国家自然科学基金(30500335)
- 作品数：12 被引量：84H指数：6
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家蝇细胞凋亡起始酶Caspase-1基因的克隆及在不同虫态的表达被引量：1
- 2009年
- 为了研究Caspases家族在昆虫发育变态中的作用,通过RT-PCR扩增并结合RACE技术,克隆得到家蝇Muscadomestica Caspase-1基因1条,命名为Mdom-Caspase-1(GenBank中cDNA序列号为EU854472,氨基酸序列号为ACF71490)。该基因全长1295bp,阅读框序列870bp,共编码289个氨基酸,理论分子量32.83kDa,等电点8.67。Mdom-Caspase-1蛋白有5个保守的半胱氨酸位点QACQG,具有Caspase的典型特征;整个分子呈现亲水性,有8个区域共89个氨基酸为亲酯性,蛋白质二级结构主要由11个α螺旋区、7个β-折叠区、17个β-转角区组成。昆虫间Caspase-1分子具有明显的保守性,Mdom-Caspase-1与黑腹果蝇Drosophila melanogaster、埃及伊蚊Aedes aegypti和致倦库蚊Culex quinquefasciatus的Caspase-1氨基酸序列相似性为65%～77%。RT-PCR半定量分析结果表明,Mdom-Caspase-1基因在家蝇各个虫态中均有表达,但在卵期、3龄幼虫、预蛹、蛹和羽化5d的雌虫中的表达量明显高于其他虫态。这些结果提示Caspase-1可能与昆虫发育变态关系密切,为进一步研究昆虫Caspase-1功能、设计Caspase-1抑制剂提供了分子基础。
- 程功龚亮陈永胡美英钟国华
- 关键词：家蝇细胞凋亡CASPASE-1克隆表达量
- Caspase-3抑制剂研究进展被引量：10
- 2009年
- Caspase-3是细胞凋亡的关键酶和执行者,研究开发Caspase-3抑制剂对于阐明许多重要疾病,提供治疗方案以及开发新型农药、兽药都具有潜在应用价值。通过计算机辅助分子设计、高通量筛选等先进方法技术,近来国内外发现了许多类型各异的高活性Caspase-3抑制剂,不少化合物活性达到了纳摩尔级。本文从合成肽类抑制剂、合成非肽类抑制剂、天然肽类抑制剂、天然非肽类抑制剂角度对近年来国内外Caspase-3抑制剂研究进展进行了综述,旨在为相关研究提供参考。
- 张彦博程功钟国华
- 关键词：CASPASE-3抑制剂
- 昆虫钠离子通道与击倒抗性研究进展
- 综述了昆虫钠离子通道与击倒抗性关系的研究进展,拟除虫菊酯的主要作用靶标是电压门控的钠离子通道。昆虫神经系统对拟除虫菊酯类杀虫荆敏感性下降的击倒抗性机制是钠离子通道结构基因突变。
- 徐齐云水克娟罗建军翁群芳钟国华
- 关键词：钠离子通道拟除虫菊酯
- 文献传递
- 6种生物碱对斜纹夜蛾离体培养细胞的作用方式被引量：4
- 2010年
- 通过倒置显微镜观察斜纹夜蛾细胞凋亡小体,采用MTT法测定细胞增殖抑制作用,并使用流式细胞仪检测细胞周期时相,研究了骆驼蓬碱、喜树碱、蓖麻碱、苦参碱、博落回碱和烟碱对斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1的作用方式和细胞毒理。结果表明:骆驼蓬碱5.0μg/mL、20.0μg/mL和喜树碱0.5μmol/L、1.0μmol/L处理后48～60 h,斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1表现出明显的细胞凋亡诱导作用,处理后12～48 h,明显抑制SL-1细胞增殖,流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G2/M期;博落回碱和蓖麻碱5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用,以20.0μg/mL处理具有细胞周期时相阻滞作用,同样使细胞阻滞于G2/M期,但无明显的细胞凋亡诱导作用;烟碱和苦参碱在5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用。
- 黄劲飞贾建文罗建军翁群芳钟国华
- 关键词：生物碱斜纹夜蛾细胞
- 不同杀虫成分对Sf9细胞凋亡的影响被引量：6
- 2009年
- 通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL处理后72 h内、喜树碱0.35-3.50μg/mL处理后36 h,Sf9细胞产生大量典型凋亡小体,处理时间延长或剂量加大则以造成细胞坏死为主;DNA电泳产生典型的DNA Ladder,表明印楝素和喜树碱对Sf9具有明显的细胞凋亡诱导作用.印楝素1.5μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后24-48 h,喜树碱0.35-3.50μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后12 h.苦参碱、氟铃脲、毒死蜱、灭多威、氯氰菊酯以0.1-10.0μg/mL及昆虫蜕皮激素20-羟基蜕皮酮（20-hydroxyecdysone）以0.048-4.800μg/mL处理后72 h内对Sf9均无明显的细胞凋亡诱导作用.杀虫剂对昆虫细胞凋亡诱导效应随供试化合物、细胞种类、处理剂量、处理时间而异.
