国家自然科学基金(81270064)
- 作品数：21 被引量：93H指数：7
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- 棘白菌素类抗真菌药物的“矛盾现象”被引量：7
- 2014年
- 棘白菌素类抗真菌药物为葡聚糖合成酶抑制剂,主要包括卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净,其通过非竞争抑制真菌β-1,3-D-葡聚糖合成酶,造成细胞壁中β-葡聚糖含量减少,从而导致细胞壁结构破坏,最终致使菌体裂解、死亡[1]。棘白菌素类抗真菌药物对念珠菌属是杀菌剂,对曲霉属是抑菌剂[2-3],在侵袭性真菌病治疗中发挥重要作用。
- 张明施毅
- 关键词：棘白菌素类曲霉念珠菌
- 维生素D对免疫系统的调节作用被引量：10
- 2013年
- 长期以来,人们对维生素D的认识主要集中在对钙磷骨代谢的调节。自1980年,人们在钙磷骨代谢相关细胞外,如甲状旁腺细胞、淋巴细胞、胸腺及前髓细胞等发现了维生素D受体后,对维生素D的认识进一步开阔,后期的研究结果显示维生素D除了调节钙磷骨代谢之外,还具有更广泛的生理功能,其作用主要包括:参与免疫调节;参与炎性反应;糖、脂代谢的调节等病理生理过程。近年来,维生素D对免疫系统的调节作用备受关注。本文就维生素D对免疫系统的调节作用作一综述。
- 高卫卫李培施毅
- 关键词：维生素D免疫系统
- 炎性反应和免疫应答在肺曲霉病中的作用被引量：3
- 2015年
- 自然界中的曲霉属有200多种，其中10％对人类有致病性，在呼吸道总孢子中曲霉占相当大比重。吸入的曲霉孢子肿胀、菌丝浸润可引起轻到超敏反应、重到侵袭性疾病等一系列严重程度不同的病变［1］。肺曲霉病的临床表现取决于吸入的分生孢子与免疫效应细胞相互作用的结果。
- 吴婷孙禾苏欣施毅
- 关键词：曲霉真菌感染炎性反应免疫应答
- 人转录因子PU.1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的 PU.1是调控肺泡巨噬细胞天然免疫功能的重要转录因子之一。文中旨在构建并鉴定表达人转录因子PU.1基因的重组腺病毒载体。方法将PU.1基因SPI1和真核表达载体p IRES-EGFP进行双酶切、连接酶连接,PCR扩增目的片段SPI1-IRES-EGFP,与中间质粒p DONR221和腺病毒骨架质粒p Ad/CMV/V5-DEST进行重组,线性化后转染人胚肾293(HEK293)细胞,获得重组腺病毒p AD-SPI1-IRES-EGFP,经过大量扩增后获得高浓度的重组腺病毒。TCID 50法测定重组腺病毒滴度,通过荧光显微镜和实时荧光定量PCR(Real-time q PCR)鉴定PU.1基因在HEK293细胞中的表达。结果菌落PCR、酶切电泳及测序结果均表明重组腺病毒携带有正确的PU.1基因,TCID 50法计算腺病毒滴度为8×1011IU/m L,荧光显微镜下可见明显的绿色荧光,Real-time q PCR转染重组腺病毒组PU.1 mRNA表达量是转染空病毒组的2189.93倍。结论成功构建并获得了高浓度的人转录因子PU.1基因重组腺病毒,为后续研究高表达PU.1在宿主抗烟曲霉感染中的天然免疫作用奠定了基础。
- 刘晨阳颜文杰王敏孙文逵苏欣施毅
- 关键词：重组腺病毒烟曲霉天然免疫
- 烟曲霉对唑类抗真菌药物的耐药性被引量：6
- 2013年
- 近年来，随着免疫抑制治疗、化疗、骨髓移植和实体器官移植的增加，侵袭性真菌感染的发病率也随之上升。对人类有致病作用的真菌主要有曲霉、念珠菌、新型隐球菌、毛霉等，在曲霉感染中以烟曲霉最为常见。由烟曲霉引起的侵袭性曲霉病病死率高，已成为该类患者最常见的死亡原因。
- 张明孙文逵施毅
- 关键词：烟曲霉耐药性
- 三种不同方法转染THP-1巨噬细胞效果比较被引量：8
- 2015年
- 目的探讨通过腺病毒,慢病毒,脂质体2000三种方法转染THP-1巨噬细胞的最佳方法。方法采用腺病毒,慢病毒,脂质体2000三种方法分别转染THP-1巨噬细胞,并用荧光显微镜观察细胞转染荧光表达情况,流式细胞仪检测THP-1细胞转染效率,台盼蓝染色检测细胞病死率。结果腺病毒对THP-1巨噬细胞转染效率可在对细胞损伤较小的情况下达较高水平,但可能对细胞免疫状态影响大。MOI=200时,转染效率较低,仅为(29.81±2.50)%,细胞病死率为(5.17±0.44)%;MOI=800,转染效率最高,EGFP阳性率可达(86.49±6.11)%,细胞病死率为(8.80±0.54)%;MOI升至1200后,EGFP阳性率为(77.88±5.77)%,细胞病死率上升明显(14.50±0.77)%(P<0.05);慢病毒转染效率高及细胞毒性较腺病毒低,但因其病毒产量低,实验消耗病毒量大,因而影响其应用。当MOI=10时,EGFP阳性率仅为(28.09±1.67)%,细胞病死率为(4.74±0.31)%;MOI=60时,转染率最高,EGFP阳性率为(91.96±1.66)%,细胞病死率升至(7.25±0.50)%,此时病死率才有统计学意义(P<0.05)。脂质体2000对THP-1巨噬细胞毒性较大,细胞死亡率高,转染效率极低,不适合转染。结论腺病毒与慢病毒转染THP-1巨噬细胞各存在一定优劣,在实验中需酌情选择,脂质体2000不适宜转染THP-1巨噬细胞。
