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湖南省教育厅优秀青年基金(06B053)

作品数：4 被引量：7H指数：2
相关作者：万永奇莫小阳王跃群邓云袁婺洲更多>>
相关机构：湖南师范大学更多>>
发文基金：湖南省教育厅优秀青年基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇多克隆
  • 2篇多克隆抗体
  • 2篇原核表达
  • 2篇抗体
  • 2篇抗体制备
  • 2篇克隆
  • 2篇斑马
  • 2篇斑马鱼
  • 1篇心脏
  • 1篇心脏发育
  • 1篇严重少精子症
  • 1篇少精
  • 1篇少精子
  • 1篇少精子症
  • 1篇染色
  • 1篇染色体
  • 1篇转座
  • 1篇转座子
  • 1篇微缺失
  • 1篇无精

机构

  • 4篇湖南师范大学

作者

  • 3篇邓云
  • 3篇王跃群
  • 3篇莫小阳
  • 3篇万永奇
  • 2篇李永青
  • 2篇吴秀山
  • 2篇袁婺洲
  • 1篇朱婷
  • 1篇杨青
  • 1篇李灼日
  • 1篇曹友德
  • 1篇徐伟
  • 1篇袁婺州
  • 1篇李永清
  • 1篇黄文
  • 1篇杨建华
  • 1篇文东升
  • 1篇邓志伟
  • 1篇袁友红
  • 1篇夏琼

传媒

  • 4篇湖南师范大学...

年份

  • 2篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
建立果蝇心脏发育候选基因CG3295的基因敲除系
2009年
果蝇CG3295基因是哺乳动物基因RMND5在果蝇中的同源物,其功能未知.利用P转座子敲除技术进行果蝇CG3295基因的敲除研究,将果蝇14234系的P转座子与Δ2-3系中的转座酶基因组合到同一个体,使P转座子在体内敲掉目的基因.从后代挑选不含P转座子和转座酶基因的500头雄蝇分别与缺失了CG3295基因的测交系交配,从后代筛选获得20个CG3295基因敲除候选系.进一步利用Hand-GFP系使候选系的心脏表达绿色荧光蛋白,在荧光显微镜下根据候选系是否表现心脏突变表型鉴定敲除系,最后获得了12个表现心脏突变表型的CG3295基因敲除系.
夏琼邓云邓志伟廖丹戴悦万永奇莫小阳李永清王跃群袁婺州
关键词：果蝇
男性严重少精子症和无精症不育患者的Y染色体微缺失研究
2008年
为探讨男性严重少精子症和无精子症患者的发病原因,建立稳定的少精子、无精子症患者Y染色体微缺失的基因诊断体系,选取位于无精子因子(azoo spermia factor AZF)区10个STR微卫星标记,应用多重聚合酶链反应技术,对95例严重少精子症、无精子症患者进行检测分析.结果在89例患者中,共发现7例Y染色体无精子因子AZF微缺失,缺失率为7.87%(7/89),其中有4例为单个位点的缺失,3例为大片段缺失.研究认为Y染色体AZF区域微缺失是造成男性精子发生障碍的常见病因之一,多重聚合酶链反应技术是检测Y染色体微缺失的合适方法.
徐伟文东升李灼日袁友红曹友德郑维邓云
关键词：无精症少精子症Y染色体
斑马鱼HAS2基因的克隆、抗体制备及分析被引量：2
2010年
HAS2是斑马鱼心脏发育的一个标志基因,为了利用斑马鱼动物模型进一步研究HAS2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼HAS2基因的片段.将所得的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-HAS2)转化大肠杆菌(E.coli)BL21,IPTG诱导表达GST-HAS2融合蛋白;通过尿素洗涤沉淀蛋白并切胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体活性.生物信息学分析结果表明:斑马鱼HAS2基因的开放阅读框含有1 658 bp,编码552个氨基酸;SDS-PAGE电泳分析显示,IPTG诱导表达的融合蛋白相对分子质量约为4.5×104;Western blotting分析表明,制备的抗体具有良好的特异性.
杨建华杨青吴秀山袁婺洲王跃群李永青莫小阳万永奇
关键词：斑马鱼原核表达多克隆抗体
斑马鱼hand2基因的克隆、抗体制备及分析被引量：6
2010年
为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,利用western b lotting和免疫组化的方法对抗体进行分析.分析表明:斑马鱼hand2基因成熟肽编码区含有627 bp,编码208个氨基酸,与人Hand2蛋白的同源性达到83%;IPTG诱导表达后,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,经GST纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.融合蛋白相对分子质量约为49 000.分析表明,制备的抗体具有很好的特异性.
朱婷黄文王跃群李永青袁婺洲莫小阳万永奇吴秀山邓云
关键词：斑马鱼原核表达多克隆抗体
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