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上海市自然科学基金(12ZR1413600): 作品数：18 被引量：112H指数：8; 相关作者：王彦阎超谷雪闫超王桂明更多>>; 相关机构：上海交通大学上海通微分析技术有限公司大连医科大学更多>>; 发文基金：上海市自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项国家自然科学基金更多>>; 相关领域：理学医药卫生化学工程自动化与计算机技术更多>>

细胞代谢组学用于羽扇豆醇干预人乳腺癌细胞MCF-7的机理探究被引量：19: 2014年; 应用基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学方法结合细胞周期实验,研究羽扇豆醇体外抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用机理。代谢组学的研究结果表明:通过正交偏最小方差判别分析(OPLS-DA)可以很好地区分羽扇豆醇作用的MCF-7细胞代谢谱与对照组细胞代谢谱,模型参数为:R2 Ycum=0.988,Q2 Ycum=0.964。VIP(variable importance in the projection)值大于1的差异代谢物进一步用t检验进行单位分析,选择t<0.05(VIP>1)的代谢物作为羽扇豆醇作用组的生物标志物,得到琥珀酸、磷酸、亮氨酸、异亮氨酸等11种代谢差异物。结合羽扇豆醇将细胞周期抑制在G1期这一现象,推测羽扇豆醇可能是主要抑制了三羧酸循环中的琥珀酰辅酶A的生成和底物磷酸化生成ATP的反应来抑制MCF-7细胞的增殖。本实验从代谢组学角度为乳腺癌抗肿瘤机制提供新的线索。; 史栋栋况媛媛王桂明彭章晓王彦阎超; 关键词：羽扇豆醇细胞乳腺癌 SQUARES DISCRIMINANT

UPLC-3Q MSMRM模式在Jurkat细胞脂质代谢物监测中应用: 2014年; 目的:以药物干预前后的Jurkat细胞为样本,旨在找出能够有效干预淋巴瘤的药物及与淋巴瘤相关的代谢及信号通路。方法:以UPLC-3Q MS为技术平台,通过多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)扫描模式,根据实验室前期淋巴瘤代谢组学的研究成果,选择对淋巴瘤患者和健康对照组分类有显著贡献的脂类差异代谢物作为监测对象,对PI3K inhibitor干预前后的Jurkat细胞内这些潜在的生物标记物进行定量研究。结果:PI3K inhibitor与Jurkat细胞作用一段时间后,所监测的四个脂质代谢物含量呈现出与药物干预前肿瘤组相反的变化趋势,药物干预后细胞内含量有明显先升高再降低的趋势。结论:说明PI3K介导的信号通路在淋巴瘤细胞内被放大,选择性抑制该通路可以有效抑制肿瘤增殖和肿瘤细胞的代谢活动,为淋巴瘤的临床研究提供依据。; 边娟王彦谷雪闫超; 关键词：MRM JURKAT

二氧化锆包覆的二氧化硅核壳型填料的制备及在选择性吸附磷脂中的应用研究被引量：4: 2013年; 提出了一种基于ZrO2/SiO2核壳型材料吸附磷脂的分析方法。首先利用NH3/H2O内部水解法制备了含不同比例ZrO2包覆的ZrO2/SiO2核壳型颗粒,并通过电镜和紫外吸收漫反射图谱对其进行了表征,证明在SiO2表面包覆有ZrO2材料。采用RP-HPLC-ELSD(Reversed phase-high performance liquid chromatogra-phy-evaporative light scattering detector),以甲醇-水(含醋酸铵)为流动相,优化并建立了5种磷脂的分析方法。在以上基础上将ZrO2/SiO2核壳型材料制成固相萃取(Solid phase extraction,SPE)小柱,以5种磷脂标准品为研究对象,用RPLC-ELSD方法评价了SPE小柱吸附磷脂的效率。发现包覆有3.5%和7%ZrO2的ZrO2/SiO2核壳型材料吸附磷脂的能力均强于单纯的ZrO2材料,且3.5%的ZrO2/SiO2核壳型材料吸附效果最好,并将其初步应用于血清中磷脂的选择性吸附,结果表明,通过SPE富集后,能检测到更多的磷脂类代谢产物。; 姚凯薛芸吴谦李静王彦闫超; 关键词：磷脂二氧化锆核壳固相萃取高效液相色谱

