国家教育部博士点基金(20070159016)
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
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- 相关机构：中国医科大学牡丹江医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- JNK信号转导通路对神经干细胞增殖的影响被引量：6
- 2011年
- 目的探讨JNK信号转导通路对新生大鼠海马神经干细胞增殖的影响。方法采用无血清培养技术体外培养新生大鼠海马神经干细胞,传至第4代,大多数克隆球直径约为200μm时,进行单细胞克隆培养,单细胞克隆形成的克隆球进行传代。将培养细胞随机分为2组,对照组采用神经干细胞培养液进行培养,实验组中在神经干细胞培养液的基础上添加不同浓度的JNK通路抑制剂SP600125,Western blot检测加入细胞中JNK及p-JNK的表达情况,MTT法检测其对神经干细胞增殖的影响。结果神经干细胞加入SP600125后JNK磷酸化水平明显低于对照组,当抑制剂浓度为10μmol/L时细胞的增殖速度较对照组明显降低。2周时全部死亡。结论 JNK信号转导通路被抑制后,神经干细胞的增殖能力明显降低。
- 佟雷佟晓杰
- 关键词：神经干细胞增殖JNK信号转导通路
- 联合应用碱性成纤维细胞生长因子和脑源性神经营养因子对成年大鼠脑海马神经干细胞分化为神经元的影响被引量：6
- 2009年
- 背景：调控神经干细胞分化的微环境因素很多，数种因素可以不同程度地刺激神经干细胞向神经元分化，如何使神经干细胞更有效地分化为神经元尤为关键。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子与脑源性神经营养因子联合应用对成年大鼠脑海马神经干细胞分化为神经元的影响。设计、时间及地点：细胞学体外观察．于2008-05在中国医科大学神经解剖研究室完成。材料：清洁级雄性SD大鼠3只，由中国医科大学实验动物部提供。方法：无菌条件下分离大鼠脑海马组织，胰蛋白酶消化后采用无血清培养技术体外培养神经干细胞，传至第4代克隆球直径约为200um时，滴加含B27、表皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的DMEM／F12进行单细胞克隆培养。传代的神经干细胞分成4组：空白对照组加入含体积分数为10％胎牛血清的DMEM／F12培养液，碱性成纤维细胞生长因子组、脑源性神经营养因子组、联合组分别在空白对照组培养液的基础上加入10μg／L碱性成纤维细胞生长因子、200μg／L脑源性神经营养因子、10μg／L碱性成纤维细胞生长因子＋200μg／L脑源性神经营养因子，培养1周。主要观察指标：免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞，检测神经干细胞分化为神经元的比例。结果：单细胞克隆培养后，克隆球细胞表达巢蛋白，诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白均呈阳性表达。与空白对照组比较，碱性成纤维细胞生长因子组、脑源性神经营养因子组、联合组神经干细胞分化为神经元的比例均明显提高（t=3．409-7．558，P〈0．05），且联合组升高幅度尤为显著。结论：适宜浓度的碱性成纤维细胞生长因子和脑源性神经营养因子联合应用，比其单独应用具有更强的促神经干细胞向神经元分化的作用。
- 佟雷谢大龙高海佟晓杰
- 关键词：神经干细胞神经元碱性成纤维细胞生长因子脑源性神经营养因子分化
- 条件培养液对Wistar大鼠海马神经干细胞单细胞克隆增殖的影响
- 2011年
- 目的探讨神经干细胞(NSCs)条件培养液对其单细胞克隆增殖的影响。方法采用无血清培养法体外培养Wistar大鼠海马神经干细胞并进行传代培养,然后收集神经干细胞条件培养液。第四代细胞进行单细胞克隆,并将单细胞克隆细胞分为条件培养液组、无血清培养液对照组。通过MTT法比较两组细胞的增殖情况。单克隆培养细胞行巢蛋白(nestin)免疫细胞化学染色,诱导分化后细胞行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂(Galc)免疫细胞化学染色。结果单克隆培养后克隆球表达nestin,诱导分化后细胞表达NSE、GFAP、Galc,条件培养液组细胞增殖速度高于对照组。结论条件培养液能提高Wistar大鼠海马神经干细胞单细胞克隆的增殖速度。
- 佟雷王振宇季丽莉佟晓杰
- 关键词：条件培养液WISTAR大鼠海马神经干细胞增殖
- ERK信号转导通路对新生大鼠海马神经干细胞增殖的影响被引量：10
- 2011年
