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全球变化研究国家重大科学研究计划(2009CB918302): 作品数：18 被引量：52H指数：5; 相关作者：谢鹏牟君李雷雷张亮房亮更多>>; 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学中国人民解放军第二六一医院更多>>; 发文基金：全球变化研究国家重大科学研究计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

国内卒中后抑郁的临床研究现状被引量：10: 2010年; 卒中后抑郁（PSD）是常见的脑血管并发症之一,发生率约为20%～60%,它影响卒中存活者认知和神经功能的恢复,造成卒中后病程迁延,增加卒中患者的死亡率,这一领域正受到医学界越来越多的关注。国内学者对其认识也有了大幅度提高,但这些研究有一定的局限性,很多问题有待进一步探讨,本文对国内卒中后抑郁的研究现状进行了综述。; 栾文慧朱婧雷阳牟君谢鹏; 关键词：血管并发症神经功能病程迁延存活者

卒中后抑郁被引量：7: 2010年; 脑卒中已经成为人类第二大致死和致残的重大疾病,并且其发病年龄逐渐年轻化。而卒中后抑郁（Post-stroke depression,PSD）是脑卒中后常见的并发症,严重影响卒中患者的治疗和预后,增加了患者家庭及社会的负担。; 何丰徐红波胡子成孙后超冯裕星牟君谢鹏; 关键词：脑卒中后重大疾病发病年龄年轻化

病毒性脑炎患者外周血和脑脊液西尼罗病毒E基因的检测: 2010年; 西尼罗病毒（WNV）是单股正链RNA病毒,属于黄病毒科黄病毒属,其传播媒介和储存宿主是蚊虫[1].人感染WNV会出现感冒样症状,部分患者为脑膜脑炎、坏死性脑干炎等神经系统症状.本研究对重庆地区不明病因的78例病毒性脑炎（VE）患者血液和脑脊液进行wNV E基因片段检测.; 何丰冯裕星胡子成徐红波孙后超展群岭雷阳徐鸣明胡永波谢鹏; 关键词：病毒性脑炎西尼罗病毒实时荧光定量PCR

快速色氨酸耗竭实验在抑郁症研究中的应用被引量：5: 2010年; 近年来抑郁症等神经精神疾病引起了国际社会的广泛关注,对其研究也不断深入,大量研究结果显示,抑郁症以及多数精神疾病、情绪障碍均与血清素（5-hydroxytryptamine,5-HT）系统功能失调密切相关。5-HT系统相关实验方法不断涌现,其中快速色氨酸耗竭实验（Acute tryptophan depletion,ATD）是具有重要意义的实验方法,; 王嘉佳刘海朋牟君谢鹏; 关键词：抑郁症色氨酸神经精神疾病国际社会情绪障碍

人miR-134真核表达载体的构建及其鉴定: 2014年; 目的:构建包含外源性miR-134前体的真核表达载体,并使其在人类少突胶质瘤(oligodendroglia,OL)细胞中表达,为进一步研究miR-134的功能及作用靶标提供技术支持。方法:从人类OL细胞基因组DNA扩增miR-134前体,将所得目的片段克隆到pEGFP-N1载体上,重组质粒经测序鉴定后将其转染至人类OL细胞中,荧光倒置显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达情况,并采用荧光定量PCR检测miR-134基因水平的表达。结果:pEGFPmiR-134重组质粒经酶切、PCR鉴定可见目的条带与预期结果一致,经测序可见插入序列正确。将重组质粒转染OL细胞后,荧光定量PCR结果示pEGFP-N1空质粒转染组与空白对照组的miR-134表达水平无统计学差异(P=0.882);pEGFP-miR-134质粒转染组miR-134表达水平是pEGFP-N1空质粒转染组的52倍,两者具有统计学差异(P=0.023)。结论:通过构建真核细胞表达质粒可以高效表达外源性microRNA分子,为后续的研究奠定实验基础。; 王明菊张亮白顺杰杨柳周婵娟房亮谢鹏; 关键词：微小RNA 真核表达载体转染

博尔纳病病毒p24和p40基因星形胶质细胞特异表达重组质粒的构建: 2012年; 目的构建星形胶质细胞特异性表达的博尔纳病病毒磷蛋白和核蛋白基因重组质粒,以供后续实验研究使用。方法用PCR方法扩增BDV p24和p40基因完整序列同时加入Nhe I和EcoR I酶切位点,将所得目的片段克隆至pMD18-T载体,再通过酶切连接将其连接至pCMvie-GFAP质粒中的GFAP启动子的下游,分别得到p24和p40重组质粒。用酶切、PCR以及测序3种方法鉴定重组质粒,并将质粒转染人胶质瘤细胞株(U251),采用免疫细胞化学方法检测目的蛋白表达。结果 pCMvie-GFAP-BDVp24和pCMvie-GFAP-BDVp40重组质粒经酶切、PCR鉴定可见目的条带位置与预期相符,经测序可见插入序列正确,质粒转染U251细胞后,经免疫细胞化学检测到目的蛋白表达。结论成功构建了pCMvie-GFAP-BDVp24和pCMvie-GFAP-BDVp40星形胶质细胞特异性表达质粒,为研究这两种病毒蛋白的致病机制及其对星形胶质细胞的影响提供了工具。; 李文娟张亮邓婧金戈黄荣忠房亮谢鹏; 关键词：博尔纳病病毒核蛋白磷蛋白星形胶质细胞

