黑龙江省自然科学基金(C0014)
- 作品数：18 被引量：41H指数：4
- 相关作者：于丽杰李然红高金秋及晓宇陶雷更多>>
- 相关机构：哈尔滨师范大学白城师范学院牡丹江师范学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划哈尔滨市学科后备带头人基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 影响胡萝卜体细胞胚建成关键因素的研究进展被引量：1
- 2008年
- 利用体细胞胚对胡萝卜进行离体再生,具有数量多、速度快、成苗率高、染色体稳定等优点。影响胡萝卜体细胞胚发生的因素很多,主要集中于基因型、外植体、激素配比、基本培养基等方面。对影响胡萝卜体细胞胚建成关键因素进行综述,以为提高胡萝卜体细胞胚的诱导频率、建立高效的胡萝卜离体再生体系和以胡萝卜为受体的植物遗传转化体系提供参考。
- 刘佳娜于丽杰李婉婷
- 关键词：胡萝卜体细胞胚离体再生
- 转IL-4基因大白菜后代的分子检测及遗传分析被引量：1
- 2013年
- 采用PPT抗性筛选、PCR扩增、PCR-Southern杂交、ELISA、Western杂交等方法,对花粉管通道法介导IL-4基因转化大白菜的后代进行了分子生物学检测,同时结合统计分析手段研究了IL-4基因在转基因大白菜后代中的遗传规律。结果表明:(1)PPT抗性的转基因大白菜,T4代植株PPT抗性的阳性率为33.43%,IL-4基因PCR扩增的阳性率为1.39%。IL-4的分离情况不符合孟德尔分离定律。(2)对T4代5个株系的14个PCR阳性株进行ELISA检测,其中有7份样品为阳性,IL-4表达量约为326.87～1233.13 ng/g FW,同一株系内各株间IL-4的表达量差异显著。(3)Western杂交进一步证实IL-4在转基因大白菜后代中能正常表达。PCR-southern杂交表明IL-4基因已整合到大白菜基因组中,且在转基因后代植株中仍然存在。
- 金晓霞高亚于丽杰
- 关键词：花粉管通道法大白菜
- 细胞转化获得转白细胞介素-4基因胡萝卜(Daucus carrot)
- 2013年
- 本研究以胡萝卜‘开拓者’无菌苗胚轴诱导的愈伤组织经振荡培养获得悬浮培养细胞为受体材料,以卡那霉素抗性基因为选择标记基因,对农杆菌介导的胡萝卜细胞遗传转化体系进行了优化。结果表明：悬浮细胞预培养1-3d,胡萝卜细胞与农杆菌细胞比例为1：10或1：100,共培养时间为1-3d时,转化效率较高;但以悬浮细胞预培养1d,胡萝卜细胞与农杆菌细胞比例为1：10,共培养时间为1d时,可得到较多的转化苗。共获得抗性苗290株,经PCR检测66株扩增出特异性条带;部分阳性植株经PCR-Southern检测,初步证明目的基因已转入到胡萝卜中,并收获了转基因胡萝卜。
- 高金秋于丽杰陶雷
- 关键词：胡萝卜细胞转化
- 植物生物反应器生产口服疫苗的研究进展被引量：4
- 2009年
- 随着基因工程技术的快速发展、植物转基因技术的日趋成熟,植物已成为基因重组生物制品的重要表达载体。利用转基因技术构建植物生物反应器生产口服疫苗是目前新兴的研究领域。综述了亚单位抗原在转基因植物中的表达系统、转基因植物生产的重组疫苗、转基因植物疫苗存在的问题及解决方法等,并展望了其研究趋势和应用前景。
- 及晓宇于丽杰
- 关键词：植物生物反应器口服疫苗转基因植物
- 转il-4基因甘蓝后代的遗传及表现分析
- 2012年
- 利用农杆菌介导法将il-4基因转入甘蓝品种"中甘11",用已转化得到的T3、T4代甘蓝品种为试验材料,通过PCR扩增、PCR-Southern杂交、蛋白质浓度测定和ELISA技术,对il-4基因转化甘蓝的后代进行了检测,并对il-4基因在T3、T4代甘蓝中的传递规律以及后代甘蓝植株的田间表现进行了调查。结果表明:T3、T4代转il-4基因甘蓝阳性植株数较少,甘蓝中il-4基因出现性状分离。同时,田间调查表明,相对于对照组(非转基因)植株,转il-4基因阳性植株的田间抗病性下降,植株高度降低,结实率降低,单株结籽数减少,生长势等农艺性状降低。
- 张玮滢于丽杰
- 关键词：甘蓝白细胞介素-4分子检测
- 甘蓝组织培养中防止外植体褐化的研究被引量：3
- 2009年
