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二甲双胍抗肿瘤效应及其机制的研究进展被引量：1: 2015年; 二甲双胍作为治疗2型糖尿病的一线口服降糖药,不仅安全、有效且价格低廉,而近年来其突出的抗肿瘤效应亦受到医学界的广泛关注。研究者通过流行病学、体外实验及动物实验等多个方面探索二甲双胍的肿瘤抑制作用和机制,而其研究对象几乎涉及乳腺癌、直肠癌、肺癌等各种常见的恶性肿瘤。; 陈旭沈宇辉张伟滨; 关键词：二甲双胍抗肿瘤腺苷酸活化蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白肿瘤干细胞

雷帕霉素对骨肉瘤干细胞和人骨肉瘤细胞中雷帕霉素靶蛋白传导通路的抑制作用及意义被引量：15: 2013年; 目的研究雷帕霉素对人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞中雷帕霉素靶蛋白（mTOR）传导通路的影响，探讨雷帕霉素应用于骨肉瘤联合化疗的可行性。方法体外培养人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞，采用免疫荧光技术检测骨肉瘤细胞球中Nanog和Oct4的表达。以0、20、50和100nmol／L雷帕霉素处理骨肉瘤干细胞和人骨肉瘤MG-63细胞，采用半定量PCR和定量PCR法检测不同浓度雷帕霉素处理后骨肉瘤干细胞和未经处理的骨肉瘤细胞中mTOR的表达；采用细胞计数盒8（CCK-8）法测定不同浓度雷帕霉素处理后人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞的增殖活性；倒置显微镜下观察不同浓度雷帕霉素处理后骨肉瘤干细胞的形态学变化。结果荧光显微镜下可见，骨肉瘤MG-63细胞球较致密的核心部分Nanog和Oct4呈阳性表达，提示成球的骨肉瘤细胞球有干细胞特性。半定量PCR检测结果显示，未经雷帕霉素处理的骨肉瘤干细胞中mTORmRNA的相对表达量为0．761±O．080，明显高于人骨肉瘤MG-63细胞（0．406±O．090，P〈0．05）。定量PCR检测结果显示，100nmol／L雷帕霉素处理组骨肉瘤干细胞中mTORmRNA的表达量为0．961±O．060，明显低于0nmol／L雷帕霉素处理组（1．654±O．246，P〈0．05）。CCK-8法检测结果显示，与0nmol／L雷帕霉素处理组比较，20、50和100nmol／L雷帕霉素处理组人骨肉瘤MG-63细胞的增殖均受到明显抑制（均P〈0．05）；20和50nmol／L雷帕霉素对骨肉瘤干细胞的增殖无明显的抑制作用（均P〉0．05），但100nmol／L雷帕霉素对骨肉瘤干细胞的增殖有明显的抑制作用（P〈0．05）。形态学观察结果显示，雷帕霉素可以有效抑制骨肉瘤干细胞的成球特性。结论雷帕霉素通过干预mTOR信号途径可以有效抑制骨肉瘤干细胞的增殖活性和成球特性，这将为雷帕霉素应用于骨肉瘤联合化疗提供理论依据。; 刘沛宜张伟滨王君沈宇辉魏义勇; 关键词：雷帕霉素骨肉瘤干细胞雷帕霉素靶蛋白

Targeting the mammalian target of rapamycin pathway in osteosarcoma using combinative chemotherapy被引量：2: 2013年; Osteosarcoma is the most common primary malignant bone sarcoma,and occurs predominantly in children and young adults.The overall survival of patients with osteosarcoma remains low at approximately 60％.1 The prognosis of osteosarcoma patients is highly associated with response to chemotherapy.Although multiple chemotherapy regimens have improved the outcome of patients with osteosarcoma,resistance to current regimens has been reported in more than 30％ of patients,2highlighting the need for novel,targeted therapies.; LIU Pei-yi ZHANG Wei-bin WEI Yi-yong; 关键词：雷帕霉素生存期

二甲双胍对骨肉瘤干细胞形态、凋亡及分化能力的体外影响被引量：2: 2016年; 目的 :研究二甲双胍对体外诱导的人骨肉瘤干细胞形态、凋亡及分化能力的生物学影响,并初步探讨其与磷酸腺苷激活的蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)活性及胚胎干细胞标志物Nanog、Oct4表达情况间的相关性。方法 :采用悬浮球生长实验将人骨肉瘤MG63细胞诱导为骨肉瘤干细胞,在倒置显微镜下呈现典型成球过程,并观察二甲双胍处理前、后骨肉瘤干细胞的形态及分化能力差异;采用流式细胞术分析二甲双胍对骨肉瘤干细胞凋亡诱导的情况及作用前、后胚胎干细胞标志物Nanog及Oct4的阳性率;用蛋白印迹法对比骨肉瘤细胞成球前、后的肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)/AMPK变化,并检测二甲双胍作用前、后骨肉瘤干细胞中AMPK/雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,m TOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase,p70S6K)信号通路的表达情况。结果 :在倒置显微镜下发现,加入二甲双胍后骨肉瘤干细胞的球体形态及分化能力均受到一定程度的破坏。流式细胞术分析显示,二甲双胍具有微弱的诱导骨肉瘤干细胞凋亡的能力。二甲双胍组的Nanog及Oct4阳性率分别为45.2%和74.7%,均明显低于对照组的Nanog(73.5%)及Oct4(95.3%)阳性率。蛋白印迹法检测结果显示,骨肉瘤细胞成球后AMPK的活性降低;二甲双胍组中磷酸化AMPK(p-AMPK)相对表达量为0.637 3±0.143 1,明显高于对照组(0.272 5±0.125 1,P<0.05);p-m TOR及p-p70S6K的蛋白相对表达量分别为0.401 8±0.018 1和0.310 0±0.105 5,均低于对照组p-m TOR(0.630 1±0.221 8,P<0.05)及p-p70S6K(0.628 2±0.014 6,P<0.05)。结论:二甲双胍可破坏骨肉瘤干细胞的形态,诱导其发生凋亡,并对其分化能力具有一定抑制作用,其机制可能与Nanog、Oct4表达的下调和AMPK的激活有关。; 陈旭张伟滨沈宇辉王君虞佩胡传真沈炜; 关键词：骨肉瘤肿瘤干细胞二甲双胍

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国家自然科学基金(81172550)

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