广东省医学科学技术研究基金(A2013495)
- 作品数：6 被引量：33H指数：2
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- 磷酸二酯酶4抑制剂对人巨噬细胞噬菌能力的影响
- 2015年
- 目的：探讨磷酸二酯酶4抑制剂对人肺泡巨噬细胞（AM）吞噬非生物性颗粒及革兰阳性菌、阴性菌能力的影响。方法使用 Ficolll-Hypaque 密度梯度法将外周血单核细胞分离的静脉血，在含有2 ng／m GM-CSF 的培养液中经12天诱导培养成 AM替代细胞模型—单核细胞源性巨噬细胞（MDM）。用酶标仪检测 MDM经磷酸二酯酶4抑制剂 Rolipram 预处理过夜（16～18 h）后吞噬荧光标记的非生物颗粒 Beads 和热灭活的流感嗜血杆菌（H.influenzae）、金黄色葡萄球菌（S.aureus）量的改变，另使用 MTT 法检测细胞活性。结果成功建立的 MDM细胞模型对 Beads 和细菌的吞噬呈时效关。Rolipram 在实验浓度（10～8～10-5 M）下对 MDM吞噬 Beads、H.influenzae 和S.aureus 能力无明显促进或抑制作用，也不影响 MDM的活性。结论磷酸二酯酶4抑制剂不会因升高巨噬细胞内cAMP 水平而影响其吞噬非生物颗粒和细菌的能力。
- 梁志科赵子文刘朝晖李裕军钟维农
- 关键词：磷酸二酯酶4抑制剂咯利普兰巨噬细胞金黄色葡萄球菌流感嗜血杆菌
- 2007-2012年金黄色葡萄球菌的耐药性研究被引量：16
- 2015年
- 目的：探讨不同年度金黄色葡萄球菌的分离结果和药物耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对医院2007年1月－2012年12月住院患者送检的标本进行培养，用VIT EK‐2细菌鉴定及药敏分析系统对菌落进行菌种鉴定及药敏试验。结果共分离出3601株金黄色葡萄球菌，分离菌株最多的标本是痰液，分布最多的科室是老年干部综合病区，其次是危重症监护中心以及呼吸内科；金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高为98．6％、对苯唑西林、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率分别为72．3％、69．5％、65．3％、62．1％；对庆大霉素、克林霉素、红霉素的耐药率较低为56．1％-70．1％；对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁的耐药率最低。结论金黄色葡萄球菌的临床检出率呈逐年上升趋势，且对多种常用抗菌药物耐药，应加强监测，制定合理的临床用药策略。
- 林沛茹梁志科陈惠玲李裕军刘朝晖赵子文
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性
- 蛋白酶体抑制剂MG-132对脂多糖致急性肺损伤大鼠的抗炎作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对急性肺损伤(ALI)大鼠的抗炎作用机制。方法将雄性SD大鼠54只随机分为对照组、ALI组和MG-132组,每组18只。对照组尾静脉注入生理盐水,ALI组、MG-132组尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg,MG-132组于实验前30 min腹腔注射MG-132 10 mg/kg。三组动物在注射生理盐水或LPS后2、4、8 h各随机处死6只,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿重/干重比值(W/D),酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞间粘附分子1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,Western blot法测定肺组织核因子κB(NF-κB)P65蛋白的表达。结果 ALI组大鼠病理切片可见明显肺组织充血、水肿、大量炎性细胞浸润等典型ALI表现,MG-132组病理学损伤明显减轻。与对照组比较,ALI组大鼠2、4、8 h肺组织W/D比值及BALF中ICAM-1、TNF-α的表达、肺组织NF-κB P65蛋白的表达均明显升高(P<0.05),MG-132组大鼠2、4、8 h肺组织W/D比值及BALF中ICAM-1、TNF-α的表达、肺组织NF-κB P65蛋白的表达均较ALI组明显降低(P<0.05)。肺组织NF-κB P65蛋白的表达与ICAM-1、TNF-α的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论 MG-132可改善内毒素性急性肺损伤炎症反应,其抗炎作用可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关。
- 孟文刘朝晖范伟梁志科蔡广平
- 关键词：急性肺损伤MG-132细胞间粘附分子1核因子KB
- COPD大鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体降解通路与IL-10相关性的研究被引量：1
- 2016年