- 目的探讨细胞外信号调解激酶(ERK)信号转导通路在新生大鼠海马神经干细胞增殖中的作用。方法体外培养新生大鼠海马神经干细胞,传至第4代后进行单细胞克隆培养并传代。将培养细胞分为2组,对照组采用神经干细胞培养液进行培养,实验组中在神经干细胞培养液的基础上添加不同浓度的ERK通路抑制剂U0126,Western Blot检测加入细胞中ERK及P-ERK的表达情况,MTT法检测其对神经干细胞增殖的影响。结果神经干细胞加入U0126后ERK磷酸化水平明显低于对照组;当U0126浓度为10M时,细胞的增殖速度较对照组明显降低。结论神经干细胞的增殖可能与ERK信号转导通路有关。
- 佟雷王振宇季丽莉佟晓杰
- 关键词：神经干细胞增殖新生大鼠
- VEGF在小剂量超短波促进种植骨髓间充质干细胞脱细胞支架修复大鼠坐骨神经损伤中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在小剂量超短波对种植骨髓间充质干细胞(BMSC)脱细胞支架修复大鼠坐骨神经损伤中的表达。方法将培养至第3代的大鼠BMSC注入已制备的脱细胞支架内,然后置于培养箱内联合培养3d,无菌条件下缝合到神经缺损处。实验鼠分为3组,即达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)组、支架内注射BMSC组和注射BMSC后应用超短波(USW)治疗组;超短波治疗组在术后2d用小剂量超短波对移植动物的神经缺损处治疗;移植后第2,4,8和12周检测再生的神经中VEGF、S-100蛋白表达。结果各组VEGF在损伤后再生即有表达,并随时间延长呈上升趋势,在第4周达到顶峰,超短波治疗组表达高于其他组(P<0.05)。结论VEGF在超短波治疗早期的高水平表达可加速种植的BMSC分化或迁移的速度,并能促使再生神经周围的血供增加。
- 庞超见佟晓杰刘贵波李奇贾桦王莹高海
- 关键词：脱细胞支架超短波治疗周围神经再生骨髓间充质干细胞
- 碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马神经干细胞向神经元样细胞的分化被引量：9
- 2011年
- 背景:影响神经干细胞向神经元分化的因素很多,各种营养因子可以不同程度地刺激神经干细胞向神经元分化,如何使神经干细胞大量分化为神经元是研究的热点问题。目的:观察联合应用碱性成纤维生长因子和神经生长因子对成年大鼠海马神经干细胞为神经元的影响。方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,传至第4代克隆球直径约为200μm时,滴加DMEM/F12+2%B27+20μg/L表皮生长因子+20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,进行单细胞克隆培养,传代的神经干细胞分成空白对照组、碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子+神经生长因子组。观察传代后的克隆球进行神经干细胞免疫细胞化学染色鉴定,计数神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率,检测神经干细胞向神经元的分化情况。结果与结论:①单细胞克隆培养后,克隆球细胞表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白均呈阳性表达。②与空白对照组神经干细胞分化为神经元的比例比较,碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组均明显提高(P<0.05),且碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组神经元的比例最高(P<0.05)。提示,碱性成纤维细胞生长因子可以提高神经生长因子诱和神经生长因子均可促进神经干细胞向神经元分化,且二者联合应用效果更佳。
- 佟雷季丽莉解大龙高海佟晓杰
- 关键词：神经干细胞神经元碱性成纤维细胞生长因子神经生长因子
- 硫酸软骨素酶ABC在中枢神经系统中促进神经再生的作用被引量：1
- 2011年
- 中枢神经系统(CNS)损伤后因胶质瘢痕形成而导致神经元的轴突不能再生,功能恢复不良。胶质瘢痕的重要组分是硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs),其单独或与其它细胞外基质结合,导致向损伤部位延伸的轴突在胶质瘢痕处停止,而且CSPGs在神经再生时间窗关键期末可降低轴突生长的可塑性。近年研究发现硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)能通过降解CSPGs,使轴突的再生能力加强,活化轴突生长的可塑性,促进CNS损伤后的运动功能恢复。本文综述了近年来ChABC对中枢神经系统神经再生和可塑性作用的研究进展。
- 王莹贾桦李文媛佟晓杰
- 关键词：硫酸软骨素酶ABC中枢神经系统神经再生胶质瘢痕形成硫酸软骨素蛋白聚糖轴突生长
