国家自然科学基金(81273895) 作品数:13 被引量:99 H指数:7 相关作者: 袁丁 王婷 张长城 周志勇 刘朝奇 更多>> 相关机构: 三峡大学 三峡大学仁和医院 三峡大学第二临床医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
竹节参总皂苷预防非甾体抗炎药引起肠黏膜损伤 被引量:4 2016年 目的探讨竹节参总皂苷对非甾体抗炎药(NSAID)导致肠黏膜损伤的预防保护作用。方法 5 mg/kg双氯芬酸钠连续2 d灌胃处理,建立NSAID肠黏膜损伤模型。在模型建立的前4 d,竹节参总皂苷组小鼠给予竹节参皂苷灌胃,连续灌胃6 d。异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-DT)及Evans蓝染色法检测小肠黏膜通透性,HE染色观察小肠黏膜病变,免疫荧光组织化学染色检测肠黏膜上皮细胞的内质网应激反应蛋白葡萄糖转运蛋白78(GRP78)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果Evans蓝染色及FITC-DT测定法检测发现模型组小肠黏膜损伤严重,小肠黏膜蓝色斑点密集,通透性显著升高;HE染色观察到模型组小鼠小肠黏膜绒毛上皮细胞发生变性、坏死,同时观察到黏膜下炎细胞浸润,说明成功建立了肠黏膜损伤模型。不同剂量的竹节参总皂苷处理后能减轻肠黏膜损伤,免疫荧光染色发现小肠上皮细胞GRP78和TNF-α的表达明显减少。结论竹节参总皂苷可通过内质网应激途径减轻NSAID所致的小肠黏膜损伤。 梅颖 肖朝朝 冯进武 王婷 张长城 袁丁 刘朝奇关键词:竹节参总皂苷 内质网应激 植物多糖对巨噬细胞免疫调控影响的研究进展 被引量:5 2015年 植物多糖( polysaccharide )有众多药理作用,主要包括加强或者活化巨噬细胞免疫应答,进而发挥免疫调控、抗肿瘤、创面愈合和其他治疗作用,主要的作用机制是其固有的免疫调节尤其是对巨噬细胞的作用。植物和微生物多糖与大多数的表面受体相关,诱导巨噬细胞发挥与其相似的免疫应答,这表明多糖的结构特点在有机体中是共有的。因此,植物多糖的研究为发现新的治疗药物提供了方向,也为找到具有强大免疫调控作用的佐剂提供了机会。本文对分离自高等植物的多糖对巨噬细胞免疫调控影响的最新研究状况作一综述。 崔倩倩 刘朝奇 袁丁关键词:免疫调控作用 植物多糖 巨噬细胞 细胞免疫应答 创面愈合 三七总皂苷对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞的保护作用及机制研究 被引量:1 2022年 目的观察三七总皂苷(Total saponins of Panax notoginseng,TPNS)对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法实验分为正常组,H_(2)O_(2)组(1000μmol/L H_(2)O_(2))和药物干预组(1000μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+0.1μg·mL^(-1)TPNS,1000μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+1μg·mL^(-1)TPNS,1000μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+10μg·mL^(-1)TPNS)。SH-SY5Y细胞孵育24 h后,除正常组和H_(2)O_(2)组外,其余各组加入相应的药物浓度处理12h,除正常组外,其余各组再加入相同浓度的H_(2)O_(2)处理12h。运用MTT检测细胞活力,DCFA-DA探针检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen species,ROS)水平,JC-1检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),Western blot检测Sirt1、Foxo3a、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果TPNS干预组能显著提高细胞活力,降低细胞内ROS含量,改善MMP,升高Sirt1和Foxo3a蛋白表达和提高Bcl-2/Bax比值。结论TPNS可通过Sirt1/Foxo3a和Bcl-2/Bax信号通路对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞损伤发挥保护作用。 