- 贾建文黄劲飞王文祥胡美英钟国华
- 关键词：细胞凋亡印楝素喜树碱
- 昆虫化学感受蛋白被引量：12
- 2009年
- 化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)是广泛存在于各种昆虫的疏水性蛋白,被认为在昆虫嗅觉行为中执行了运载非挥发性气味分子到达相应受体的功能。文章从序列特征、二级和三维结构、结合配体、表达特征、生理功能和进化地位等方面进行较详细的介绍,并从理论和实践角度探讨CSPs的研究前景和重点。
- 龚亮陈永程功钟国华
- 水稻纹枯病菌粗毒素提取及活性初步研究被引量：15
- 2009年
- [目的]研究水稻纹枯病菌的致病机制及毒素的活性成分。[方法]将水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani在改良R ichard培养基中培养,培养滤液经离心、灭菌、活性炭粒吸附层析、甲醇洗脱、蒸馏水洗脱、浓缩得培养液粗提物、甲醇粗提物以及水粗提物,并对3种粗提物进行活性测定。[结果]3种粗提物均为黄褐色膏状物;活性测定表明,3种粗提物对水稻胚根、胚芽都有明显的生长抑制作用,对水稻4叶期幼苗都有致萎作用,对水稻离体叶片也有不同程度的毒害作用,能产生与病原菌侵染类似的云纹状褪绿斑。[结论]水稻纹枯病菌毒素的活性组分可能有多种成分。
- 黄文文向准龚亮钟国华
- 关键词：水稻纹枯病粗毒素生物活性
- 植物源物质诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡被引量：15
- 2008年
- 为了研究植物源物质对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞系SL-1的凋亡诱导作用,采用倒置相差显微镜观察了印楝素、喜树碱等9种物质各自对SL-1凋亡小体的浓度效应及时序性。结果表明：印楝素0.1～5.0μg/mL和喜树碱0.5～20.0μmol/L处理SL-1,24～48h后均产生大量典型的凋亡小体;茶皂素、蓖麻碱、黄樟油、丹皮酚、烟碱、苦参碱和博落回碱0.1～20.0μg/mL处理SL-1后,整个观察期72h内均无明显凋亡小体出现,凋亡诱导作用不明显。印楝素0.75μg/mL诱导SL-1细胞凋亡,从凋亡小体判断,处理后0～36h属细胞凋亡早期,36～60h属细胞凋亡中期,60h后为细胞凋亡晚期。喜树碱5.0μmol/L诱导SL-1细胞凋亡,处理后0～24h属细胞凋亡前期,24～54h属细胞凋亡中期,54h后进入细胞凋亡晚期。初步认为印楝素和喜树碱对SL-1有凋亡诱导作用,并具有一定的浓度依赖性和时序性。
- 钟国华水克娟黄劲飞贾建文胡美英
- 关键词：细胞凋亡凋亡小体印楝素喜树碱
- 印楝素对SL-1的细胞凋亡诱导作用被引量：15
- 2008年
- 本文以喜树碱（camptothecin）作对比,以二甲基亚砜（DMSO）作对照,系统研究了印楝素（azadirachtin）对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体细胞系（SL-1）的凋亡诱导作用。印楝素0.75μg/mL处理后SL-1细胞后12-72h,倒置显微镜观察可见大量细胞皱缩,体积变小,胞膜气泡化,与邻周细胞脱落,胞浆浓缩,胞膜突起,细胞器密集,核染色质浓缩并凝聚在核膜周边,出现大量凋亡小体;AO染色荧光显微镜观察可见细胞核内致密明亮黄绿色荧光和亮绿色或橘黄色的凋亡小体;透射电镜观察可见细胞皱缩、微绒毛消失、染色质浓缩和边缘化、核膜皱缩界限模糊、部分线粒体嵴结构消失和数量明显增加的吞噬泡等细胞凋亡典型形态学特征;TUNEL实验可见大量被标记为小圆形或环形黄绿色或绿色荧光的阳性凋亡细胞。流式细胞仪测定表明,印楝素0.75μg/mL处理后48h凋亡率最高达11.45%,比对照提高381.3倍;而喜树碱以1.72μg/mL处理亦对SL-1具有相似的诱导作用,处理后36h凋亡率最高达到17.42%。扫描电镜观察表明,印楝素和喜树碱处理后,SL-1细胞表面没有形成明显的“孔”、“洞”、“门”之类的结构破坏。推测印楝素与喜树碱对SL-1的凋亡信号转导方式和途径不同,导致细胞凋亡时序性不同。
- 钟国华水克娟吕朝军贾建文任太军胡美英
- 关键词：印楝素喜树碱细胞凋亡诱导显微形态超微结构
- 印楝素可能通过干扰细胞凋亡抑制果蝇生长发育被引量：3
- 2009年
- 为了探讨印楝素调节昆虫生长发育的细胞毒理机制，寻找杀虫作用新靶标，以含印楝素0．5、1．0、2．0、3．0、5．0mg／kg的培养基饲养黑腹果蝇幼虫，观察幼虫生长发育情况，通过荧光显微技术研究胚胎发育过程中的细胞凋亡．结果表明，印楝素处理可显著抑制黑腹果蝇幼虫的生长发育，处理后5d平均虫重由对照的1．41mg降低至1．13～0．38mg，发育历期由对照的4．50d延长至5．17—12．33d，发育抑制率为19．86％～73．05％，或形成永久性幼虫不能化蛹，最终死亡；部分幼虫虽然能化蛹，但化蛹率下降至1．67％～63．33％，均显著低于对照组的95．00％，羽化率由对照的95．00％下降至63．33％～1．67％，平均产卵数由对照的57．33下降至29．67～4．33，出现畸形成虫，个体明显变小．运用荧光显微镜观察发现，印楝素0．5mg／kg和2．0mg／kg处理能明显推迟果蝇胚胎细胞凋亡高峰期，缩短凋亡峰期的持续时期．
- 任太军戚晓娴程功钟国华
- 关键词：印楝素黑腹果蝇生长发育细胞凋亡
