湖南省教育厅优秀青年基金(06B070)
- 作品数：8 被引量：83H指数：6
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- TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖与凋亡相关基因表达的关系被引量：7
- 2008年
- 背景与目的:探讨TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮癌前病变发生与细胞周期分布,凋亡相关基因bax、bcl-2和增殖相关基因PCNA的表达水平及它们与p53mt基因表达的相关关系。材料与方法:HE染色法观察G4代12月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因阳性和阴性小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮病理组织学变化,流式细胞术测定细胞周期分布特点,免疫组织化学法检测组织中p53mt、bax、bcl-2和PCNA表达水平,综合分析其相关性。结果:转基因阴性小鼠和阳性小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变发生率分别为0和63.64%(P<0.01)。与转基因阴性小鼠比较,转基因阳性小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织G0/G1期细胞数量减少,S期、G2/M期细胞数量增多,细胞增殖指数增高(P均<0.01),p53mt、bcl-2和PCNA表达水平显著增高(P<0.01),bax表达水平显著降低,bcl-2/bax比值升高(P<0.01)。结论:TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因阳性小鼠p53mt的表达可引起bax表达抑制,bcl-2表达水平增高,bcl-2/bax比值升高,PCNA表达增强,由此导致细胞凋亡活性降低,细胞增殖活性升高,细胞转化机率增加,可能与鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变有密切关系。
- 何迎春卢芳国田道法刘红萍
- 关键词：转基因小鼠细胞增殖核抗原
- 益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及细胞周期的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及细胞周期的影响。方法第4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT阳性小鼠和阴性小鼠分别随机分为益气解毒方组和生理盐水组,即转基因阳性生理盐水组(TC)、转基因阳性益气解毒方组(TM)、转基因阴性生理盐水组(NC)和转基因阴性益气解毒方组(NM),共4组,取鼻腔和鼻咽黏膜组织,H-E染色法观察病理组织学变化,流式细胞术测定细胞周期分布特点。结果TC组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞非典型性增生明显,TC、TM、NM和NC组小鼠鼻腔和或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为90.9%、10%、0和0,组间比较差异具有统计学意义(P<0.01)。与NC组小鼠比较,TC组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮G0/G1期细胞量减少,S期、G2/M期细胞数量增多,细胞增殖指数(PI)增高,差异有统计学意义(P<0.01);与TC组比较,TM组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织G0/G1期细胞量增多,S期、G2/M期细胞数量减少,细胞PI降低,差异有统计学意义(P<0.01),趋于正常水平,而与NC组的差异均无统计学意义。结论益气解毒方中药可有效逆转或阻止TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞的非典型性增生,其作用机制之一是阻止细胞进入S期而抑制细胞增殖。
- 何迎春田道法刘刚卢芳国范婧莹吴新正罗齐平
- 关键词：益气解毒方转基因小鼠细胞增殖细胞周期
- 益气解毒方对转基因小鼠上皮细胞及基因影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠的鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞增殖及肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)和p16基因表达的影响。方法苏木素-伊红(H-E)染色法观察小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞增殖特征;免疫组织化学染色法检测小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞TRAF2、p16基因的表达水平,并采用蛋白印迹(Westernblot)对基因表达进行验证。结果与TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠诱癌生理盐水对照组(TIC组)比较,TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠诱癌益气解毒方干预组(TIM组鼻腔和鼻咽粘膜上皮增生不明显,癌前病变率显著下降(P<0.01);其TRAF2基因表达水平(TIC组、TIM组鼻腔的分别为129.45±9.53和160.96±11.04,鼻咽的分别为126.38±12.69和160.88±6.84)显著降低(P<0.01);p16基因表达水平(TIC组、TIM组鼻腔的分别为157.21±10.44和131.72±10.06,鼻咽的分别为155.41±11.77和132.63±10.22)显著增高(P<0.01)。