国家高技术研究发展计划(2001AA243011)
- 作品数：9 被引量：32H指数：3
- 相关作者：王栋朱化彬郝海生程金华杨波更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究被引量：3
- 2006年
- 研究了切割取样后小鼠胚胎和牛胚胎冷冻-解冻的技术方法。结果表明:(1)分别以10%甘油、10%乙二醇作为冷冻液以及在以上两种冷冻液中分别添加10%葡聚糖+0.1 mol/L蔗糖作为冷冻液常规方法冷冻切割后的小鼠胚胎,冷冻-解冻后体外培养72 h总发育率分别为56.9%(259/455)、81.8%(604/738)、84.8%(540/637)和59.5%(308/518)。(2)取样后胚胎体外短暂培养(0~4 h)并不能提高切割取样后小鼠胚胎冷冻-解冻体外培养发育率。(3)切割取样小鼠胚胎在25%甘油+0.25 mol/L蔗糖+20%的血清为冷冻液,在-100^-110℃左右熏蒸2 min快速冷冻后体外培养发育率为73.3%(33/45),切割取样牛胚胎快速冷冻-解冻移植妊娠率为57.1%(4/7)。
- 程金华朱化彬王栋郝海生
- 关键词：小鼠胚胎冷冻保存
- 不同物种Y染色体特异基因产物的研究
- 2005年
- 根据牛Y染色体3个特异基因设计3对引物,分别对牛、牦牛、绵羊、山羊、猪、小鼠基因组进行PCR扩增。3对引物在牛和牦牛基因组中都得到了扩增产物,在绵羊的扩增中只检测到了1个性别决定基因的扩增产物,在其他物种中均没有检测到扩增产物。将其扩增产物进行克隆测序,并采用DNAMAN软件对测定序列进行比对分析,结果表明:3对引物的扩增结果在牦牛和牛的同源性分别达到了99%以上,性别决定基因的扩增产物在绵羊和牛间的同源性达到了94%。
- 朱化彬王栋程金华郝海生杨波王振玲刘永华
- 关键词：PCRY染色体
- 冷冻保护剂和胎牛血清对牛成纤维细胞冷冻效果的影响被引量：8
- 2006年
- 以甘油与DMSO为冷冻保护剂,添加5%-20%胎牛血清的DMEM为基础冻存液,对鲁西黄牛皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,结果表明:①同浓度DMSO为冷冻保护剂效果优于同浓度的甘油(P<0.05),但添加50%血清时并不明显(P>0.05),可能与较高血清浓度有关,血清对冻存细胞的影响高于冷冻保护剂的作用。②血清浓度一定时,DMSO和甘油浓度在10%-15%时,冻存效果较好。③当甘油与DMSO浓度一定时,血清浓度越高冷冻保存效果越好。④甘油与DMSO浓度一定时(DMSO浓度5%除外),添加10%和20%血清效果无差异(P>0.05)。因此,在实际应用中,考虑成本等因素,血清浓度达到10%时就已经能达到一般试验要求。
- 程金华朱化彬孙秀柱王栋郝海生
- 关键词：畜牧学细胞培养胎牛血清鲁西黄牛
- 家畜高繁殖力性状遗传机制的研究进展被引量：6
- 2005年
- 家畜繁殖力是一个对畜牧生产有重要影响的数量性状,文章从基因组和mRNA表达两个水平综述了家畜高繁殖力性状遗传机理的研究进展。这些研究成果表明,家畜高繁殖力受许多基因影响,而该性状的形成是多个基因共同表达与相互作用的一个综合结果。两种水平的研究都取得了很大的进展,但同基因组水平的研究相比,mRNA表达水平的研究仅关注在某一时期某一组织表达的基因,从mRNA表达水平进行研究能够找到对性状形成有直接贡献的基因。现在的研究多采用基因组水平和mRNA表达水平,随着科学技术研究的发展,还会为这一性状提供新的研究方法,但将来更有效的研究方法可能是多个水平综合进行的。
- 王栋朱化彬程金华冯金梅郝海生
- 关键词：高繁殖力基因组MRNA
- 切割取样对胚胎发育的影响被引量：2
- 2006年
- 体视显微镜下,采用徒手持金属刀片和自制的玻璃切割针分别对小鼠和牛胚胎进行切割取样,并对取样后的胚胎进行体外培养48h,其发育率分别为76.7%(46/60)和80%(16/20),两者差异不显著(P>0.05);奶牛新鲜胚胎切割取样后,胚胎移植妊娠率47.1%(8/17),比对照组妊娠率59.0%(23/39)差异显著(P<0.05)。冷冻-解冻胚胎切割取样后移植妊娠率42.9%(6/17)虽然也比对照组50%低,但是差异不显著(P>0.05)。
- 程金华王栋朱化彬郝海生
- 关键词：畜牧学牛胚胎小鼠
- 牦牛Y染色体PCR扩增产物的克隆和测序
- 本试验采用牛的一对 Y 染色体特异引物对牦牛基因组进行 PCR 扩增,检测到了牦牛公牛的一条特异性产物,经过克隆测序,得到一条长141bp 的核苷酸序列,采用 BLASTN 软件在 GenBank 中比对,没有发现与其相...