- 颜文杰孙文逵李培苏欣施毅
- 关键词：THP-1巨噬细胞腺病毒慢病毒细胞转染
- EUCAST和CLSI微量稀释法检测曲霉体外药物敏感试验差异比较
- 2014年
- 目的比较欧洲抗菌药物敏感试验委员会（European Committeeon Antimicrobial Susceptibility Testing，EUCAST）和美国临床实验室标准化协会（Clinicaland Laboratory Standards Institute，CLSI）微量稀释法检测曲霉体外药物敏感性的差异。方法分别用EUCAST方法和CLSI方法检测116株曲霉对两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、卡？白芬净和米卡芬净的敏感性，比较两种方法的基本符合率、药敏符合率、极重大误差率和重大误差率。结果EUCAST方法和CLSI方法对116株曲霉药敏检测的基本符合率为96．3％～100％。两方法检测烟曲霉对伏立康唑的药敏符合率98．8％，重大误差为1．2％，极重大误差率为0。烟曲霉和黑曲霉对两性霉素B以及烟曲霉和黄曲霉对伊曲康唑的药敏符合率均为100％，重大误差率和极重大误差率均为0。结论EUCAST方法和CLSI方法对检测曲霉体外药物敏感性具有良好的一致性。
- 张明陈菲孙文逵吴婷颜文杰苏欣施毅
- 关键词：曲霉EUCASTCLSI最低有效浓度
- 转录因子PU.1与机体免疫功能的相关性及其研究进展被引量：8
- 2013年
- PU.1是转录因子ETS家族的重要成员,是造血干细胞增殖和分化的主要调节因子,对机体天然免疫、获得性免疫的调节有着重要作用,但其分子机制尚不完全清楚。目前,已经发现PU.1有110多个直接靶基因,功能主要涵盖调节抗体、受体及补体的表达,调控免疫细胞增殖与分化,调节炎症中相关细胞因子、受体及效应酶的表达等3个方面。最新有研究报道PU.1是抑癌基因LIMD1的主要调节因子。随着分子生物学技术的发展,PU.1的功能及调节机制方面的探讨也逐渐增多,并初步确认了PU.1在机体免疫调节及炎症反应中的中心调节作用。文中就PU.1及其与机体免疫的关系作一综述。
- 王权孙文逵施毅
- 关键词：PU转录因子免疫炎症
- 烟曲霉孢子抑制人支气管上皮细胞早期凋亡的机制探讨
- 2014年
- 目的探讨烟曲霉孢子对人支气管上皮细胞(16HBE)早期凋亡的影响及其可能机制。方法采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导16HBE细胞凋亡,再分别用不同浓度的乳胶珠颗粒、灭活烟曲霉孢子和静息烟曲霉孢子刺激上述细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,免疫印迹法检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达。结果 TNF-α刺激后16HBE细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。静息烟曲霉孢子组细胞凋亡率明显下降(P<0.05),caspase-3表达明显减少(P<0.05)。静息烟曲霉孢子浓度越高,细胞凋亡率及caspase-3表达越低。乳胶珠颗粒与灭活烟曲霉孢子对16HBE细胞凋亡率及caspase-3表达水平均无明显影响(P>0.05)。结论烟曲霉孢子可通过调控caspase-3而抑制TNF-α诱导的16HBE细胞早期凋亡,且烟曲霉孢子浓度越高抑制作用越明显。
- 孙禾王权吴婷吴晓东苏欣施毅
- 关键词：肿瘤坏死因子Α半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- C型凝集素受体与Th17细胞免疫在真菌感染中的研究进展被引量：2
- 2014年
- Th1、Th2细胞是经典的辅助T细胞,分别以分泌INF-γ、IL-4为特征。Th17细胞是近期发现的辅助T细胞,以分泌IL-17为特征,能诱导多种炎性反应及髓系细胞、上皮细胞等抗微生物应答。Th17细胞分化是当前关注的焦点。已有研究结果证实,Th17细胞应答能驱动保护性的抗真菌免疫反应[1],但其介导的炎性效应与自身免疫疾病相关。抗原提呈细胞（antigen-presenting cell,APC）上的模式识别受体（pattern recognition receptors,PRRs）是研究Th17细胞免疫的重要领域。
- 吴婷孙禾施毅
- 关键词：C型凝集素受体真菌感染固有免疫
