内蒙古自治区自然科学基金(20080404Zd08)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 人工合成启动子特异启动IGF-1真核载体的构建与绵羊成纤维细胞转染被引量：1
- 2010年
- 构建了肌肉特异表达IGF-1载体,并转染绵羊成纤维细胞获得了稳定整合外源基因可用于细胞核移植的转基因细胞.通过人工合成骨骼肌特异启动子SP片段,与羊IGF-1相连,最终连接到骨架载体pCDsRed2中构建成骨骼肌特异表达IGF-的真核表达载体pSPICDS.使用脂质体法转染绵羊成纤维细胞,通过红色荧光与G418双重选择,获得了转基因细胞.经PCR检测证实得到的细胞克隆外源基因稳定整合,可以作为供体细胞用于体细胞核移植.
- 袁建龙王玮金永肖红梁伟郭旭东仓明
- 关键词：胰岛素样生长因子基因转染
- 构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞被引量：1
- 2011年
- 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。
- 王玮袁建龙金永朱兵岳群华梁浩郭旭东刘东军仓明
- 关键词：卵泡抑制素
