国家自然科学基金(30870754)
- 作品数：16 被引量：45H指数：5
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- 低强度脉冲超声波联合引导组织再生术促进牙周骨开窗缺损修复的动物实验被引量：9
- 2011年
- 目的探讨低强度脉冲超声波（low intensity pulsed uhrasound，LIPUS）联合引导组织再生术（guided tissue regeneration，GTR）对Beagle犬尖牙牙周骨开窗缺损的修复效应。方法构建4只Beagle犬尖牙颊侧区根中1／3处牙周骨开窗缺损模型。将4只Beagle犬的16颗双侧上、下颌尖牙（实验牙）按简单随机法平均分配为4组：①实验1组，LIPUS（60mW／cm^2，20min／d）处理＋GTR＋牙周骨质缺损组；②实验2组，LIPUS（60mW／cm^2，20min／d）处理＋牙周骨质缺损组；③实验3组，GTR＋牙周骨质缺损组；④空白对照组，牙周骨质缺损组。实验共进行28d。每14天分别测量各组处理前后实验牙牙龈表面温度，并行Wilcoxon符号秩和检验。4周后观察脱钙骨组织切片，分析各组尖牙牙周骨开窗缺损的组织学修复效果。结果临床观察各组实验牙牙周均愈合良好。各组处理前后的牙龈表面温度差值[M（Q）]分别为：实验1组：0．225（0．463）℃；实验2组：0．265（0．133）℃；实验3组：0．09（0．115）℃；空白对照组：-0．175（0．370）℃，实验1、2组每次处理前后温度变化差异均有统计学意义（P值均为0．027）。脱钙骨组织切片观察显示实验1组骨缺损内充满团状新生骨组织，成骨细胞增生活跃，骨胶原较成熟，Masson染色红染明显；实验3组新生牙骨质、牙槽骨较实验2组和空白对照组多，新生骨胶原成熟度不高，Masson染色呈红蓝相间；实验2组新生骨胶原成熟度较实验3组和空白对照组高，Masson染色红染明显；空白对照组可见少量新生牙骨质沿切迹处生长，新生骨胶原不成熟，Masson染色呈红蓝相间。结论LIPUS具有促进牙周骨开窗缺损修复的潜能，HPUS与GTR结合可能更利于牙周组织缺损的修复。
- 郑鸿卢礼宋锦璘高翔邓锋王智彪
- 关键词：引导组织再生低强度脉冲超声波
- 低强度脉冲超声波对聚四氟乙烯膜和Bio-Gide胶原膜超声通透性研究
- 2013年
- 检测低强度脉冲超声波(LIPUS)对0.01mm厚度聚四氟乙烯(PTFE)膜和Bio-Gide胶原膜超声透过率,为LIPUS辅助引导组织再生(GTR)术实验研究提供屏障膜的遴选依据。设定LIPUS频率1.5MHz,脉宽200μs,重复率1.0kHz,功率为10~100mW/cm2,间隔10mW/cm2设一检测值,共10组,分别对两种屏障膜的超声透过率进行检测。发现0.01mm厚度PTFE膜超声透过率为78.1%~92.3%,Bio-Gide胶原膜超声通过率为43.9%~55.8%。0.01mm厚度PTFE膜超声透过率明显高于Bio-Gide胶原膜,不同功率下同一屏障膜的超声透过率有统计学差异(P<0.05)。结果表明,0.01mm厚度PTFE膜和Bio-Gide胶原膜超声透过率均较高,应依据不同实验需求遴选屏障膜,并进行超声透过率实验以确保有效功率。
- 柴召午赵纯亮宋锦璘邓锋杨霁高翔刘珉懿
- 关键词：低强度脉冲超声波引导组织再生