- 以中甘11号为试验材料,探讨基本培养基(MS、1/2MS)、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、Vc(抗坏血酸)、硝酸银、母株预处理对褐化防止的有效性。结果表明:基本培养基为以1/2MS时,外植体褐化减轻,与MS培养基比差异显著。抗氧化试剂抑制褐化的作用明显,PVP对褐化的抑制作用与对照比差异显著。外植体采取前对母株进行遮光处理有利于抑制褐化,且效果明显。
- 李然红于丽杰李晓东
- 关键词：甘蓝褐化
- 根癌农杆菌介导白细胞介素-4基因转化甘蓝(Brassica oleracea L.)研究被引量：3
- 2007年
- 利用根癌农杆菌介导法，以白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）基因转化中甘11号甘蓝。本研究对可能影响il-4转化率的外植体类型、外植体的预培养时间、农杆菌的侵染时间以及外植体与农杆菌的共培养时间进行了优化。试验结果表明：il-4基因对带1-2mm子叶柄的子叶的转化率显著高于下胚轴；带柄子叶在预培养1d、侵染3min、共培养1d时，转化效果最好，转化率达23．3%;下胚轴在预培养1-3d，侵染3～5min，共培养1-2d时，转化效果较好，转化率最高可达13．3％。经PCR检测及PCR-Southem杂交，初步证明目的基因il-4已经转入甘蓝的再生植株。转il-4基因甘蓝的PCR阳性再生植株已经开花并产生了后代。
- 李然红于丽杰陶雷王雷
- 关键词：OLERACEA根癌农杆菌介导
- 甘蓝(Brassica oleracea L.)叶片蛋白提取方法的比较被引量：3
- 2009年
- 分别用直接提取法、丙酮沉淀法和丙酮三氯乙酸结合沉淀法提取甘蓝叶片蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明,丙酮沉淀法较适合甘蓝叶片蛋白质的提取.本文对影响SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的关键步骤进行了探讨,对凝胶的不同染色方法进行了比较,确立了一套适用于甘蓝叶片蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、染色以及脱色的方法.采用改良后的丙酮沉淀法提取的甘蓝叶片蛋白SDS-PAGE电泳结果显示,其条带清晰,数量多,分辨率高.
- 李然红于丽杰王晶晶李晓东
- 关键词：甘蓝蛋白提取SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 胡萝卜体细胞胚再生系统的建立被引量：10
- 2009年
- 选用胡萝卜栽培品种“开拓者”和“长城红明”无菌苗的子叶和下胚轴作外植体，对可能影响胡萝卜体细胞胚分化率的基本培养基、激素配比进行了研究。结果表明：开拓者对B5培养基表现适应，长城红明对B5和MS培养基均表现适应。下胚轴外植体诱导体细胞胚的分化能力极显著地高于子叶。低浓度的2，4-D（0．1～0．7mg／L）对体细胞胚的分化有促进作用，6-BA对体细胞胚分化有抑制作用。诱导开拓者下胚轴分化体细胞胚的优化培养基为B5＋2，4-D0．1mg／L，分化率达85％。诱导长城红玥下胚轴分化体细胞胚优化培养基为MS＋2，4-D0．7mg／L，分化率达73．3％。2个品种的下胚轴在各自的优化培养基上分化体细胞胚的能力差异不显著。
- 高金秋于丽杰
- 关键词：胡萝卜体细胞胚
- 转il-4基因番茄及其杂交F_1代的筛选与表现型分析
- 2011年
- 为完善转il-4基因番茄的筛选及鉴定工作,本实验比较了il-4基因在PPT抗性筛选与非PPT抗性筛选植株中的阳性率,对il-4基因在T6代及杂交F1代番茄中的传递规律和植株表现型进行调查。本文对L402、‘中疏4号’、‘大黄’三个品种的T6代及杂交F1代植株进行PPT抗性筛选及非PPT抗性筛选,特异性的PCR扩增、PCR-Southern杂交。研究结果表明,il-4基因在非PPT抗性筛选植株中的阳性率高于PPT筛选植株,T6代及F1代植株中il-4基因的分离情况不符合孟德尔分离规律,其分离情况远远低于3:1的分离比率。转il-4基因番茄与非转基因植株(对照)相比发现,转基因植株在一至多个性状上发生了不同程度的变异,杂交F1代与亲本T6代植株相比,杂交F1代有少数组合存在杂种优势。
- 彭洪雨张鹏张鹏及晓宇
- 关键词：番茄白细胞介素4表型分析
