国家自然科学基金(3988044)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：郑文岭马文丽刘斌罗立新崔东更多>>
- 相关机构：华南理工大学广州军区广州总医院华南基因组研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼠疫亚单位疫苗研究进展被引量：7
- 2004年
- 鼠疫 ,由于其强烈的传染性和极高的致死率 ,使得人们在应对它时 ,必须侧重于早期的防治。传统疫苗存在安全隐患 ,且存在效率低 ,接种反应率高以及不能保护人体免受肺鼠疫侵害等缺陷。近年来生物技术的迅速发展 ,为开展对鼠疫传统疫苗的改进和新疫苗的研究创造了条件 ,而这些研究当中 ,成果最为丰富的当属亚单位疫苗。目前鼠疫亚单位疫苗的研究大多围绕对鼠疫杆菌免疫原性起决定作用的两种主要抗原成分 (F1抗原和V抗原 )展开 。
- 刘斌郑文岭罗立新
- 关键词：鼠疫鼠疫耶尔森菌鼠疫杆菌亚单位疫苗
- TOPO克隆构建SARS-CoV M蛋白基因裂殖酵母表达载体及其稳定性被引量：2
- 2007年
- 目的利用TOPO克隆法构建SARS-CoV M蛋白基因的裂殖酵母重组表达载体,并验证重组载体在宿主细胞中的稳定性。方法运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从SARS-CoV RNA中扩增出M蛋白基因,AT克隆构建出序列正确的pMD18-T-M重组载体。设计含Kozak序列的引物从pMD18-T-M载体上亚克隆出M蛋白基因,与裂殖酵母表达载体pNMT1-TOPO进行TOPO克隆,构建出重组表达载体pNMT1-M,转化TOP10感受态细胞,菌落PCR鉴定阳性转化子后进行测序鉴定。将序列正确的pNMT1-M重组载体电转化入裂殖酵母TCP1菌株中,在EMM培养基中诱导表达,连续传代100代,在EMM+T培养基中验证其稳定性。结果RT-PCR获得666 bp的片段,pMD18-T-M重组载体经测序验证序列正确;重组表达载体pNMT1-M经菌落PCR和测序鉴定均正确;重组裂殖酵母菌经诱导后,SDS-PAGE检测出了表达条带;重组表达载体连续传代后,未发现丢失现象。结论成功地构建出了SARS-CoV M蛋白基因的裂殖酵母表达载体,验证了其在裂殖酵母中能稳定地进行遗传,为下一步的表达优化、活性和功能研究垫定了基础。
- 赵林蔡金艳郑文岭马文丽
- 关键词：表达载体构建裂殖酵母
- GFP为报告基因的酵母哺乳动物细胞穿梭载体的构建及其在人血管内皮细胞中的表达被引量：6
- 2003年
- 为研究酵母作为载体在口服基因治疗及免疫中的作用 ,需要一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞中表达的穿梭载体 .利用通用载体质粒融合系统 (UPS)构建了一种以GFP为报告基因的新载体 ,以常规的氯化锂法对酿酒酵母进行转化 ,证明该载体能够在酵母中复制 ;以脂质体介导向人血管内皮细胞进行了转染 ,有绿色荧光 ,证明该载体能够在哺乳动物细胞中表达 .
- 王弘郑文岭杨连生杨太成刘佳冼江崔东马文丽
- 关键词：酵母穿梭载体人血管内皮细胞
- SARS冠状病毒刺突蛋白在裂殖酵母中的表达被引量：1
- 2005年
- 根据SARS冠状病毒S蛋白主要抗原表位的分析,将S蛋白基因扩增成大小为800bp^1000bp的5个片段,分别与裂殖酵母载体pNMT1连接,经电穿孔转化TCP1菌株,得到诱导表达5个片段的裂殖酵母菌株。对诱导表达产物进行SDS-PAGE和Westernblot分析表明,S基因5个片段在裂殖酵母中分别得到不同程度的表达,为进一步研究新一代SARS疫苗提供了材料。
- 吴朝霞郑文岭张宝师永霞马文丽
- 关键词：SARS刺突蛋白裂殖酵母
