山东省自然科学基金(Y2007D01)
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 相关作者：白波陈京李雅林刘有旺路海更多>>
- 相关机构：泰山医学院济宁医学院山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阿片及其受体对免疫系统影响的研究进展被引量：3
- 2009年
- 阿片既有强大的镇痛作用,又能产生明显的欣快感觉及成瘾作用。长期使用阿片样物质或阿片依赖成瘾患者免疫功能普遍低下,人类免疫缺陷病毒的感染率、肿瘤的发生和转移率均有所增加。在免疫细胞中也存在相应的阿片受体,同时免疫细胞也能分泌某些阿片肽。现就阿片及其受体对免疫系统的影响予以综述。
- 路海白波宋文刚
- 关键词：阿片阿片受体免疫系统
- G蛋白偶联受体寡聚化检测技术——共振能量转移技术和蛋白质片段互补技术被引量：1
- 2012年
- 蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interactions,PPIs)在细胞内信号途径的分子机制中具有重要作用,文章叙述了活细胞中以非侵入性荧光和生物发光为基础检测特异性PPIs的方法如FRET、BRET、BiFC和BiLC,上述技术广泛应用于G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)寡聚化的研究,单独或联合应用这些新技术是研究两个蛋白或多个蛋白PPIs的最佳方法,文章描述了上述生物技术的最新进展及其优缺点,着重阐述在PPIs方面的应用。
- 程葆华白波亚白柳陈京
- 关键词：G蛋白偶联受体
- pRluc-hKOR-pcDNA3.1真核重组质粒的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:构建与海肾荧光素酶(renilla luciferase,Rluc)融合的人κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)的真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人KOR与其它受体间的相互作用。方法:以质粒pcD-NA3.1-hKOR为模板,PCR方法扩增人KOR。扩增的人KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这2种酶双酶切质粒pRluc-pcDNA3.1。然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察。结果:扩增出了1条约1.2kb的片段,与预期的人KOR大小相符,质粒酶切结果显示重组质粒pRluc-hKOR-pcDNA3.1被切成2条片段,其中1条为pRluc-pcDNA3.1载体大小,另1条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上。结论:构建成功了pRluc-hKOR-pcDNA3.1重组真核表达载体,此表达载体可用于检测人KOR与其它受体之间的相互作用。
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青路海
- 关键词：HEK293细胞
- 生物发光共振能量转移技术及其应用被引量：10
- 2009年
- 生物发光共振能量转移(BRET)技术是近10年来出现的一种新的检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术.它的最大优势是能在活细胞中实时进行检测,因此能够进行相互作用动力学的研究.本文系统阐述了BRET的原理和方法,综述了BRET技术的最新进展,以及该技术在G蛋白偶联受体(GPCRs)信号转导及药物发现中的应用.
- 李雅林白波陈京
- 关键词：蛋白质-蛋白质相互作用G蛋白偶联受体药物发现
- pRluc-KOR真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2009年
- 目的:构建与海肾萤光素酶(Rluc)融合的κ型阿片受体(KOR)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法(BRET)检测apelin受体和KOR之间的相互作用.方法:以质粒pcDNA3.1-KOR为模板,PCR方法扩增KOR.扩增的KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pRluc.将这两种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10.挑取菌落培养,提取质粒,行酶切鉴定及测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察.结果:扩增出了1条1143 bp的片段,与预期的KOR大小相符,质粒酶切结果显示pRluc-KOR被切成2条片段,其中一条为pRluc载体大小,另一条为目的片段大小.经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源.共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上.结论:构建成功了pRluc-KOR重组表达载体,此表达载体可用于检测KOR与apelin受体或与其他受体之间的相互作用.
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青于鹏丽
- 关键词：真核表达载体
- Apelin/APJ系统研究进展被引量：5
- 2009年
- Apelin肽家族是由单个基因编码并能够激活7次跨膜G蛋白偶联受体APJ的一组内源性活性肽.Apelin/APJ系统在心血管调节中具有降低血压、强的心脏收缩作用;在中枢神经系统中具有调节垂体激素释放、调节摄食、摄水、体液平衡等作用;作为脂肪细胞分泌的一个新的脂肪因子(adipo-kine),可调节胰岛素的分泌;而且,最新的研究表明,apelin能够促进血管的生成.Apelin/APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点.这篇综述的目的是总结apelin/APJ系统的特点及功能,为进一步研究该系统提供理论依据和线索,为开发新的治疗性的药物提供有吸引力的靶点.
- 李雅林白波陈京刘有旺
- 关键词：APELIN脂肪因子血管生成心血管系统中枢神经系统
- apelin在血管生成中的作用
- 2010年
- 于鹏丽白波陈京
- 关键词：APELIN血管生成神经系统疾病生物学效应心血管功能水盐平衡