- 低强度脉冲超声波联合引导骨组织再生促进牙周骨缺损修复的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)联合引导骨组织再生(GBR)对Beagle犬尖牙牙周骨缺损的修复效应。方法将8只Beagle犬中每只犬的4颗尖牙随机分配到4组:实验1组(LIPUS处理+GBR+自体骨移植组),实验2组(LIPUS处理+自体骨移植组),实验3组(GBR+自体骨移植组),空白对照组。在犬尖牙颊侧区根中1/3处制备牙周骨缺损模型,根据分组,自体骨移植后,实验1组和2组采用LIPUS处理20 min.d-1,超声强度为30 mW.cm-2,实验1、3组植入Bio-Gide胶原膜。在LIPUS处理6、8周后处死Beagle犬,对各组尖牙牙周骨缺损区进行Micro-CT检测和分析。结果临床观察各组牙周骨缺损面积均不同程度缩小。Micro-CT检测分析表明,各组6周与8周时的骨小梁数目、骨小梁厚度和骨小梁体积均无统计学差异(P>0.05),而各组之间的骨组织测量指标均有统计学差异(P<0.05),实验1组新生骨量最多。结论LIPUS具有促进牙周骨缺损修复的潜能,LIPUS与GBR结合可能更有利于牙周骨缺损的修复与再生。
- 蒋欣益杨霁柴召午宋锦璘邓锋王智彪
- 关键词：低强度脉冲超声波引导骨组织再生骨缺损
- 超声微泡介导pEGFP-N1转染大鼠牙囊细胞:细胞生物学性质相对稳定
- 2014年
- 背景:利用超声波和微泡对比剂相互作用,产生空化效应和机械效应,破坏细胞膜的完整性,产生暂时性、可逆性的小孔,增加细胞膜的通透性,增强微泡载体对基因的转移,提高基因转染率。目的:探讨在超声波辐照下微泡对比剂介导p EGFP-N1质粒转染SD大鼠乳鼠牙囊细胞的效率及安全性。方法:体外原代培养新生SD大鼠牙囊细胞并传至第4代,在不同条件下采用p EGFP-N1质粒转染乳鼠牙囊细胞。以不同的超声辐照时间(15,30,45,60 s)和辐照强度(0.5,1 W/cm2)两两组合进行辐照,筛选较高转染效率的参数组合并应用于后续实验。实验分组为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组和脂质体+质粒组。转染48 h后倒置荧光显微镜观察p EGFP表达,MTT法检测转染后的乳鼠牙囊细胞增殖抑制率。结果与结论:超声强度为0.5 W/cm2且辐照时间为30 s时转染率明显高于其他超声参数组合。该条件下超声微泡介导p EGFP-N1质粒对乳鼠牙囊细胞的转染率高于传统脂质体介导的转染率,且对细胞活力无明显影响。提示超声微泡能安全、高效介导p EGFP-N1质粒转染大鼠牙囊细胞,其细胞生物学性质相对稳定,可为牙周组织工程提供一种较理想的基因转染方法。
- 冉玲李晓倩蒋欣益邓锋宋锦璘曹礼
- 关键词：牙囊高能量冲击波转染微泡
- 低强度脉冲超声波联合骨形态发生蛋白2促进人牙周膜细胞的成骨分化被引量：1
- 2015年
- 背景:低强度脉冲超声波和骨形态发生蛋白2均可促进人牙周膜细胞成骨分化,但两者联合应用尚未见报道。目的:验证低强度脉冲超声波和骨形态发生蛋白2联合应用诱导牙周膜细胞成骨分化的生物学效应。方法:体外分离、原代、传代培养与鉴定牙周膜细胞。取生长良好的第4代牙周膜细胞接种至六孔板中,实验分为4组:对照组、低强度脉冲超声波诱导组、骨形态发生蛋白2诱导组、低强度脉冲超声波联合骨形态发生蛋白2诱导组。采用碱性磷酸酶检测试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性,RT-PCR检测牙周膜细胞成骨相关基因Ⅰ型胶原、骨桥蛋白的表达。结果与结论:通过低强度脉冲超声波、骨形态发生蛋白2和低强度脉冲超声波+骨形态发生蛋白2诱导后,体外培养的牙周膜细胞碱性磷酸酶活性均显著高于对照组(P<0.05),其中低强度脉冲超声波+骨形态发生蛋白2组碱性磷酸酶活性最强(P<0.05)。RT-PCR结果分析显示,低强度脉冲超声波与骨形态发生蛋白2都可以上调Ⅰ型胶原、骨桥蛋白基因的表达(P<0.01),两者联合处理作用更为明显(P<0.001)。结果初步提示,低强度脉冲超声波和骨形态发生蛋白2均可以增强牙周膜细胞成骨能力,两者联合应用其成骨诱导能力更强。
