浙江省自然科学基金(399409)
- 作品数：12 被引量：128H指数：7
- 相关作者：李卫芬孙建义许梓荣顾赛红吕文平更多>>
- 相关机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 木聚糖酶的特性研究被引量：36
- 2001年
- 对里氏木霉 GXC菌株所产的木聚糖酶特性作了研究 .结果表明 :该酶的最适温度为 55℃ ,最适 p H5.3.p H稳定范围较广 ,热稳定性在 4 0℃以下 .酶的最大反应速度为 52 6μmol/ ( min.mg) ,米氏常数为 3.4 2 mg/ m L.Cu2 +,Zn2 +,Fe2 +和 Fe3+对酶有抑制作用 ,而 Co2 +和 Mn2
- 李卫芬孙建义
- 关键词：饲料添加剂木聚糖酶木霉
- Aspergillus niger FS6中β-1,3-1,4-葡聚糖酶cDNA片段的克隆及序列测定被引量：1
- 2001年
- 通过 RT- PCR方法首次从真菌 Aspergillus niger FS6中扩增和克隆到 β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶 c DNA片段 .序列测定表明 :该片段全长 2 80 bp.经 Clustal W软件进行同源性分析后表明 ,该序列与枯草芽孢杆菌、水解淀粉芽孢杆菌、厌氧真菌、牛链球菌和热纤维梭菌中 β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶基因同源性很高 ,分别为 91% ,90 % ,70 % ,6 7% ,6 5 %
- 李卫芬孙建义许梓荣廖玉华
- 关键词：ASPERGILLUSNIGERΒ-1,3-1,4-葡聚糖酶CDNA片段
- 黑曲霉木聚糖酶和β-葡聚糖酶cDNA片段克隆和序列分析被引量：7
- 2001年
- 孙建义李卫芬顾赛红许梓荣
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶Β-葡聚糖酶CDNA片段克隆造纸工业
- 浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)β-1,3-1,4-葡聚糖酶特性及其基因克隆被引量：2
- 2004年
- 对浸麻芽孢杆菌 (Bacillusmacerans)所产的β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶特性进行了分析。结果表明 :该酶的最适温度为5 5℃ ,在 6 0℃以下酶相对稳定。通过 PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长 DNA序列 ,长度为 734bp,其中开放阅读框架长 717bp,编码 2 37个氨基酸。经 Blast分析 ,该序列与已登录的浸麻芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌 (B.polymyxa)的同源性较高 ,分别为 99%和 82 %。
- 李卫芬孙建义许梓荣吕文平
- 关键词：Β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆温度
- 多粘芽孢杆菌β-葡聚糖酶特性及其基因克隆被引量：12
- 2004年
- 对多粘芽孢杆菌所产的β-葡聚糖酶特性进行了分析.结果表明:该酶的最适温度为50℃,在60℃以下酶相对稳定.通过PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长DNA序列,长度为734bp,其中开放阅读框架长714bp,编码238个氨基酸.经Blast分析,该序列与已登陆的多粘芽孢杆菌和浸麻芽孢杆菌的同源性较高,分别为99%和82%.
- 李卫芬陆平周绪霞
- 关键词：Β-葡聚糖酶基因克隆
- 木霉GXC产β-葡聚糖酶条件和酶学性质被引量：27
- 2001年
- 研究了木霉GXC产 β 葡聚糖酶的条件。结果表明 ,最适产酶碳源为麸皮 ,氮源为硫酸铵 ;产酶的最适条件为 :初始pH为 4 0～ 5 0 ,30℃培养 44h。粗酶液经硫酸铵沉淀、SephadexG 2 5、SephadexG 1 0 0和DEAE SephadexA 50柱层析得到纯β 葡聚糖酶 ,SDS PAGE凝胶电泳显示一条带 ,测得分子量为 35kD。该酶最适反应pH5 0 ,最适反应温度为 60℃ ,在 40℃以下、pH4 0～ 5 0酶活力相对稳定。 5 0mmol L以下的Ca2 +、Zn2 +和Fe2 +,以及 1 0 0mmol L以下的Co2 +对酶活力有激活作用 ;而Cu2 +和Fe3+具有抑制作用。
- 孙建义李卫芬顾赛红
- 关键词：Β-葡聚糖酶木霉产酶条件纯化
- β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株筛选、鉴定及酶基因克隆和序列分析被引量：3
- 2004年
- 目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析。方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株。通过PCR方法扩增酶基因,将其克隆于T-载体,用Sanger双脱氧链终止法测定序列。结果:分离筛选的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株呈长杆状、革兰氏染色可变、兼性厌氧、产芽孢(次端生、孢囊膨大)。生理生化试验结果表明:该菌株与浸麻芽孢杆菌(Bacillusmacerans)最为相近,命名为BacillusspA3。PCR扩增获得的酶基因全长734bp,其中开放阅读框架为717bp,编码238个氨基酸。经Blast分析,该序列与多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)和浸麻类芽孢杆菌(B.macer-ans)相似性较高,分别为98%和82%。结论:成功分离了β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株BacillusspA3,酶基因序列与多粘芽孢杆菌和浸麻类芽孢杆菌有较高的同源性。
- 李卫芬孙建义肖竞吕文平
- 关键词：酶基因菌株筛选Β-1,3-1,4-葡聚糖酶麻类生理生化
- 里氏木霉β-葡聚糖酶稳定性研究被引量：22
- 2001年
- 研究了里氏木霉GXCβ -葡聚糖酶的稳定性。结果发现 :β-葡聚糖酶粗酶液的稳定性高于纯酶液 ,两者的耐热温度分别为 70℃和 6 0℃ ,其pH稳定范围都为 3.0～ 5 .0。Cu2 +,Mn2 +和Fe3+对酶有抑制作用 ,Zn2 +和Co2 +有激活作用 ,其他离子Ca2 +,Mg2 +,Fe2 +和K+在不同浓度条件下对β -葡聚糖酶有不同的作用。胰蛋白酶和胃蛋白酶对 β
- 李卫芬孙建义顾赛红
- 关键词：里氏木霉Β-葡聚糖酶稳定性饲用酶制剂
- 浸麻芽孢杆菌-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2005年
- 将含浸麻芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-30a相连接,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中表达.蛋白质电泳结果表明在25.0 kD处有表达带,酶活力达60.4 U/mL,为出发菌的30多倍.酶特性研究表明:该酶的最适温度为50℃,最适pH为5.0～7.0;在50℃以下及在不同的pH下(pH 3.0～9.0)处理后较稳定.
- 李卫芬姚江涛胡春霞许梓荣
- 关键词：Β-葡聚糖酶大肠杆菌酶特性
- 体外模拟动物胃肠条件下β-葡聚糖酶稳定性的研究被引量：16
- 2002年
- 本文研究了胃肠条件下里氏木霉GXC的 β -葡聚糖酶稳定性。模拟胃条件表明 ,酶活的降低主要由低pH值引起 ,温度和胃蛋白酶对酶活性无显著影响 ,,而金属离子混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )具有促进作用 ;模拟小肠条件发现 ,温度和胰蛋白酶对β -葡聚糖酶活性无显著影响 ,酶活的降低主要由中性pH值引起 ,微量元素混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )对酶活性具有一定的抑制作用 ,而Ca2 + 能显著激活β -葡聚糖酶。研究结果表明 ,虽然 β -葡聚糖酶在胃内的活性较低 ,但能在小肠中恢复 ,同时也进一步说明了胃蛋白酶和胰蛋白酶对 β
- 孙建义李卫芬顾赛红
- 关键词：Β-葡聚糖酶小肠酶稳定性饲料添加剂
