国家自然科学基金(30870589)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 相关作者：李莹辉戴钟铨吴峰郭飞马商澎更多>>
- 相关机构：中国航天员科研训练中心西北工业大学中北大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
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- 失重对IGF-Ⅰ及整合素信号通路影响的研究进展被引量：1
- 2011年
- 胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)是属于胰岛素家族的一类多肽。整合素是一类普遍存在于细胞表面的跨膜糖蛋白,参与细胞与细胞、细胞与细胞外基质的相互作用。研究证实整合素在IGF-Ⅰ信号通路中具有重要作用。重力影响IGF-Ⅰ信号级联和整合素的表达,但详细机制还不是很清楚。重力与整合素、IGF-Ⅰ关系十分密切。在不同的重力条件下,它们的关系正在成为重点和热门的研究对象。本文就IGF-Ⅰ的信号通路、整合素信号通路以及失重对整合素以及IGF-Ⅰ信号通路的影响进行综述。
- 郭飞马戴钟铨吴峰商澎李莹辉
- 关键词：失重整合素信号通路
- 用荧光强度反映Cbfa1活性成骨细胞模型的构建被引量：1
- 2010年
- 目的构建稳定表达由6OSE2启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的MG63细胞株,并筛选出能反映Cbfa1活性的细胞株。方法合成6OSE2启动子的序列,并将其构建到T载体中;然后通过双酶切得到启动子片段;与去除CMV启动子的报告基因载体pEGFP-N1的酶切片段连接,构建真核表达载体;并转染到MG63细胞系,经G418筛选得到了稳定转染6OSE2-EGFP基因的MG63细胞株。用不同浓度的IGF-I和VD3处理,通过EGFP荧光强度分析,ALP活性测定,筛选出能够响应IGF-I和VD3的细胞株。结果构建了pUC-6OSE2扩增载体和p6OSE2-EGFP真核表达载体,通过稳定转染以及IGF-I、VD3筛选获得一株荧光强度随IGF-I和VD3处理而增强的细胞株-OSE-MG63。结论构建了能反应Cbfa1活性的成骨细胞模型,为进一步研究微重力对Cbfa1的转录活性及信号传导途径的影响奠定了基础。
- 仝飞飞戴钟铨郭飞马丁柏谭映军吕金印李莹辉
- 关键词：成骨细胞MG63基因表达荧光强度
- 尾吊影响大鼠比目鱼肌Dystrophin表达分布以及血清乳酸脱氢酶活性被引量：1
- 2012年
- 背景:抗肌萎缩蛋白Dystrophin在肌肉运动性损伤时易发生改变。目的:观察模拟失重效应对大鼠比目鱼肌抗肌萎缩蛋白Dystrophin表达、分布及血清乳酸脱氢酶活性的影响。方法:采用大鼠后肢尾吊模拟失重效应模型,分别在尾吊1,4,7,10,14d分离SD大鼠比目鱼肌并提取血清进行检测。结果与结论:随着尾吊时间的延长,大鼠肌纤维横截面积减小;肌膜上Dystrophin呈现弥散性分布的趋势,甚至出现Dystrophin断裂现象;Dystrophin mRNA表达下降。同时尾吊7d,大鼠血清乳酸脱氢酶活性升高。提示失重引起的肌萎缩,伴随着Dystrophin mRNA的表达下降和蛋白分布弥散性变化,而乳酸脱氢酶活性变化提示失重性肌萎缩可能与肌损伤的发生有关。
- 马乐萍戴钟铨吴峰王红晖曹宏卿万玉民刘鸿宇李莹辉
- 关键词：肌萎缩比目鱼肌DYSTROPHIN
- 反映成骨细胞特异转录因子Runx2活性的细胞模型构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建稳定表达由6OSE2启动子驱动的萤火虫荧光素酶的小鼠C2C12成肌细胞,并筛选出能定量反映Runx2活性的细胞株。方法双酶切pUC57-6OSE2,获得启动子片段;插入到消化后的pGL4.14,构建真核表达载体;随后将其转染到C2C12细胞中;用潮霉素B筛选获得稳定转染的细胞株C2C12-6OSE2-Luc。将Runx2瞬时转染到该细胞株中,鉴定其对Runx2的响应性。利用不同浓度的IGF-I和BMP2处理,通过Luc报告基因的活性增高,筛选出能够响应BMP2的细胞株。结果构建了p6OSE2-Luc表达载体,利用p6OSE2瞬时转染C2C12-Runx2细胞的相对荧光素酶活性是同样处置后的C2C12细胞的4倍。通过筛选获得C2C12-6OSE2-Luc细胞株。转染Runx2质粒后细胞的相对荧光素酶活性是转染空载体细胞的7倍。利用荧光素酶活性筛选出一株报告基因活性随BMP2处理增强的细胞株。结论构建了能定量反映成骨细胞Runx2活性的细胞模型,可以用于进一步Runx2的转录活性及信号传导途径的研究中。
- 郭飞马戴钟铨吴峰商澎李莹辉
- 关键词：RUNX2
- 骨特异性转录因子Runx2对抗空间骨丢失效应的初步研究被引量：3
- 2011年
- 为了构建稳定过表达Runx2(骨特异性转录因子)的C2C12(小鼠成肌细胞)和MG63(前成骨细胞)细胞株,并用于研究Runx2在对抗空间骨丢失效应中的作用.利用实时定量聚合酶链式反应鉴定Runx2下游基因I型胶原、碱性磷酸酶表达情况,在二维回转器中培养稳定细胞株,通过定量聚合酶链式反应,观察在模拟失重效应下Runx2基因对其下游基因表达的影响.结果表明,通过筛选获得稳定转染的C2C12-Runx2和MG63-Runx2细胞株,经鉴定都能过表达Runx2.转染后的细胞I型胶原和碱性磷酸酶mRNA表达增高.回转组与对照组相比,MG63,C2C12-Runx2,MG63-Runx2细胞的I型胶原和碱性磷酸酶mRNA表达降低,但在模拟失重效应下,转染细胞中I型胶原和碱性磷酸酶的mRNA表达下降程度明显低于末转染细胞株.所构建的C2C12-Runx2和MG63-Runx2细胞株比较稳定,并证实Runx2能部分对抗失重引起的成骨特异性分子的降低.
- 郭飞马戴钟铨吴峰商澎李莹辉
- 关键词：模拟失重核心结合因子