万静枝 袁丁 廖勇关键词:SH-SY5Y细胞 氧化应激 三七总皂苷对衰老大鼠肝脏内质网应激介导炎症反应的影响 被引量:9 2017年 目的:研究三七总皂苷(PNS)对自然衰老模型大鼠肝脏内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78),磷酸化真核翻译起始因子2α(p-e IF2α),磷酸化PKR样内质网调节激酶(p-PERK)以及炎症相关因子磷酸化核转录因子-κB(p-NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)调节作用,探索PNS对衰老大鼠肝脏内质网应激介导炎症反应的保护机制。方法:将50只SPF级SD大鼠随机10只1组,分为5组。分别为青年组(9月龄),自然衰老组(24月龄),PNS低、中、高剂量组。从18月龄起,PNS组大鼠按低、中、高剂量分别灌胃给予10,30,60 mg·kg^(-1)的PNS,每周灌胃6日,停灌1日,直至24月龄。末次给药后禁食不禁水12 h,将老鼠处死,迅速取出肝脏,过液氮后置于-80℃冰箱保存。苏木素-伊红(HE)染色法观察不同组肝组织形态变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织中内质网应激相关因子GRP78,p-e IF2α,p-PERK及炎症相关因子p-NF-κB,TNF-α,IL-1β的蛋白变化。结果:自然衰老大鼠肝脏与青年组相比内质网应激相关因子GRP78,p-e IF2α,p-PERK及炎症相关因子p-NF-κB,TNF-α,IL-1β蛋白含量有所上升(P<0.01),低剂量PNS灌胃大鼠肝脏变化不明显,中、高剂量PNS显著降低衰老大鼠肝脏内质网应激相关因子及炎症相关因子的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:PNS有保护自然衰老大鼠肝脏内质网应激导致炎症的作用。 张登青 袁琴 袁成福 何毓敏 刘朝奇 王婷 张长城 袁丁关键词:三七总皂苷 衰老 内质网应激 炎症 淫羊藿总黄酮对D-半乳糖致H9c2细胞衰老的保护作用研究 被引量:10 2014年 目的:研究淫羊藿总黄酮(Total Flavonoids of Epimedium,TFE)对D-半乳糖诱导H9c2细胞衰老模型的影响及其机制。方法:采用不同浓度TFE干预D-半乳糖作用的H9c2细胞,以细胞形态学和β-半乳糖苷酶染色检验细胞衰老情况,并检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、细胞内活性氧(ROS)水平以及细胞凋亡情况。结果:各浓度TFE均能显著降低D-半乳糖所致的β-半乳糖苷酶染色阳性的细胞数目、MDA含量及ROS荧光强度,并能升高SOD活性,改善细胞核染色质浓缩及减少凋亡小体。结论:TFE可通过抗氧化和减少细胞早期凋亡来对抗D-半乳糖所致H9c2细胞衰老。 李靳 张长城 杨莉 王婷 周志勇 袁丁 顿耀艳关键词:淫羊藿总黄酮 D-半乳糖 H9C2细胞 衰老 Sirtuins对心血管疾病保护作用的研究进展 被引量:1 2016年 Sirtuins(Sirtl-Sirt7)是一组具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性的酶。它们的主要作用是去乙酰化,有些Sirtuins还具有去乙酰化酶、二磷酸腺苷-核糖转移酶、葡萄糖淀粉酶和脱琥珀酰胺酶的活性。研究表明,能量限制和运动可激活某些Sirtuins家族成员,从而调节重要的细胞器比如线粒体、内质网甚至细胞核中重要的加工处理过程,以维持代谢平衡,减轻细胞损伤,抑制炎症,从而预防多种衰老相关疾病和心血管异常。 王佼 袁丁 周志勇 张长城 王婷关键词:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 去乙酰化酶 二磷酸腺苷 心血管异常 家族成员 从内质网应激途径探讨淫羊藿总黄酮对衰老大鼠心肌细胞的保护作用 被引量:2 2016年 目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对自然衰老大鼠心肌细胞的影响及其机制。方法将SD雄性大鼠随机分为青年对照组(9月龄组),自然衰老组(24月龄组),TFE低、中、高剂量组,每组10只。TFE低、中、高剂量组大鼠从18月龄开始分别给予TFE 10,20,60 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃给药,青年对照组和自然衰老组大鼠灌胃1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。每周停药1天,持续6个月。HE染色观察心脏的组织形态,电镜观察心肌细胞中线粒体的超微结构,Western blot检测心脏组织中p21、GRP78、CHOP、Bax、P-JNK蛋白表达情况。结果 HE染色和电镜结果显示,与自然衰老组比较,TFE低、中、高剂量组心脏组织的形态结构和超微结构均有所改善。TFE还可抑制p21和GRP78蛋白的表达,降低CHOP、Bax和P-JNK蛋白的表达。结论 TFE对自然衰老大鼠心肌细胞具有保护作用。