- 刘俊胡波蒋欣益孙吉成邓锋宋锦璘
- 关键词：低强度脉冲超声骨形态发生蛋白2人牙周膜细胞成骨分化
- 低强度脉冲超声波联合牙周组织翻瓣移植修复Beagle犬骨上缺损型牙周病被引量：2
- 2012年
- 背景:近年来,低强度脉冲超声波联合牙周翻瓣对骨上缺损型牙周炎组织的修复效应的尚未见报道。目的:观察低强度脉冲超声波联合牙周翻瓣术对Beagle犬骨上缺损型牙周炎组织的修复效应。方法:在4只Beagle犬左下颌第二、三、四前磨牙处构建骨上缺损型牙周炎模型,经改良Widman翻瓣及根面处理后随机分为对照组(0mW/cm2)和ISATA30mW/cm2×20min/d、ISATA60mW/cm2×20min/d低强度脉冲超声波处理组。结果与结论:低强度脉冲超声波处理前后各组牙龈组织温度变化值差异无显著性意义(P>0.05);6周后对照组和低强度脉冲超声波处理组,以及处理组之间在牙周临床指标上差异无显著性意义(P>0.05);组织学切片苏木精-伊红染色显示低强度脉冲超声波处理组成骨细胞增生及骨陷窝较对照组明显,尤其是ISATA30mW/cm2×20min/d低强度脉冲超声波处理组;Masson染色显示低强度脉冲超声波处理组红染较对照组明显;低强度脉冲超声波处理组和对照组均形成长结合上皮。提示低强度脉冲超声波具有潜在的促骨上缺损型牙周炎组织修复作用。
- 李娜卢礼宋锦璘邓锋赵纯亮王智彪
- 关键词：低强度脉冲超声波牙周翻瓣术BEAGLE犬
- 低强度脉冲超声波对Beagle犬Ⅱ度根分叉病变的辅助效应被引量：11
- 2011年
- 背景:低强度脉冲超声波主要用于促进骨折愈合及提高新生骨组织密度,尚未见其对Ⅱ度根分叉病变组织学修复效应的报道。目的:观察低强度脉冲超声波对Ⅱ度根分叉病变的组织学修复效应。方法:5只Beagle犬各取2颗下颌第4前磨牙颊侧作为实验区,建立Ⅱ度根分叉病变模型,分别分为超声组和对照组并在颊侧缺损龈方根面制备切迹作为参照点,高糖饲养8周。超声组行根面平整术,术后1周行低强度脉冲超声波(90mW/cm21.5MHz,200μs,1kHz)处理20min/d,对照组行根面平整术和假处理。6周后取实验区域组织制备脱钙切片,苏木精伊红染色、Masson染色行根分叉区域组织测量分析。结果与结论:超声组根分叉区新生牙槽骨沿根面生长,根分叉区可见牙龈上皮;对照组根分叉区以结缔组织生长为主,可见大量牙龈上皮和少量新生骨组织。超声组新生牙槽骨胶原呈"红-蓝"相间,以红染为主;对照组呈现蓝染,即超声组的新生牙槽骨胶原较对照组成熟。超声组牙槽骨、牙骨质、牙周膜新生量均大于对照组(P<0.05)。提示90mW/cm2低强度脉冲超声波可促进根分叉病变新生牙槽骨胶原成熟和改建。
- 何平高翔宋锦璘邓锋赵纯亮王智彪李娜
- 关键词：低强度脉冲超声波BEAGLE犬胶原
- 低强度脉冲超声波联合引导骨再生术对Beagle犬牙周骨开窗缺损修复效应的研究被引量：2
- 2012年
- 本研究探讨了低强度脉冲超声波(LIPUS)联合引导骨再生术(GBR),对Beagle犬牙周骨开窗缺损的修复效应。构建5只Beagle犬尖牙颊侧根中1/3处5 mm×5 mm矩形牙周骨开窗缺损模型,将每只Beagle犬4颗尖牙随机分配到4个治疗组:LIPUS(90 mW/cm2,20 min/d)组、LIPUS(90 mW/cm2,20 min/d)+GBR组、GBR组、空白对照组,每组共计5颗实验牙。4周后处死Beagle犬,通过对实验区进行HE、Masson染色、Micro-CT检测以及对新生牙槽骨面积(NBA)及新生牙槽骨占初始缺损面积百分比(NBA%)的测量,比较各组牙周骨开窗缺损的组织学修复差异。