新疆生产建设兵团博士基金(ZD2007JC08)
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
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- 小鼠精原干细胞体外分化中Stra8、mina53表达的研究被引量:5
- 2010年
- 为检测Stra8、mina53在小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,mSSCs)体外分化中的表达,采用1)体外培养mSSCs并通过全反式视黄酸(ATRA,all-trans retinoic acid)进行诱导分化;2)通过间接免疫荧光反应鉴定mSSCs体外分化前后情况;3)通过RT-PCR检测mSSCs诱导分化前后(0h,2h,72h)Stra8、mina53mRNA的水平,初步了解Stra8、mina53的表达状况。结果表明:1)形态学变化显示ATRA使mSSCs向精母细胞方向发生了分化,并通过间接免疫荧光反应进行鉴定。2)Stra8在mSSCs诱导分化2h、72h的水平高于成年小鼠和未诱导分化的水平,其中72h时水平低于2h,各对照组间差异具有统计学意义。3)mina53的表达在诱导后增加,其水平高于成年小鼠和未诱导mSSCs的水平,但差异无统计学意义。这表明ATRA在体外使mSSCs向精母细胞方向分化,Stra8基因呈高表达,但mina53基因呈高表达不确定。
- 王宝峰王菊谢松松周宗瑶
- 关键词:精原干细胞MINA53全反式视黄酸分化
- Oct-4在精原干细胞定向诱导分化中的表达被引量:2
- 2010年
- 目的:检测Oct-4在小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,mSSCs)体外诱导分化中的表达。方法:①体外培养mSSCs;②用干细胞因子(SCF,stem cell factor)对mSSCs进行精母细胞方向诱导分化;③通过形态学观察和c-kit,GCNF间接免疫荧光染色鉴定mSSCs是否发生分化;④通过间接免疫荧光染色和RT-PCR分别从蛋白水平和mRNA水平检测Oct-4在mSSCs诱导分化前后的表达情况。结果:①形态学观察mSSCs细胞核较大,细胞质少,SCF诱导培养后,随着培养时间的延长,细胞克隆逐渐增长缓慢,并出现衰退、凋亡的细胞;②c-kit,GCNF间接免疫荧光染色结果显示,mSSCs经SCF诱导后发生分化;③Oct-4间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在mSSCs诱导前表达水平最高,诱导2天后下降,5天后几乎不表达。结论:Oct-4是mSSCs未发生分化的标志。
- 谢松松王菊王宝峰周宗瑶
- 关键词:OCT-4精原干细胞分化