国家自然科学基金(30870790)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 谷氨酸致人神经母细胞瘤细胞兴奋性毒损伤的机制(英文)被引量：3
- 2010年
- 目的探讨谷氨酸导致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y cells)兴奋性毒损伤的机制。方法MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;测定乳酸脱氢酶释放量观察细胞损伤程度;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特点;钙流法检测胞浆钙离子浓度变化 ;以胞内谷胱甘肽、超氧化物歧化酶活性和胞外丙二醛含量检测谷氨酸引发SH-SY5Y细胞的氧化应激状态。结果谷氨酸导致SH-SY5Y细胞受损,包括存活率下降、乳酸脱氢酶释放量增多及形态结构发生改变;谷氨酸处理 20 min 后,胞浆钙离子浓度无显著改变,而处理 24 h 后,胞浆钙离子大量增加,且 MK801 (NMDA受体拮抗剂)及LY341495 (代谢型谷氨酸受体拮抗剂)均不能抑制钙离子内流的增多;谷氨酸可导致SH-SY5Y氧化损伤,包括胞内谷胱甘肽含量减少、超氧化物歧化酶活性降低、胞外脂质过氧化产物丙二醛水平升高等,而丹参酮IIA (一种抗氧化剂)可减轻这些氧化损伤。结论谷氨酸导致SH-SY5Y细胞兴奋性毒损伤可能是通过氧化损伤产生的,而不依赖于 NMDA 受体介导的钙稳态的破坏。
- 孙中伟张蓝竺淑佳陈温纯梅兵
- 关键词：谷氨酸胞浆钙离子
- 突变型人胰高血糖素样肽-1对神经细胞损伤的保护被引量：2
- 2012年
- 目的研究突变型人胰高血糖素样肽-1(mutated human glucagon-like peptide-1,mGLP-1)对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法环磷酸腺苷(cAMP)试剂盒检测细胞内cAMP含量,比较mGLP-1和天然人胰高血糖素样肽-1(natural human glucagon-like peptide-1,nGLP-1)与GLP-1受体结合的能力;以谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤,同时用mGLP-1处理SH-SY5Y细胞,采用MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH的释放量;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特征;钙流法检测胞内钙离子浓度变化;通过检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(total GS)含量的变化判断细胞氧化损伤程度。结果 mGLP-1与nGLP-1类似,都能提高细胞内cAMP水平;mGLP-1能缓解谷氨酸诱导的细胞损伤,增加细胞存活率,降低LDH释放量;mGLP-1对谷氨酸导致的细胞内钙离子变化没有修复作用;mGLP-1能抑制氧化损伤指标MDA含量升高,促进抗氧化系统指标SOD活性增强和total GS含量增加。结论 mGLP-1可导致细胞内cAMP含量增加。mGLP-1对谷氨酸所致神经细胞损伤具有保护作用,这可能是mGLP-1通过对神经细胞的抗氧化损伤作用实现的,而不是改善谷氨酸导致的钙稳态失衡。mGLP-1的保护作用与nGLP-1类似,而mGLP-1在体内稳定性更强,半衰期更长;提示mGLP-1可能对相关神经退行性疾病的治疗具有更佳的潜在价值。
- 张蓝孙中伟黄刚黄静孟博徐敏华
- 关键词：胞内钙离子神经母细胞瘤细胞
- Presenilin1/Presenilin2双基因敲除小鼠中氧化损伤增加(英文)
- 2009年
- 目的观察3,6,9,12月龄presenilin1和presenilin2双敲除小鼠(dKO)脑组织氧化损伤情况,探讨氧化损伤与presenilins功能丧失所引起的阿尔茨海默病样症状之间的关系。方法酶联免疫反应(ELISA)检测dKO小鼠大脑皮层中Aβ42水平和尿液中8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)水平;硫代巴比妥酸法检测脂质过氧化水平,分光光度计测定DNPH法检测蛋白质损伤水平;试剂盒法检测超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果与对照组相比,dKO小鼠大脑皮层中Aβ42水平显著降低。同时,除了在3月龄dKO小鼠大脑皮层中发现脂质过氧化水平有显著增加外,蛋白质损伤在各年龄段dKO小鼠中均没有明显变化。ELISA检测结果显示尿液中游离的8-OHdG水平在各年龄段的dKO小鼠中均显著降低。SOD和GSH-PX活性均无明显变化,只有9月龄dKO小鼠中的GSH-PX活性有显著增高。结论氧化损伤特别是DNA损伤参与dKO小鼠神经退行性症状的发生过程;由于dKO小鼠大脑皮层中没有Aβ42的沉积,推测造成氧化损伤的原因可能是由活化的小胶质细胞和星形胶质细胞所释放的免疫因子介导的。
- 张冬丽陈逸群姜旭嵇婷婷梅兵
- 关键词：阿尔茨海默病8-OHDG
