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拟南芥AtDWD与ABI2相互作用的初步研究被引量：1: 2015年; 本文以RCAR1为诱饵蛋白通过酵母双杂交（Y2H）技术筛选出了DWD基因编码的蛋白，同时在用AB12参与筛选的过程中，同样得到了DwD这个基因．进行了pulldown实验验证它们之间的相互作用，实验结果显示：在体外，RCAR1、RCAR3与DWD之间确实存在相互作用，同时AB12与DWD也存在相互作用．其后对DWD结构的进行分析和实验，发现AB12和DwD的相互作用区域集中在AtDWDC端，大概是145～350位氨基酸之间的WD40结构域里．; 袁德志李德款赵哲杨昊杨毅; 关键词：酵母双杂交 PULL DOWN PP2C

AtMYB44与ABI1竞争性结合ABA受体RCAR1的研究被引量：2: 2015年; 为了进一步确定AtMYB44、ABI1、RCAR1三者之间的关系,本文进行了竞争性pull down和ABI1磷酸酶活性的测定实验,结果表明AtMYB44与ABI1能够竞争性结合RCAR1,并且这种竞争性结合依赖于ABA,AtMYB44能够降低RCAR1对ABI1活性的抑制,这为深入研究ABA信号转导途径奠定了基础.; 赵哲李德款袁德志王晓玉李旭锋

拟南芥AtMYB44与RCAR1相互作用的研究: 2014年; 以拟南芥脱落酸（ABA）受体RCARl和以文为诱饵蛋白质，利用酵母双杂交（Y2H）技术筛选出转录因子AtMYB44，本文进行了pulldown及重转酵母验证，确定它们之间的关系，实验结果显示RCARl与AtMYB44之间确实存在相互作用．此外，为了确定RCARl在AtMYB44上的作用区域，构建了不同长度的AtMYB44cDNA序列的PGADT7载体，利用酵母双杂交实验分析，表明只有AtMYB44的N端54～105氨基酸序列与RCARl存在相互作用．; 陶志文李德款姜欣袁德志杨毅; 关键词：酵母双杂交

两个高度同源的RING结构域蛋白功能初步研究被引量：4: 2013年; 泛素化途径在植物应答生物和非生物胁迫中起着重要作用,其中E3连接酶在泛素化途径中起着决定性作用。室通过在线基因芯片预测发现2个与非生物胁迫相关的拟南芥RING结构域蛋白基因At2g24480(HHR1)、At5g43200(HHR2)通过体外泛素化实验证明了二者具有E3连接酶活性。对这两个E3连接酶进行了亚细胞定位,表达谱和组织特异性分析,发现二者受诱导后的表达情况、组织特异性、亚细胞定位均不同。HHR1定位于细胞膜上,HHR2定位于细胞核;表达谱分析表明HHR1响应热和H2O2胁迫,而HHR2响应盐和H2O2胁迫;HHR1在根和花中的表达量较高,在茎和叶中的表达量较低,而HHR2在根、茎、叶中的表达量都较高,在花中表达量较低。该研究结果证实了HHR1和HHR2的一些性质和亚细胞定位,为深入研究其功能奠定了基础。; 杨虹伟翟先芝刘志斌王健美李旭锋杨毅; 关键词：E3连接酶亚细胞定位表达谱分析组织特异性

青杄PwPSAF基因的克隆与组织表达分析被引量：5: 2013年; PSAF是绿色植物光系统Ⅰ反应中心F亚基,在光合作用电子迁移过程中起着重要作用。以青杄cDNA文库为模板,根据PwPSAF的EST序列设计引物,进行5'-RACE和3'-RACE试验,以获得青杄PwPSAF的末端序列,经过与EST序列进行拼接获取青杄PwPSAF的全长cDNA序列。基于其氨基酸序列,利用Expasy tools、DNAMAN、ClustalX和MEGA等工具,进行理化性质、二级结构和三级结构的生物信息学分析。结果表明:PwPSAF是一个由253 aa组成的蛋白质,理论分子量为27.04 kDa,等电点为9.57,预测蛋白有2个跨膜区域,蛋白质的C端具有保守的结构。RT-qPCR试验显示PwPSAF主要在青杄的针叶中表达。在种子萌发过程中吸胀期(0～ 2天)表达量最高,在4天时表达量降低,随着子叶的不断长出,其表达量又逐渐增高。在干旱和盐胁迫下,针叶中的PwPSAF的表达量被大幅下调。研究结果显示PwPSAF在青杄种子萌发及非生物逆境胁迫下的光合过程中起着重要作用。; 李长江孙帆张通张凌云; 关键词：生物信息学分析胁迫响应

青杄干旱诱导基因PwWDS1的cDNA分离与表达分析被引量：2: 2014年; 植物干旱诱导蛋白是植物体在遭遇干旱胁迫或缺水胁迫时被诱导表达或者表达量被上调的一类蛋白,通过直接作用或者调节其他基因的表达来使植物适应干旱逆境（Desclos et al.,2008;Urao et al.,1994）。这类蛋白在功能上分为2类：其一为功能蛋白,在细胞内直接参与保护作用。; 李长江崔晓燕孙帆张凌云; 关键词：WDS 生物信息学分析胁迫响应

拟南芥AtDWD与RCAR1相互作用的初步研究: 2014年; 采用pull down和酵母共转化的方法研究了AtDWD与RCAR1之间的相互作用。体外pull down试验得出 AtDWD与 RCAR1之间存在明显的相互作用；酵母共转化试验显示AtDWD的截断区域中只有 WD45和 WD345转化子可以在 SD 四缺培养基平板上长出正常的酵母菌落。实验结果表明,AtDWD C端的145~350位氨基酸序列中含有与 RCAR1相互作用的功能域。; 姜欣李德款陶志文袁德志杨毅; 关键词：酵母双杂交

拟南芥中参与盐胁迫应答的基因At1g14260的功能初探被引量：1: 2015年; 拟南芥中未知基因At1g14260的表达受到多种非生物胁迫的诱导,特别是在NaCl的诱导下,At1g14260的表达量明显增加.对T-DNA插入突变体at1g14260(salk-118406)的分析表明,敲除了基因At1g14260的拟南芥相比野生型对盐胁迫更加敏感.此外,构建了融合表达载体PBi221-At1g14260-GFP并且成功转入拟南芥原生质体中,在荧光显微镜下观察到融合蛋白定位于原生质体细胞核中.因此,At1g14260可能参与了拟南芥中盐胁迫的过程.; 杨昊杨凤玺袁德志刘志斌杨毅; 关键词：拟南芥盐胁迫萌发率幼苗生长亚细胞定位

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国家科技重大专项(2011ZX08009-003-002)