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湖南省教育厅科研基金(09B046)

作品数：6 被引量：8H指数：2
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相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 5篇抗体
  • 4篇噬菌体
  • 4篇噬菌体展示
  • 4篇噬菌体展示技...
  • 4篇菌体
  • 3篇FAB抗体
  • 2篇血清
  • 2篇血清学
  • 2篇血清学检测
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇特异性鉴定
  • 2篇抗体库
  • 1篇蛋白
  • 1篇冻精
  • 1篇多样性
  • 1篇阳性
  • 1篇阳性克隆
  • 1篇荧光
  • 1篇生物素

机构

  • 7篇湖南农业大学

作者

  • 7篇薛立群
  • 7篇王乃东
  • 4篇袁安文
  • 3篇邓治邦
  • 2篇屠迪
  • 2篇杨大为
  • 2篇许道军
  • 1篇杨青
  • 1篇蒋静思
  • 1篇张莉
  • 1篇郭洪香
  • 1篇何浪
  • 1篇马君
  • 1篇谭庆辉
  • 1篇夏南松
  • 1篇张思哲

传媒

  • 1篇生物技术通报
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇中国农学通报
  • 1篇中国实验动物...
  • 1篇中国畜牧兽医
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2012
  • 3篇2011
  • 2篇2010
共 6 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
DM-Fab抗体的特异性鉴定
目的雄性特异性抗原(H-Y抗原)是引起同种雌性动物免疫排斥反应的雄性特有物质的总称,并广泛存在于哺乳动物及其他脊椎动物。H-Y抗原的分子基础的研究将有助于雄性胎儿-母体免疫耐受和异性间组织移植免疫排斥机理等研究,并提供理...
王乃东袁安文邓治邦杨青屠迪杨大为薛立群
文献传递
血清学检测的雄性特异性抗原Fab抗体的特异性鉴定
2011年
旨在研究血清学检测的雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体的特异性。以从噬菌体Fab抗体库中筛选到具有较高雄性特异性结合活性的重组噬菌体克隆为基础,构建Fab抗体的可溶性表达噬质粒,并诱导和纯化该抗体片段,利用免疫荧光FITC/DAPI共染技术和ELISA分析其特异性。结果表明,该抗体在约49 ku处有条带出现。在Fab抗体和H-Y抗血清的细胞免疫荧光比较分析试验中发现,从雌、雄鼠脾细胞的阳性细胞数量和平均荧光强度的角度分析,Fab抗体的雄性特异性强于抗血清。石蜡切片免疫荧光定量分析显示,Fab抗体与雄鼠肝脏的结合活性明显高于对应雌鼠,差异极显著(t=20.73,P=0.002 3<0.01),而H-Y抗血清与雄鼠肝脏的结合活性略高于对应雌鼠,差异显著(t=7.11,P=0.019 2<0.05)。以C57BL/6雄鼠脾细胞、睾丸细胞作为抗原的ELISA分析显示,Fab抗体具有雄性特异性,但Fab抗体的OD值低于抗血清。结果提示,Fab抗体的雄性特异性高于H-Y抗血清,但其雄性特异性结合活性低于H-Y抗血清,Fab抗体在具备雄性特异性的同时,仍有少量雌性非特异性结合,Fab抗体的体外亲和力成熟可作为后续研究工作,以获得高亲和力、高雄性特异性的可溶性Fab抗体分子。
王乃东袁安文邓治邦屠迪许道军夏南松杨大为薛立群
关键词：噬菌体展示技术抗体库免疫荧光
H-Y抗原候选基因的研究进展被引量：4
2011年