- 目的：研究 COPD 大鼠模型的骨骼肌泛素（Ub）-蛋白酶体降解途径中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达,肿瘤坏死因子α（TNF-α）和炎症抑制因子 IL-10在大鼠血清和骨骼肌中含量变化,探讨 IL-10在 COPD 骨骼肌蛋白高分解过程中的作用及调控机制。方法成年雄性 SD 大鼠45只,其中分为模型组30只、对照组15只,采用反复熏香烟＋气管内注入脂多糖法复制 COPD 大鼠动物模型。蛋白质印迹法分别检测大鼠膈肌、腓肠肌和肋间肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白表达。用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清、膈肌、腓肠肌和肋间肌中 IL-10和 TNF-α的含量。结果模型组膈肌、肋间肌、腓肠肌中 E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白的相对表达量显著增加。在模型组中,血清和骨骼肌肌内 TNF-α较对照组显著升高,IL-10表达均下降[血清（44.68±8.67）vs （75.96±10.59）,膈肌（50.55±7.41）vs （80.06±9.22）,肋间肌（47.47±8.98）vs （78.10±7.21）,腓肠肌（48.60±10.88）vs （76.77±8.92）,P 〈0.01]。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10和 TNF-α水平呈负相关（血清 r =-0.67,膈肌 r =-0.78,肋间肌 r =-0.80,腓肠肌 r =-0.77,P 〈0.05）。血清、膈肌、肋间肌和腓肠肌中 IL-10都与中性粒细胞百分比、E2-14K、MAFbx、Ub 蛋白相对表达量呈负相关（血清 r =-0.80、r =-0.73、r =-0.69、r =-0.81；膈肌 r =-0.83、r =-0.81、r =-0.75、r =-0.79；肋间肌 r =-0.81、r =-0.80、r =-0.74、r =-0.54；腓肠肌 r =-0.74、r =-0.69、r =-0.71、r =-0.62,P 〈0.05）。血清 IL-10与骨骼肌IL-10呈显著正相关（膈肌 r =0.83、肋间肌 r =0.80、腓肠肌 r =0.73,P 〈0.01）。结论 IL-10的下调在 COPD 炎症中起重要作用,可能参与骨骼肌 Ub-蛋白酶体降解途径降解机制的调控。
- 汪新龙刘朝晖梁志科范伟关丽君马碧蔓
- 关键词：骨骼肌泛素-蛋白酶体通路白介素-10
- MAPK在介导人肺泡巨噬细胞模型噬菌中的作用被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨MAPK信号传导途径在介导人肺泡巨噬细胞吞噬细菌中的作用。方法使用Ficoll—Hypaque密度梯度法将外周血单核细胞分离自13名健康志愿者外周血，经2μg／L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子诱导培养12d成单核细胞源性巨噬细胞（GM-MO），即肺泡巨噬细胞研究替代细胞模型。用共聚焦荧光显微镜检测GMMO吞噬荧光标记的金黄色葡萄球菌；使用多功能酶标仪检测p38MAPK、ERK、JNK特异性抑制剂对GM-MO吞噬金黄色葡萄球菌量的影响。以细胞吞噬抑制剂细胞松弛素D为阳性对照。结果GM—MD吞噬金黄色葡萄球菌呈时间依赖，4h后呈逐渐饱和状态。以吞噬反应4h为观测终点，共聚焦荧光显微镜检测显示绝大部分金黄色葡萄球菌均被吞噬进细胞内。使用细胞松弛素D后，GM-MO对金黄色葡萄球菌的吞噬几乎全部被抑制，其荧光值为（4259士869）RFU；p38aMAPK特异性抑制剂Gw856553随着浓度的升高可抑制GM—MD对金黄色葡萄球菌的吞噬，并呈浓度依赖性：浓度为10μmol／L时荧光值为（18290±5491）RFU，浓度为10μmol／L时荧光值为（16802±6440）RFU，与空白对照[（19489士5450）RFU3相比差异均有统计学意义。而ERK抑制剂U0126和JNK抑制剂SP600125在各实验浓度下（10^-8～10mol／L）均对GM-M0吞噬金黄色葡萄球菌无影响。结论p38MAPK途径可能参与了介导人肺泡巨噬细胞对细菌的吞噬作用，而ERK及JNK信号传导途径与此无关。
- 梁志科刘朝晖赵子文李裕军林沛茹李晓岩钟维农
- 关键词：肺泡巨噬细胞C-JUN
- 慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症与白细胞介素10的相关性研究被引量：13
- 2014年
- 目的研究慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠模型中白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子ɑ(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)在血清和肺组织中的表达,探讨IL-10在慢阻肺气道炎症中的作用及调控机制。方法成年雄性SD大鼠45只,分为模型组30只,对照组15只,采用反复熏香烟+气管内注入脂多糖法建立慢阻肺大鼠模型。ELISA法检测大鼠血清、肺组织中IL-10、TNF-ɑ和IFN-γ的表达。结果模型组血清和肺组织内TNF-α较对照组显著升高,IFN-γ、IL-10[血清(44.68±8.67)ng/L比(75.96±10.59)ng/L,肺组织(64.55±9.03)ng/L比(94.06±8.71)ng/L,P均<0.01]表达均下降。IL-10和TNF-ɑ水平呈负相关(血清r=-0.67,肺组织r=-0.80,P<0.01)。IL-10和IFN-γ水平呈正相关(血清r=0.64,肺组织r=0.72,P<0.01)。结论 IL-10的下调在慢阻肺大鼠气道炎症中起重要的调控作用。
- 汪新龙刘朝晖梁志科范伟马碧蔓关丽君
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病气道炎症白细胞介素10肿瘤坏死因子ΑΓ-干扰素