其机制可能是通过抑制内质网应激的发生,减少心肌细胞的凋亡,从而发挥对心脏的保护作用。 王佼 袁丁 宋亚男 周志勇 王婷关键词:淫羊藿总黄酮 内质网应激 心肌细胞 竹节参皂苷不同浓度乙醇洗脱物对肝细胞损伤的保护作用 被引量:4 2016年 目的研究不同浓度竹节参总皂苷对游离脂肪酸诱导的肝细胞(Hep G2)损伤的保护作用。方法制备竹节参总皂苷不同浓度乙醇洗脱(10%、30%、60%及90%)的有效部位,应用棕榈酸(PA)诱导肝癌细胞Hep G2脂肪变性的细胞模型(模型组),正常组应用DMSO。提取细胞总RNA检测内质网应激标志基因葡萄糖调节蛋白(GRP-78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,通过噻唑蓝(MTT)方法反映细胞存活状况,以及油红O染色,观察细胞脂肪变性情况。结果 MTT结果显示模型组与正常组比较,Hep G2细胞存活率明显降低,竹节参提取物中,90%乙醇洗脱组的细胞存活率较模型组明显升高,差异有统计学意义;油红O染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少,细胞肿胀减轻,细胞数目增多,而其他萃取部位效果不明显;RT-PCR显示,模型组内质网应激相关基因表达量明显高于正常组,而竹节参90%乙醇萃取部位则较模型组有明显降低,与正常组比较差异无统计学意义。90%乙醇洗脱组经高效液相色谱法(HPLC)测定,其主要成分为齐墩果烷型皂苷。结论竹节参齐墩果烷型皂苷能明显降低PA诱导的Hep G2细胞脂肪变性,其机制与干预内质网应激相关。 覃玉娥 孙志伟 张长城 王婷 袁丁 刘朝奇关键词:棕榈酸 肝细胞脂肪变性 内质网应激 竹节参齐墩果烷皂苷对RAW264-7巨噬细胞SIRT1活性影响及抗炎作用研究 被引量:16 2016年 目的探讨竹节参齐墩果烷皂苷(chikusetsu oleanane saponin,COS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞的SIRT1活性影响及抗炎作用。方法Griess法测定一氧化氮(NO)释放量;免疫印迹(Western blot)法检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)蛋白表达;免疫荧光分析COS对细胞核因子-κB(NF-κB)和沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)核转运的作用。结果 COS在25~300 mg·L^(-1)与1 mg·L^(-1)LPS共培养时,对RAW264.7细胞生长无明显影响;与LPS组相比,COS能有效抑制NO释放和抑制TNF-α、IL-1β的分泌;还能抑制NF-κB的核移位,上调SIRT1的表达。结论 COS对LPS刺激的RAW264.7细胞炎症具有保护作用,其保护机制可能是COS上调SIRT1表达,促进NF-κB去乙酰化作用,从而抑制NF-κB的核移位,减少TNF-α、IL-1β等炎症因子的产生。 袁琴 袁丁 周志勇 刘朝奇 王婷 向婷婷 张长城关键词:IL-1Β SIRT1 三七总皂苷对D-半乳糖致H9c2细胞衰老的保护作用研究 被引量:11 2014年 目的:探讨三七总皂苷(Panax notoginseng Total Saponins)对D-半乳糖致心肌细胞株H9c2细胞衰老的保护作用及其可能机制。方法:50 mmol/L D-半乳糖处理H9c2细胞建立衰老模型。不同浓度三七总皂苷(5、25、50μg/mL)预处理细胞4 h,再加入D-半乳糖继续培养24 h。β-半乳糖苷酶染色法鉴定细胞衰老程度,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen species,ROS)水平,生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Hochest染色分析细胞凋亡情况。结果:与正常对照组比较,D-半乳糖组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数目显著增多,ROS荧光强度显著上升,SOD活性降低,MDA含量增加,Hochest染色发现细胞核染色质浓缩和凝聚,并可见大量凋亡小体;与D-半乳糖组比较,不同浓度三七总皂苷组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数目显著减少,SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,ROS荧光强度显著降低,细胞核染色质浓缩和凝聚以及凋亡小体均有所改善。结论:三七总皂苷可通过提高抗氧化能力和减少细胞凋亡来对抗D-半乳糖所致的H9c2细胞衰老。 李靳 杨莉 万静枝 张长城 王婷 刘朝奇 袁丁关键词:三七总皂苷 D-半乳糖 H9C2细胞 衰老