代谢OC
- 氟中毒大鼠成骨细胞激活与bFGF、c-fos/c-jun表达研究被引量：4
- 2010年
- 目的探讨氟中毒大鼠激活的成骨细胞系中bFGF、c-fos、c-jun的差异表达。方法应用饮水加入氟化钠进行大鼠染氟实验,采用原位杂交技术、Western blot技术、免疫组织化学方法,对氟中毒大鼠骨组织进行增殖刺激因子bFGF、c-fos、c-jun的差异表达的定量分析。结果实验表明无论是在高钙饲养还是在低钙饲养,过量摄入NaF可刺激慢性氟中毒大鼠椎骨各包被成骨细胞增殖,并诱导bFGF过表达,与对照组相比差异显著(P<0.001);c-fos、c-jun表达明显高于对照组,差异显著(P<0.001、P<0.05);相关分析显示bFGF过表达与c-fos、c-jun的蛋白质水平呈正相关。结论过量氟可以刺激大鼠成骨细胞系激活、增殖能力增强、bFGF、c-fos、c-jun表达增强,提示bFGF可能通过上调c-fos、c-jun的表达而参与成骨细胞的增殖和分化。
- 赵军张文岚张伟李广生
- 关键词：BFGF
- 实验性氟中毒骨组织中Ⅱ型胶原基因表达及结构的改变被引量：10
- 2003年
- 目的 观察过量氟对大鼠骨组织中Ⅱ型胶原基因表达的影响和对大鼠骨骼中胶原类型及胶原结构的作用。方法 制备Ⅱ型胶原cDNA探针 ,采用cDNA mRNA原位杂交技术 ,检测饮用过量氟水 (氟化钠 2 2 1mg/L)的大鼠骨组织中Ⅱ型胶原的改变。采用苦味酸天狼星红染色 偏振光法对骨组织中胶原类型及胶原纤维结构进行观察。结果 染氟后 ,股骨等骨组织出现成软骨细胞。cDNA mRNA原位杂交显示 ,软骨化的骨组织软骨陷窝的软骨胞质中可见Ⅱ型胶原基因表达。染氟0 5个月组肋软骨软骨细胞胶原mRNA水平最高 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 86和 0 0 13,染氟 1个月及 2个月后逐渐减弱 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 4 7、0 0 0 8和 0 0 39、0 0 0 7。苦味酸天狼星红染色 偏振光法观察骨组织中出现多色性Ⅱ型胶原纤维 ,胶原纤维断裂、排列紊乱、含量下降。结论 过量氟可致骨组织中胶原类型和胶原结构的改变 ,导致Ⅱ型胶原在软骨化骨组织中的表达及在肋软骨组织中的表达增强。
- 刘秉慈许增禄缪庆徐园园徐茗钱晓菁尤宝荣袁伯华康宁
- 关键词：实验性氟中毒骨组织基因表达原位杂交技术
- 氟对成骨细胞样细胞胞内钙和钙通道电流的影响被引量：19
- 2003年
- 目的 :观察氟 (Fluoride,F-)对培养的成骨细胞样细胞胞内钙和钙通道电流的影响。方法 :应用Fura 2负载的成骨细胞样细胞 ,通过紫外荧光分光光度仪测定细胞内游离钙的浓度 ,同时应用全细胞膜片钳技术记录成骨细胞样细胞钙通道的变化。结果 :氟可引起成骨细胞样细胞胞内钙增高 ,尤以 10 0ng/mlF-最为明显 ,与对照组比较差异显著 (P <0 .0 5 )。应用全细胞膜片钳技术发现 2 5ng/mlF-即可引起成骨细胞样细胞钙通道开放 ,随着染F-剂量的增加 ,Ca2 +通道电流的幅值增大 (P <0 .0 1) ,且F-对Ca2 +通道电流的兴奋作用呈剂量依赖性 (r =0 .9914)。结论 :F-可引起成骨细胞样细胞钙通道开放 ,从而导致细胞胞内钙浓度的增加。
- 华坤赵红黄民李广生
- 关键词：成骨细胞膜片钳氟骨症
- 过量摄氟后大鼠肾细胞内钙水平与氧化应激损伤研究被引量：9
- 2004年
