国家自然科学基金(30500366)
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
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- 牛肌肉生成抑制素基因功能区的克隆与原核表达被引量：3
- 2006年
- 根据GenBank中牛肌肉生成抑制素(MSTN)基因序列设计了1对引物,在引物两端分别加EcoR I和Xho I识别位点。利用RT-PCR技术扩增出了牛MSTN功能区序列。分别构建克隆和原核表达载体,酶切、PCR鉴定及测序分析表明,该基因功能区序列的克隆载体和原核表达载体已成功构建。筛选阳性菌,经IPTG诱导,牛MSTN基因功能区在大肠埃希氏菌中成功表达。
- 吕文发袁天祥孔振兴
- 关键词：原核表达
- 成年荷斯坦奶牛超数排卵效果的比较研究被引量：3
- 2007年
- 以常用的超数排卵药物FSH(促卵泡素)和荷斯坦奶牛为研究对象,比较不同来源产品对中国荷斯坦成年奶牛超数排卵效果的影响。将90头成年奶牛随机分成2组(每组45头),分别用国产的FSH(组1)和由加拿大生产的FSH(组2),对2组中国荷斯坦奶牛进行超数排卵处理。结果表明:第1组实验牛超排后直肠检查平均黄体数和可用胚胎的数量分别为9.67个和6.1个;而第2组的平均黄体数和可用胚胎数量分别是11.8个和8.1个,差异显著(P<0.05);而2组平均获得胚胎的数量分别是7.8个和9.8个,差异不显著(P>0.05)。
- 吕文发刘增新王军王恒
- 关键词：FSH超数排卵荷斯坦奶牛
- 牛肌肉生成抑制素基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 将构建的牛pMD 18-T-MSTN克隆载体与真核表达载体pef-dhfr1a酶切,回收牛MSTN目的片段及pef-dhfr1a载体,构建了牛MSTN基因的真核表达质粒pef-dhfr1a-MSTN,然后转染COS-7细胞,将牛MSTN成熟蛋白编码序列在COS-7细胞中进行了表达。提取转染细胞的总RNA,采用RT-PCR和Western-blotting方法,分别从mRNA水平和蛋白质水平上检测到了牛MSTN基因在COS-7细胞中的表达产物,证明已经成功构建出该基因的真核表达载体。
- 吕文发赵静姚淑珍王军
- 关键词：真核表达COS-7细胞
- 西门塔尔牛肌肉生成抑制素基因编码序列的克隆与序列分析被引量：3
- 2006年
- 本研究根据Genbank中牛肌肉生成抑制素基因序列设计引物,在设计的引物两端分别加上限制性内切酶BamHI和EcoRI的识别位点序列。利用RT-PCR技术从西门塔尔牛肌肉组织的总RNA中扩增出MSTN基因的CDNA序列,扩增出1 125 bp片段,该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109感受态细胞,所得阳性克隆进行酶切和PCR鉴定,并进行了测序分析,得到的克隆序列与设计的序列基本一致,表明成功地克隆了西门塔尔牛的肌肉生成抑制素基因的蛋白编码序列。
- 吕文发赵静袁天祥
- 关键词：肌肉生成抑制素克隆