TIM组的TRAF2和p16基因表达水平接近野生型C57BL/6J小鼠对照组(鼻腔和鼻咽的TRAF2基因表达水平分别为165.07±10.58和164.39±7.88,p16基因表达水平分别为129.62±12.16和129.12±11.67),差异无统计学意义。结论中药益气解毒方可阻逆二亚硝基哌嗪(DNP)对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞异常增殖的诱导效应,其阻逆作用的发挥与下调TRAF2基因表达和上调p16基因表达密切相关。
- 何迎春田道法卢芳国江洁琼贺安意
- 关键词：癌前病变益气解毒方P16
- 益气解毒方对DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔/鼻咽上皮癌前病变及p16和c-jun基因表达的影响被引量：10
- 2008年
- 背景与目的:有研究表明,益气解毒方中药可通过抑制细胞端粒酶的激活而阻断二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠鼻咽癌变和人胚鼻咽上皮细胞转化。本研究探讨益气解毒方对经DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠的鼻腔和鼻咽黏膜上皮增殖及c-jun和p16基因表达的影响,为益气解毒方的疗效和可能作用机制提供新的证据。方法:G4代5月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠20只,随机分为2组:①TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌中药组[中药组,10只,以12.91g/(kg?d)剂量灌胃益气解毒方药液];②TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌0.9%氯化钠溶液对照组(氯化钠溶液对照组,10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。另设阴性对照组(用野生型C57BL/6J小鼠10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。用HE染色法观察各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征,比较癌前病变率;免疫组织化学染色法检测各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织c-jun和p16基因的表达水平,并采用Western印迹法验证。结果:阴性对照组、氯化钠溶液对照组和中药组鼻腔和(或)鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、90%和10%,差异有显著性(P<0.01)。与氯化钠溶液对照组比较,中药组小鼠鼻腔和鼻咽的p16基因表达水平显著上调(鼻腔:157±10vs132±10,鼻咽:155±12vs133±10,P值均<0.01),c-jun基因的表达水平显著下调(鼻腔:111±9vs161±10;鼻咽:110±10vs159±10,P值均<0.01),趋于正常水平,与阴性对照组(鼻腔和鼻咽的p16表达灰度值分别为130±12和129±12,c-Jun分别为164±13和164±9)的差异无显著性(P值均>0.05)。结论:中药益气解毒方可阻逆DNP对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织癌前病变发生和发展的诱导作用,其干预作用与下调c-jun表达和上调p16基因表达密切相关。
- 何迎春卢芳国田道法刘刚
- 关键词：鼻咽上皮癌前病变益气解毒方C-JUNP16
- 红景天复方制剂对小鼠抗运动性疲劳的作用及机制研究被引量：13
- 2008年
- 目的探讨红景天复方制剂抗运动性疲劳的作用及其机理。方法40只6周龄清洁级昆明种小鼠随机分为生理盐水组(NS)、西洋参阳性对照组(PG)、红景天复方制剂低剂量组(LR)和高剂量组(HR)4组,每组10只。用药及进行适应性运动训练4w,对其进行力竭性游泳运动后,即刻检测小鼠血液、心肌及股四头肌组织中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC),Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果140只实验鼠均进入结果分析。2LR,HR组及PG组小鼠负重持续游泳时间明显长于NS组,差异有统计学意义(P<0.01)。3LR,HR及PG组小鼠心肌MDA含量均明显低于NS组,差异有统计学意义(P<0.05);LR,HR及PG组小鼠股四头肌MDA含量均低于NS组,但与NS组的差异无统计学意义(P>0.05)。4LR,HR及PG组小鼠心肌、股四头肌Ca2+-Mg2+-ATP酶活性比NS组高,其中HR组与NS组的差异具有统计学意义(P<0.05)。5HR组小鼠血清SOD活性明显低于NS组,差异具有统计学意义(P<0.05);LR,HR及PG组小鼠心肌SOD活性均低于NS组,差异均具有统计学意义(P<0.05);LR,HR组小鼠股四头肌SOD活性均明显高于NS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。6LR,HR及PG组小鼠心肌、股四头肌T-AOC活性高于NS组,PG组小鼠与NS组的差异具有统计学意义(P<0.05),LR,HR组小鼠与NS组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天复方制剂可能通过降低力竭性游泳运动小鼠血液、心肌、股四头肌组织SOD活性,提高心肌、股四头肌组织Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,增强心肌、股四头肌组织清除过度运动产生的氧自由基,提高这些组织抗氧化能力,降低MDA含量,从而延缓机体疲劳发生或加快机体疲劳的恢复,比如延长小鼠负重游泳持续时间,这可能是该复方制剂抗运动性疲劳的机理之一。
