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西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白编码序列的克隆及其盐胁迫下的表达被引量：3: 2008年; 根据西伯利亚蓼地下茎抑制消减文库(SSH)中获得的非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer protein,nsLTP)EST序列,应用RACE技术克隆了具有PolyA的全长cDNA序列.该序列全长604bp,其5′非翻译区65bp,3′非翻译区227bp,开放阅读框编码103个氨基酸残基;序列分析表明,该基因具有N端信号肽,具有nsLTP家族共有的典型保守区域,属nsLTP家族基因,命名为PsnsLTPs;荧光定量PCR分析表明,PsnsLTPs在西伯利亚蓼叶、茎、地下茎中均有表达.在3%NaHCO3诱导表达下,该基因在地下茎中表达明显受盐胁迫的诱导,推测该基因在抵御盐胁迫时具有重要作用.; 刘关君田旭刘昌财曲春浦刘桂丰杨传平; 关键词：西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白盐胁迫基因克隆实时定量PCR

西伯利亚蓼谷胱甘肽转移酶和半胱氨酸合成酶基因在酿酒酵母中的共表达被引量：1: 2008年; 谷胱甘肽转移酶和半胱氨酸合成酶在清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)中起重要作用。采用0.36mol.L-1NaHCO3对西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum)进行胁迫处理,荧光定量PCR分析表明这2个基因的表达受盐胁迫强烈诱导。为了分析2个基因是否具有抗盐能力以及其相互协同能力,从cDNA文库中获得谷胱甘肽转移酶(GST)和半胱氨酸合成酶(CS)2个基因,分别将GST、CS和GST+CS转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,并分别命名转基因酵母为ty-gst、ty-cs和ty-gc。在1mol.L-1Na2CO3和5mol.L-1NaCl胁迫处理下,转基因酵母(ty-gst、ty-cs和ty-gc)的耐盐能力均明显高于野生型酵母(wy),而三者之间并无显著差别。在0.4mol.L-1NaCl胁迫处理下,转基因酵母(ty-gst、ty-cs和ty-gc)的抗氧化酶类相关基因SOD1、SOD2、GPX1和GPX3的表达量均低于野生型酵母(对照)(wy),而CTA1表达量均高于野生型酵母(对照)(wy)。转基因酵母ty-cs在0.4mol.L-1NaCl胁迫处理前后其超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)的活性均表现为最高。; 刘明坤刘关君阎秀峰; 关键词：半胱氨酸合成酶谷胱甘肽硫转移酶酿酒酵母

西伯利亚蓼PsPIP1基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达被引量：1: 2008年; 应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从西伯利亚蓼叶cDNA文库中克隆了质膜内在蛋白基因(PsPIP1)的完整编码区cDNA序列(GenBank accession No.EU626398),长度为1004bp,编码285个氨基酸。基于和其他植物水通道蛋白的氨基酸序列、推测的三维结构的比较以及系统进化分析结果,初步确定此基因为水通道蛋白基因家族中的PIP1亚族成员。RT-PCR结果显示,PsPIP1在西伯利亚蓼的地下茎、茎、叶中均有表达,叶中表达量最高,地下茎次之,茎中最低。在NaHCO3胁迫与去胁迫的过程中,此基因在地下茎、茎、叶中的表达模式也有较明显的差异。; 王垠刘关君阎秀峰杨传平刘明坤曲春浦; 关键词：水通道蛋白西伯利亚蓼基因克隆实时定量RT-PCR

二色补血草LbGRP基因的克隆及抗逆能力分析被引量：12: 2010年; 富含甘氨酸RNA结合蛋白(Glycine-rich RNA-binding proteins,GRP)是植物中重要的转录后调控蛋白,在植物的生长发育及对胁迫的抗性调控等过程中起重要作用。文章从二色补血草(Limonium bicolor(Bunge)O.)cDNA文库中克隆出了富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(LbGRP)的全长cDNA序列(GenBank登录号:GQ398238)。为了研究LbGRP的抗逆功能,将其构建到酵母表达载体pYES2中,转化到酿酒酵母INVSc1菌株中,获得重组酵母INVSc1(pYES2-LbGRP),同时将转空pYES2质粒的酵母INVSc1(pYES2)作为对照。对重组酵母INVSc1(pYES2-LbGRP)和对照INVSc1(pYES2)进行NaCl、KCl、NaHCO3、Na2CO3、干旱和冷冻胁迫,比较它们在不同胁迫下的存活率。结果表明,INVSc1(pYES2-LbGRP)在各种胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1(pYES2),证明LbGRP基因具有抗NaCl、KCl、NaHCO3、Na2CO3、干旱和冷冻等胁迫的能力,推测该基因参与了二色补血草的抗逆调控过程。; 潘妍王玉成张大伟杨传平; 关键词：二色补血草抗逆酵母表达

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黑龙江省国际合作项目(WB07N02)