- 目的研究过量氟对大鼠肾细胞中游离钙( [Ca2+] i )水平的影响与氧化应激的关系。方法应用饮水加入氟化钠进行大鼠染毒实验,采用Fura鄄2/AM荧光指示剂测定慢性氟中毒大鼠肾细胞内[Ca2+] i浓度的变化,同时测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH鄄Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)生成。结果过量氟可刺激肾细胞内[Ca2+] i浓度增高,高钙加氟组与高钙对照组相比差异有显著意义(P< 0.05),低钙加氟组高于低钙对照组(P< 0.001);SOD活力水平低钙加氟组低于低钙对照组,差异有显著意义(P< 0.05),MDA生成低钙加氟组高于低钙对照组(P< 0.05);GSH鄄Px活力变化不明显。结论(1)过量氟所致的大鼠细胞内[Ca2+] i超载和不同程度的氧化侵袭,可能在氟骨症病理过程中起重要作用;(2)投氟伴随低钙可加重细胞内[Ca2+] i超载和氧化侵袭,提示钙营养与氟中毒发病有着重要联系。
- 张文岚赵虹薛立娟张秀云李广生
- 关键词：动物实验肾细胞氧化应激损伤氟中毒
- 经济状况对儿童饮水型氟中毒及膳食营养素摄入水平影响被引量：11
- 2011年
- 目的研究经济状况对儿童饮水型氟中毒的流行病学特征及多种膳食营养素摄取水平的影响。方法选择总摄氟量和饮水氟含量相同、经济状况较富裕的天津市郊区某村和经济状况较贫困的内蒙古某旗某村共计194名8～12岁儿童为研究对象,采用3日膳食调查法分析人群膳食摄入情况,氟离子选择电极法测定尿氟含量、按Dean氏分类法检查受检者氟班牙病损程度,并利用SPSS统计软件进行数据分析。结果天津市郊区某村儿童摄入钾、钙、锌、磷、硒等8种矿物质营养素,蛋白质、脂肪能量营养素,维生素C等5种维生素的量高于内蒙古某旗某村,差异有统计学意义(P<0.05),天津市郊区某村儿童和内蒙古某旗某村晨尿尿氟浓度均值分别为5.20±2.75 mg/L和6.79±3.92 mg/L,差异有统计学意义(P<0.05),天津市郊区某村儿童氟中毒的患病主要以1～2度氟斑牙为主,内蒙古某旗某村氟中毒患病主要以3度氟斑牙为主,差异有统计学意义(P<0.05)。结论天津市郊区某村儿童膳食营养摄入状况好于内蒙古某旗某村儿童,天津市郊区某村儿童氟中毒的患病程度明显轻于内蒙古某旗某村儿童,增加多种膳食营养素的摄入量有利于提高儿童对氟的耐受。
- 冯利红赵岩曾强侯常春张磊
- 氟化物对成骨细胞OPGL mRNA和M-CSF mRNA表达的影响被引量：17
- 2003年
- 目的 探讨氟对成骨细胞的骨保护蛋白配体 (OPGL)mRNA和巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)mR NA表达的影响。方法 应用酶消化法分离小鼠乳鼠成骨细胞 ,取第 3代成骨细胞 ,加入不同浓度的氟 6h ,提取细胞总RNA ,通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,观察成骨细胞分泌的OPGL和M CSF表达的变化。结果 在氟的作用下 ,成骨细胞的OPGLmRNA和M CSFmRNA的表达呈上升趋势 ,但未达到统计学差异水平。结论 氟有可能通过上调OPGL和M CSF的表达 。
- 华坤计国义李广生
- 关键词：MRNA表达成骨细胞OPGLM-CSF氟化物骨吸收活性
- 慢性氟中毒大鼠肾组织细胞凋亡的实验研究被引量：18
- 2002年
- 目的 观察细胞凋亡在氟中毒肾脏损害发生机制中的作用。方法 经饮水投氟复制氟中毒模型。采用原位末端标记法 (TU NEL)测定了慢性氟中毒大鼠肾脏组织细胞凋亡的情况 ,应用全自动生化分析仪检测大鼠尿液乳酸脱氢酶 (L DH)、碱性磷酸酶 (AL P)、γ-谷胺酰转移酶 (γ- GT)、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 (NAG)的活性。结果 TUNEL 检测显示 ,在慢性氟中毒大鼠肾脏中 ,可见到明显的 NBT/ BCIP着染阳性的凋亡细胞 ,而且这种表达具有选择性 ,多出现在肾皮髓质交界处。氟中毒大鼠尿液 L DH、AL P、γ- GT、NAG的活性变化不明显。投氟组与对照组比较无明显差异。结论 在慢性氟中毒大鼠肾脏细胞凋亡明显 ,凋亡发生部位与病理改变明显的部位吻合 。
- 徐辉孙波赵志涛张桂珍李广生
- 关键词：氟中毒肾脏细胞凋亡