- 王栋杨波朱化彬郝海生易建红高福才罗应荣
- 关键词：PCR牦牛
- 文献传递
- 牛基因组DNA两种提取方法的比较研究被引量：9
- 2006年
- 研究哺乳动物基因组DNA的水煮抽提法,并将传统的酚仿抽提法和水煮法进行比较,水煮法即通过对细胞的煮沸和冷却,使细胞破裂、蛋白变性,从而获得用于PCR扩增的模板DNA的方法。通过电泳分析和PCR扩增检测了所提取基因组DNA的完整性、可行性。检测时采用3对引物对2种方法提取的DNA进行了PCR扩增,同时对冷冻保存的基因组DNA也进行了扩增检测。结果表明:水煮法提取基因组DNA是一种快速、简便、经济、高效的方法。
- 程金华朱化彬王栋郝海生杨波
- 关键词：基因组DNA
- QTL基因型值对标记辅助导入的影响被引量：2
- 2006年
- 在标记辅助导入QTL的过程中,利用指数法进行背景选择。研究结果表明基因型值的大小对于导入QTL的频率和两个背景QTL的频率以及受体遗传背景的恢复影响很小,对于两个背景性状来说,基因型值较大时要比较小时获得更大的遗传进展。对于前景性状来说,在横交阶段,基因型值较大时要比较小时获得更大的遗传进展;而在回交阶段,结果正好相反。
- 白俊艳张勤丁向东王春考贾小平王志鹏殷宗俊
- 关键词：标记辅助导入
- 家畜抗性等级性状的QTL定位方法(英文)被引量：1
- 2005年
- 在广义线性模型的框架内模拟研究了家畜抗性等级性状的QTL定位方法,QTL参数的估计采用最大似然方法,比较了阈模型方法与一般线性方法的QTL定位效率,并对影响等级性状QTL定位效率的主要因素(QTL效应、性状的遗传力)进行了模拟研究,实验设计为多个家系的女儿设计,资源群体大小为500头。研究结果表明:在QTL位置参数估计及检验功效方面,阈模型方法具有一定的优势,对抗性等级性状QTL定位的功效也高于线性方法。另外,性状遗传力和QTL效应的大小对QTL定位的准确度也有直接的影响,随着性状遗传力QTL效应的增大,两种方法QTL定位的效率均有不同程度的提高。
- 殷宗俊张勤张纪刚丁向东
- 关键词：QTL定位最大似然法
- 牦牛Y染色体PCR扩增产物的克隆和测序被引量：2
- 2007年
- 本试验采用牛的一对Y染色体特异引物对牦牛基因组进行PCR扩增,检测到了牦牛公牛的一条特异性产物,经过克隆测序,得到一条长141bp的核苷酸序列,采用BLASTN软件在GenBank中比对,没有发现与其相似的同源序列。该序列与本试验室所测得牛同一引物扩增产物的序列同源性为100%。
- 王栋杨波朱化彬郝海生易建红高福才罗应荣
- 关键词：PCR牦牛Y染色体
