国家教育部博士点基金(20060466004)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 紫花苜蓿光敏色素B基因片段克隆及RNA干扰表达载体的构建被引量：7
- 2011年
- 根据紫花苜蓿2级标准品种VernalPhyB基因的序列(GenBank登录号为GQ379903.1),设计2对含有酶切位点的特异性引物F1/R1和F2/R2,以紫花苜蓿总RNA为模板,通过RT-PCR法扩增得到PhyB基因正向、反向目的片段,将片段连接到pGEM-TEasy载体上得到重组载体pGEMB-1和pGEMB-2,再以中间载体pHANNIBAL和植物双元表达载体pART27为基础,通过多次酶切和连接,成功地构建了紫花苜蓿PhyB的RNAi表达载体。为进一步研究光敏色素B与苜蓿秋眠性之间的关系奠定了基础。
- 朱见明严学兵史莹华王成章
- 关键词：紫花苜蓿秋眠性光受体光敏色素RNA干扰
- 紫花苜蓿光敏色素A基因片段的克隆及其RNA干扰载体的构建被引量：4
- 2010年
- 苜蓿(Medicagosativa L.)的秋眠性是一种光周期效应。研究植物体内重要的光受体-光敏色素A(phyto-chromeA,phyA),可能揭示其调控苜蓿秋眠性的机理。为研究其与苜蓿秋眠性的关系,本研究根据RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术原理,以紫花苜蓿幼嫩叶片为材料,提取总RNA,选取基因cDNA序列同源性较低区域设计特异性引物,并引入相应的酶切位点,利用RT-PCR克隆phyA正、反向片段,经过3次亚克隆,构建了phyA的RNAi表达载体,制备了适合转染植物组织的农杆菌菌液,为获得缺失phyA植株创超了条件。
- 张亚军严学兵朱见明王成章史莹华
- 关键词：紫花苜蓿PHYARNAI