氟西汀促进卒中后神经功能康复机制的研究进展被引量：4: 2010年; 氟西汀（Fluoxetine）是一种高特异性,高选择性的5-羟色胺（5-HT）再摄取抑制剂（Selective reuptake inhibitors,SS-RIs）,临床上主要用于治疗抑郁性精神障碍。传统抑郁症的＂单胺学说＂认为,抑郁的发生主要与单胺类神经递质如5-HT及去甲肾上腺素（NE）水平低下有关。; 刘霞Djung Lilya Wati李雷雷房亮牟君谢鹏; 关键词：氟西汀康复机制卒中后单胺类神经递质再摄取抑制剂去甲肾上腺素

两种博尔纳病病毒株持续感染PC-12细胞模型的建立被引量：3: 2011年; 目的构建两种博尔纳病病毒株持续感染的PC-12细胞模型,为研究博尔纳病病毒感染致病机制及比较两种病毒株致病特点的差别提供工具。方法将BDV Strain V株和Hu株分别感染PC-12细胞系,并进行传代培养,最后通过Real time FQ RT-PCR、Western blot、间接免疫荧光方法进行病毒核酸和蛋白的检测。结果在培养传代6代后,两种病毒株感染的PC-12细胞均可检测到BDV核酸及蛋白。结论 BDV Strain V株和Hu株均可在PC-12细胞中复制和表达,两种博尔纳病病毒株持续感染PC-12细胞模型构建成功。; 张亮刘霞黄荣忠马丽华金戈徐晓艳邓靖李文娟房亮谢鹏; 关键词：博尔纳病病毒病毒株细胞模型

博尔纳病病毒通过磷蛋白调节miR-134影响人少突胶质瘤细胞的增殖研究: 2015年; 目的:探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)在感染宿主细胞中,miR-134对人少突胶质瘤细胞(oligodendrocyte,OL)增殖水平的影响。方法:应用real-time PCR方法检测正常的OL细胞和BDV感染的OL细胞(OL/BDV)中的miR-134表达水平,同时分别将BDV phosphoprotein(P24),nucleoprotein(P40)蛋白真核表达载体转染OL细胞,检测对miR-134的作用;通过miR-134过表达和BDV感染OL细胞,采用流式细胞仪检测miR-134和BDV对OL细胞增殖的影响。结果:real-time PCR表明miR-134在OL、OL/BDV细胞中的表达出现明显差异(P=0.000),并且BDV中的P24蛋白对miR-134有明显的上调作用(P=0.000),但P40对miR-134没有明显作用(P=0.139);流式细胞仪结果显示miR-134过表达(P=0.016)和BDV感染(P=0.001)均可以抑制OL细胞的增殖能力。结论:BDV感染可通过P24蛋白上调OL细胞中miR-134的表达,进而导致细胞增殖水平下降。; 白顺杰周婵娟王明菊谢鹏; 关键词：博尔纳病病毒 P24

博尔纳病病毒核蛋白调控神经干细胞存活增殖及ERK1/2信号通路的实验研究: 2012年; 目的观察博尔纳病病毒核蛋白(Borna disease virus p40,BDV p40)对大鼠海马源性神经干细胞(Neu-ral stem cells,NSCs)增殖、存活、分化及ERK1/2信号通路的影响,揭示BDV引起神经精神疾病的部分发病机制。方法(1)分别用pEGFP-N1-p40及pEGFP-N1质粒转染NSCs,观察转染效率并鉴定BDV p40在NSCs中的表达。(2)实验设置3组:未转染组、pEGFP-N1空转对照组及pEGFP-N1-p40转染组,用CCK-8试剂盒、BrdU摄入实验及免疫组化分别检测细胞存活、增殖及分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的比例的变化,并经Western Blot检测ERK1/2磷酸化的改变。结果 (1)成功建立表达BDV p40的NSCs模型;PCR结果显示只有pEGFP-N1-p40转染组细胞有BDV p40基因表达。(2)BDV p40抑制NSCs的存活、增殖,但对于转染后贴壁分化14 d时3组细胞分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的比例未见显著差异。Western Blot结果显示BDV p40下调了磷酸化ERK1/2在蛋白水平的表达。结论 BDV p40抑制NSCs的存活、增殖,但是对NSCs的分化方向没有明显的影响。BDV p40有可能通过下调磷酸化ERK1/2活性对NSCs的存活、增殖起抑制作用。; 刘霞DJUNG Lilya Wati黄荣忠张亮王啸杨柳王明菊谢鹏; 关键词：博尔纳病病毒核蛋白存活增殖 ERK1/2

全球变化研究国家重大科学研究计划(2009CB918302)

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