新疆维吾尔自治区重点实验室开放课题基金(2005-XJDX0202-02) 作品数:3 被引量:20 H指数:3 相关作者: 陈雪鸿 马旭东 张亚楼 温浩 苗玉清 更多>> 相关机构: 新疆医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 新疆维吾尔自治区重点实验室开放课题基金 乌鲁木齐市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
家犬粪便中的细粒棘球绦虫DNA PCR检测方法的建立 被引量:13 2006年 目的建立检测家犬粪便中细粒棘球绦虫DNA的PCR方法,为开展流行病学监测提供检测手段。方法犬粪经液氮反复冻溶后提取DNA,PCR扩增编码细粒棘球绦虫12s rDNA检测该靶DNA片段(255 bp)。结果10只细粒棘球绦虫感染犬,8只(体内成虫数>80条)阳性,2只(体内成虫数分别为4条和5条)阴性。4只未感染家犬粪样及其他3种绦虫DNA样本均为阴性。结论初步建立了灵敏、特异的检测家犬粪便中细粒棘球绦虫的PCR方法。 张亚楼 温浩 马旭东 苗玉清 陈雪鸿 姜涛 张春 刘辉关键词:细粒棘球绦虫 PCR 灵敏性 终宿主 PCR方法诊断家犬感染细粒棘球绦虫的特异性及在临床诊断中的应用价值 被引量:5 2006年 目的验证PCR方法检测终宿主家犬感染细粒棘球绦虫的特异性及其在临床诊断中的应用价值。方法取感染细粒棘球绦虫家犬粪便,显微镜下计数细粒棘球绦虫虫卵,稀释后PCR检测其敏感性。同时取家犬小肠内水泡带绦虫、多头绦虫、羊绦虫,将其DNA与细粒棘球绦虫DNA一起进行PCR扩增,观察其特异性。对133 bp的目标条带进行序列测定,对比分析。结果PCR检测终宿主家犬感染细粒棘球绦虫具有高度的灵敏性,即使粪便中有1个虫卵(8pg的DNA),也能测出,但扩增后特异性较差,无法利用扩增带型进行诊断。4种寄生虫均具有相同的133 bp DNA重复序列,在400 bp均可检测出相同条带。结论PCR方法检测终宿主感染细粒棘球绦虫DNA重复序列尽管有优良的灵敏性,因其特异性差,不适合用于临床诊断和推广。 张亚楼 Jean Mathieu Bart 温浩 马旭东 苗玉清 陈雪鸿关键词:细粒棘球绦虫 特异性 灵敏性 终宿主 5对引物检测犬棘球蚴病感染方法评价 被引量:3 2007年 目的 评估5对引物检测犬棘球蚴病感染的PCR方法并建立可将多房棘球绦虫及细粒棘球绦虫羊株(G1型)和骆驼株(G6型)区分的方法。方法 选用引物BG1/3、Bretange:1/2、Eg1f/1r、EM—H15/H17和Cabrera:1/2,扩增稀释的细粒棘球绦虫虫卵DNA,进行敏感度测定。对水泡带绦虫、多头绦虫、羊绦虫、多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫G1型和G6型进行PCR扩增,测定引物的特异度。结果 5对引物在体外均能检测出1个虫卵的稀释度。Cabrera:1/2引物能在6种寄生虫样本中扩增出相同片段大小的条带:Bretange:1/2引物可以扩增出多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫G1型和G6型;BG1/3引物可以在多房棘球绦虫和细粒棘球绦虫G1型中扩增出1条带,在细粒棘球绦虫G6型中扩增出2条带:Eg1f/1r可以在细粒棘球绦虫G1型和G6型中扩增出相同片段大小的条带;EM—H15/H17可以在多房棘球绦虫和细粒棘球绦虫G6型中扩增出相同的条带。结论 5对引物中BG1/3具有较强的特异性,其余4对引物特异性不强;利用BG1/3和Eg1f/1r、EM—H15/H17组合可以方便区分细粒棘球绦虫G1型、G6型和多房棘球绦虫。 张亚楼 温浩 马旭东 苗玉清 陈雪鸿 林仁勇关键词:棘球蚴病 聚合酶链反应