雄性特异性组织相容性抗原(male specific minor histompatibility antigens,H-Y抗原)是由Y染色体上的基因编码,在雄性动物细胞中普遍表达(包括胚胎和滋养层细胞)。H-Y抗原不仅能引起基因型相同的雌性动物排斥雄性组织,也能导致人白细胞抗原匹配干细胞移植术后出现移植抗宿主性疾病(GVH)。细胞毒性T淋巴细胞检测到几个不同的H-Y抗原表位,这些肽是从胞内蛋白分离出来,由主要组织相容性复合分子结合呈递在细胞表面。H-Y抗原肽与人白细胞抗原Ⅰ类和Ⅱ类分子特异结合参与免疫反应,从而影响移植结果。近年来越来越多的文献报道了H-Y抗原的相关研究,作者主要综述编码H-Y抗原的相关候选基因,并对它在疾病等方面的前景作出了一些展望。
谭庆辉王乃东薛立群
关键词：候选基因抗原肽
Touchdown PCR扩增多样性小鼠Fab抗体基因被引量：2
2010年
为了扩增多样性Fab抗体基因产物,保证噬菌体抗体库的足够库容。分离C57BL/6鼠的脾脏,并制备脾细胞悬液,提取其总RNA,逆转录为cDNA,利用普通PCR和Touch down(TD)PCR扩增鼠Fab基因产物,通过琼脂糖凝胶电泳验证PCR产物,比较分析2种方法的扩增效果。结果显示:轻链和重链Fd基因的PCR产物大小约为680bp,与理论值相符。电泳结果显示,TD-PCR获得8个重链Fd基因和6个轻链基因条带,普通PCR获得7个重链Fd基因和5个轻链基因条带。在普通PCR产物中,轻链基因引物VkB未能扩增出相应基因,而TD-PCR扩增出该基因。TD-PCR扩增出引物ⅢA和ⅢC的对应基因,而普通PCR却未见对应结果,普通PCR扩增出ⅢB引物的对应基因,TD-PCR未见对应结果。比较分析认为,TD-PCR可以增加抗体基因多样性,有潜力成为保证噬菌体Fab抗体库库容的途径,为Fab抗体基因的扩增及相关研究提供实验参考。
王乃东何浪薛立群
关键词：小鼠噬菌体展示技术抗体库
生物素标记奶牛冷冻精子膜蛋白的提取、纯化与初步鉴定
2014年
本文通过利用膜不透性的生物素试剂Sulfo-NHS-SS-Biotin原位标记完整的奶牛精子细胞表面蛋白质,通过验证生物素与精子细胞表面的特异性结合,然后裂解细胞,用中性亲和素琼脂糖树脂纯化生物素化的蛋白质。最后用TCA浓缩膜蛋白。实验结果表明生物素特异的与精子细胞表面膜蛋白结合,通过中性亲和素琼脂糖树脂纯化出来的膜蛋白浓度较低,通过TCA蛋白浓缩后,膜蛋白浓度有了明显提升。建立了奶牛精子膜蛋白的生物素标记验证体系,通过提取、亲和纯化、TCA浓缩等步骤成功的得到了较高浓度的奶牛精子膜蛋白。
张思哲郭洪香蒋静思张莉薛立群王乃东
关键词：奶牛精子膜蛋白
链替换技术提高噬菌体抗体亲和力的研究进展
2010年
高亲和力抗体基因的克隆是噬菌体抗体在基础研究、临床诊断治疗研究等重要领域中应用的基础。链替换技术已逐步广泛用于噬菌体抗体的性能改造。该技术不仅可以促进噬菌体的体外亲和力成熟,提高抗体亲和力,有助于低剂量抗体达到实际应用所需要的抗原结合效应,拓宽抗体的应用开发前景,而且可应用于减少抗体人抗鼠抗体反应,分析重链或轻链基因对抗原抗体结合的影响,有助于较好的理解免疫化学。就链替换的原理、策略及其应用进行综述。
王乃东袁安文薛立群
关键词：噬菌体展示技术
血清学检测H-Y噬菌体Fab抗体阳性克隆的分析被引量：2
2011年
目的为分析H-Y噬菌体Fab抗体特异性,筛选用于抗体亲和力提高的H-Y噬菌体Fab抗体阳性克隆。方法以从噬菌体Fab抗体库中筛选到具有雄性特异性结合活性的阳性克隆A6、A8、E6为基础,通过C57BL/6鼠脾细胞为抗原的ELISA分析3株阳性克隆的特异性,镜下观察亲和力较好的A8阳性克隆ELISA结果,利用生物信息学方法预测分析该克隆的抗体基因可变区序列和结构。结果 ELISA分析显示3株阳性克隆具有雄性特异性,其中A8阳性克隆具备较好的雄性特异性。A8克隆具有免疫球蛋白轻链和重链可变区结构,其重链、轻链可变区分别属于VH I和VκIV基因家族。结论 A8阳性克隆可用于后续的导向筛选和抗体基因改造等研究工作。
王乃东袁安文邓治邦许道军马君薛立群
关键词：噬菌体展示技术
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