- 吴新正何迎春刘红萍田道法吴新东
- 关键词：丙二醛超氧化物歧化酶CA^2+-MG^2+-ATP酶总抗氧化能力
- 益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响被引量：13
- 2008年
- 背景:益气解毒中药复方在体外能通过下调端粒酶的活性抑制细胞生长和诱导细胞凋亡,还可能通过抑制细胞内重要的核转录因子、细胞分裂增殖、细胞周期、DNA修复和诱导细胞凋亡、促进坏死等信号通路,从而抑制细胞增殖和诱导细胞死亡。目的:实验拟观察益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及凋亡相关基因bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt基因表达的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-01/2007-12在湖南中医药大学中西医结合学院基础研究室和中医五官重点学科实验室完成。材料:G4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,体质量(25.4±2.3)kg,用于制备鼻咽和鼻腔癌前病变模型;益气解毒颗粒方药液为自制。方法:48只小鼠随机分为4组,转基因阳性中药组和转基因阴性中药组小鼠灌胃益气解毒颗粒方药液,给药剂量为12.91g/(kg·d);转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组小鼠灌等体积生理盐水。主要观察指标:苏木精-伊红染色观察鼻腔和鼻咽黏膜病理组织学变化,免疫组织化学染色法检测其bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt基因表达水平。结果:纳入转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组于实验结束前各死亡1只,转基因阴性中药组死亡1只,转基因阳性中药组死亡2只小鼠,共43只小鼠进入结果分析。①转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组小鼠的鼻腔/鼻咽黏膜组织均无明显病变;转基因阳性中药组有1只小鼠表现中度非典型性增生,转基因阳性生理盐水组有10只小鼠鼻腔和/或鼻咽黏膜上皮细胞呈现中度或中度以上非典型增生或灶性鳞状化生。转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组、转基因阳性中药组和转基因阳性生理盐水组小鼠鼻腔或鼻�
- 江洁琼贺安意田道法何迎春卢芳国
- 关键词：益气解毒方
- 红景天复方对小鼠免疫、耐缺氧和抗疲劳能力的影响被引量：49
- 2008年
- 目的探讨红景天复方对小鼠免疫、耐缺氧和抗疲劳能力的作用。方法6周龄清洁级昆明种小鼠随机分为生理盐水组、西洋参阳性对照组、红景天复方高、低剂量组4组,用药及进行适应性运动训练4周,通过小鼠爬竿试验、游泳试验、耐缺氧试验、碳末廓清试验(吞噬指数)、免疫器官质量法(胸腺指数和脾脏指数)观察红景天复方抗疲劳和增强免疫功能的作用。结果与生理盐水组比较,红景天夏方高、低剂量组能明显延长小鼠负重游泳持续时间(P<0.01),低剂量组能延长爬竿时间和增强巨噬细胞吞噬功能(P<0.05),明显增加小鼠肠腺指数及脾脏指数(P<0.01);高剂量组能增加脾脏指数(P<0.05)。结论红景天复方具有增强小鼠抗疲劳能力和免疫功能作用。
- 吴新正何迎春刘红萍田道法吴新东
- 关键词：红景天复方胸腺指数脾脏指数抗疲劳小鼠
- TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征及细胞周期特点分析被引量：7
- 2008年
- 目的:研究TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征及细胞周期分布特点。方法:H-E染色法观察正常饲养的TgN(p53mt-LMP1)/HTG4代5、11、15和18月龄阳性表达和阴性表达小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征(主要是癌前病变率),流式细胞术测定其细胞周期分布特点。结果:5、11、15和18月龄阳性表达小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织的癌前病变率分别为0、50%、60%和75%,不同月龄阴性表达小鼠的癌前病变率均为0。与转基因阴性小鼠比较,转基因阳性小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织G0/G1期细胞数量减少,S期、G2/M期细胞数量增多,细胞增殖指数(PI)增高(P<0.01)。结论:随着年龄增长,TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔/鼻咽黏膜上皮组织癌前病变率增加,PI增高,表明鼻腔/鼻咽癌前病变转基因小鼠模型构建成功。
- 何迎春田道法刘红萍卢芳国吴新正
- 关键词：生物学表型细胞周期转基因小鼠
