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大鼠肝星状细胞和枯否细胞的分离与培养方法被引量：9: 2007年; 目的建立一种可以同时分离大鼠肝星状细胞（HSC）和枯否细胞（KC）的方法。方法选用SD大鼠，经胶原酶和蛋白酶灌注肝脏后，用18％Nycodenz密度梯度离心，分离大鼠HSC和KC，HSC处在界面，KC处在界面下。常规台盼蓝染色行细胞活力鉴定；荧光显微镜下观察自发荧光确定HSC的纯度；KC免疫细胞化学检测。结果成功分离大鼠肝星状细胞和枯否细胞，HSC得率为2×10^7／肝，KC得率为（3-6）×10^6／肝，活性〉90％，纯度〉90％。结论该方法建立的HSC和KC同时分离培养的方法，简单、易行、可靠，细胞纯度高，同时获得的细胞可保持良好的生物学性状。; 张磊黄成李俊吕雄文朱鹏里王建青李增贺晓昕; 关键词：枯否细胞细胞培养技术

咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用被引量：15: 2009年; 目的研究咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法采用酒精灌胃制备急性酒精性肝损伤小鼠模型,每天1次,连续10d。给药组同时灌服相应药物。于末次灌胃后12h采血,并处死动物,剖腹取肝,制备肝匀浆。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量及血清中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,并行肝脏病理学检查。结果咖啡因(5、15、30mg/kg)组能显著降低急性酒精性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量的升高;咖啡因(15、30mg/kg)能显著增强急性酒精性肝损伤小鼠肝组织中SOD活性;咖啡因(30mg/kg)组能显著降低急性酒精性肝损伤小鼠肝组织中的MDA含量;咖啡因(5、15、30mg/kg)组显著降低急性酒精性肝损伤小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平的升高。病理组织学显示咖啡因能显著改善肝细胞脂肪变性。结论咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤有较好的保护作用,其机制可能与抗氧化及对IL-1β和TNF-α水平的抑制有关。; 陈震吕雄文李俊张磊刘洪峰黄成朱鹏里

库普弗细胞在酒精性肝病发病机制中的作用研究进展被引量：15: 2010年; 酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是由于酒精的过量摄入导致的肝脏损害及其一系列病变,给人类健康带来极大的威胁,是我国目前面临的一大医学问题。库普弗细胞(kupffer cell,KC)是一种肝巨噬细胞,在ALD过程中能够在内毒素(LPS)、氧自由基等刺激下产生一些列细胞因子和炎症介质,介导肝细胞炎症反应,导致肝脏损伤。本文综述了国内外对于KC在ALD发病机制中的作用研究进展。; 代雪飞吕雄文李俊; 关键词：酒精性肝病库普弗细胞内毒素氧自由基细胞因子

TRAIL及其受体在肝脏疾病中的作用研究进展被引量：3: 2017年; 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是近年来发现的肿瘤坏死因子(TNF)家族成员之一,越来越多的证据表明TRAIL及其受体介导的细胞凋亡在多种肝脏疾病的发生发展中有着重要作用,TRAIL及其受体的发现为肝脏疾病的治疗提供了新的研究方向。; 代雪飞吕雄文; 关键词：TRAIL DR4 DR5 肝脏疾病

TRAIL及其受体在咖啡因抑制肝癌细胞系HepG2增殖中的作用被引量：2: 2010年; 目的探讨TRAIL及其受体在咖啡因(caffeine)抑制肝癌细胞系HepG2增殖中的作用。方法HepG2细胞分别经caffeine、TRAIL及caffeine+TRAIL作用24h,采用MTT法检测HepG2细胞增殖抑制情况,根据中效原理进行联合用药效应评价;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布;Westernblot法检测caffeine作用不同时间HepG2细胞中TRAIL受体相关蛋白的表达。结果在1.25～20mmol.L-1浓度范围内,caffeine明显抑制HepG2细胞增殖;在0.01275～0.2040μmol.L-1浓度范围内,TRAIL可明显抑制HepG2细胞增殖。Caffeine联合TRAIL在多数效应范围内的合用指数小于1,具有协同作用。Caffeine5mmol.L-1和TRAIL0.0510μmol.L-1联合用药组HepG2细胞凋亡率明显高于各单独用药组,且两者联合用药对HepG2细胞周期具有明显的影响,使G0/G1期细胞比例明显增加,S期及G2/M期细胞比例明显减少;caffeine5mmol.L-1作用HepG2细胞24h时,其DR4及DR5的表达量明显增加,而DcR1和DcR2的表达无改变。结论TRAIL在caffeine抑制HepG2细胞增殖过程中具有一定的协同作用,其机制可能与caffeine上调HepG2细胞表面DR4、DR5的表达,联合TRAIL后能够进一步诱导凋亡及调节细胞周期有关。; 吕雄文李俊靳弟代雪飞吴宝明张磊; 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体 HEPG2细胞

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安徽省自然科学基金(070413078)