Micro-CT观察显示,各组新生牙槽骨面积由大到小依次为LIPUS+GBR组、GBR组、LIPUS组、空白对照组;Masson染色显示,相比GBR组和空白对照组,LIPUS组和LIPUS+GBR组新生牙槽骨胶原成熟度较高;组织学测量各组NBA及NBA%,LIPUS组为(0.39±0.06)mm2,7.74%±1.09%;LIPUS+GBR组为(0.52±0.13)mm2,10.3%±2.22%;GBR组为(0.41±0.11)mm2,7.44%±2.20%;空白对照组为(0.24±0.04)mm2,4.64%±0.99%,各组间牙槽骨修复效果差异有统计学意义(P<0.05),新生牙槽骨量由大到小依次为LIPUS+GBR组、GBR组、LIPUS组、空白对照组。LIPUS辅助GBR治疗能够促进牙周骨开窗缺损的早期修复。
- 高翔宋锦璘邓锋赵纯亮王智彪
- 关键词：低强度脉冲超声波引导骨组织再生BEAGLE犬
- 低强度脉冲超声刺激对人类牙周膜细胞BMP-2表达效应的研究被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨一定强度的LIPUS对H-PDLCs进行辐照后,细胞内BMP-2的表达变化,对LIPUS诱导牙周成骨效应进行初步评估。方法:体外培养H-PDLCs,LIPUS(90mW/cm2,20min/天)连续处理1周,分别于处理1、3、5、7天后收集标本,同期培养的未接受任何处理的H-PDLCs为对照组。实时定量PCR检测各时间点细胞内BMP-2基因表达变化,2^(-△△CT)法分析基因相对表达变化量,对△CT值组间差异进行方差分析。结果:实时定量PCR显示LIPUS处理后H-PDLCs内BMP-2表达逐渐增强,于第3天达高峰,第5天逐渐减弱,但表达仍高于同期未处理组,到第7天下降到接近同期未处理组水平。尤其是,LIPUS处理3天后较同期对照组BMP-2基因表达增加6.07倍;5天后较同期对照组BMP-2基因表达增加2.30倍,△CT值组间均具有统计学差异(P<0.05)。结论:本研究发现LIPUS处理可有效诱导H-PDLCs的BMP-2表达增强,随时间变化呈现一定的规律性。这表明LIPUS具有潜在的促进H-PDLCs成骨分化效应。
- 杨尊任蕾西宋锦璘周洁李发琪赵纯亮王智彪
- 关键词：牙周组织缺损牙周膜细胞低强度脉冲超声BMP-2成骨效应
- SV40Tag基因片段转染SD大鼠牙囊细胞后相关生物学特性初步研究被引量：3
- 2013年
- 目的转染猿肾病毒SV40Tag基因片段至SD大鼠牙囊细胞,获取具有无限增殖能力和稳定生物学性状的牙囊细胞用于牙周组织工程的研究。方法利用293细胞包装病毒构建含SV40Tag的逆转录病毒载体,制备重组逆转录病毒并转染至SD大鼠牙囊细胞。以正常牙囊细胞为对照,倒置显微镜下观察细胞形态及活力,分析细胞端粒酶活性,并检测其成骨分化及增殖特性。结果转染SV40Tag基因后,SD大鼠牙囊细胞传代至60代,生长依然旺盛,存在较强活力;牙囊细胞端粒酶活性显著增强,与对照组有统计学差异(P=0.033);牙囊细胞成骨分化相关基因(碱性磷酸酶、骨钙素、骨形态发生蛋白、Runx2基因)、促有丝分裂相关基因(碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子)的电泳条带与对照组均无统计学差异(P>0.05)。结论 SV40Tag基因片段转染SD大鼠牙囊细胞后具有无限传代增殖和抗衰老的潜在能力,其细胞生物学特性相对稳定,可为牙周组织工程提供较理想的种子细胞来源。
- 杨尊刘婷郑鸿邓锋宋锦璘
- 关键词：牙囊细胞基因转染端粒酶成骨分化