定量毛细管电泳法测定虫草类保健品中的核苷及碱基类物质被引量：3: 2014年; 目的:定量毛细管电泳法因采用了定量阀进样的方式,其进样量为固定值,定量结果更加可靠,且重复性好。本文探讨了采用定量毛细管电泳方法测定市售虫草类保健品中虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷含量的可行性,优化了分析条件,并对其进行含量测定。方法:以浓度为40 mM、pH 9.5的硼砂为缓冲液,工作电压为-15 kv,采用定量毛细管电泳的方测定了虫草类制品中的核苷及碱基类物质的含量。结果:五种核苷及碱基类物质在优化的定量毛细管电泳条件下得到了良好的分离和定量结果,峰面积RSD值小于1.4%,测定了其在虫草菌丝体粉末及虫草王胶囊中的含量。结论:首次利用定量毛细管电泳法对虫草类保健品中的虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷的含量进行了定量测定,不同形式虫草类保健品中核苷、碱基的种类和含量有差异。该方法快速、准确,对虫草类保健品的质量控制有重要意义。; 李栋王彦薛芸周君裔闫超; 关键词：核苷保健品

细胞代谢组学用于木犀草素抑制MCF-7细胞的机制研究被引量：16: 2014年; 基于气相色谱质谱联用(GC-MS)技术将代谢组学的方法结合细胞周期的实验,研究木犀草素作用于MCF-7细胞的作用机理。细胞活性实验验证,木犀草素对MCF-7细胞有抑制作用,GC-TOF/MS对加药细胞和未加药细胞代谢物进行指纹图谱分析,并进一步应用偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对代谢组学数据进行多维统计分析。结合木犀草素将细胞周期抑制在S期(Synthesis),推测木犀草素通过阻碍核酸代谢中的磷酸戊糖途径抑制MCF-7细胞的增殖。; 史栋栋王桂明况媛媛彭章晓王彦谷雪阎超; 关键词：气相色谱质谱联用 MCF-7细胞细胞周期木犀草素

微流蒸发光散射检测器与加压毛细管电色谱联用测定川贝枇杷糖浆中6种有效成分的含量被引量：11: 2015年; 建立了同时测定川贝枇杷糖浆中6种有效成分（桔梗皂苷D、贝母辛、齐墩果酸、西贝素、贝母甲素和贝母乙素）含量的微流蒸发光散射检测器（μELSD）与加压毛细管电色谱（pCEC）联用检测方法.搭建pCEC-μELSD联用平台,采用C18毛细管色谱柱（EP-150-15-3-C18）,流动相为乙腈（A）-10 mmol·L-1甲酸-三乙胺水溶液（pH 11.0）（B）,梯度洗脱,柱流速为1.02 μL·min-1,施加电压为＋ 10 kV,雾化载气流速为0.4 L·min-1,蒸发温度为40℃.川贝枇杷糖浆中6种有效成分可在10 min内得到分离检测,6种有效成分的线性范围可达4个数量级,检出限均在Pg水平,加标回收率为97.9％～ 103.0％.所建立的pCEC-μELSD联用方法精密度、重复性和稳定性良好,且简便、快速、可靠,可用于川贝枇杷糖浆中6种有效成分的含量测定.; 周文莉阚文彬王玉红张琳王彦阎超; 关键词：加压毛细管电色谱桔梗皂苷D

加压毛细管电色谱-紫外法检测复方维生素片中4种脂溶性维生素被引量：9: 2014年; 采用反相加压毛细管电色谱-紫外检测,建立一种高效、简便、快速的脂溶性维生素分析方法,并用于复合维生素片中脂溶性维生素的检测。使用C18反相毛细管色谱柱,以含0.05%三氟乙酸的95%甲醇溶液(pH 3.3)为流动相进行等度洗脱,泵总流速为0.2 mL/min,分离电压为15 kV,并针对脂溶性维生素样品个体间紫外吸收波长差别较大的问题,采用波长时间程序进行检测。VA、VD3、VE、VK3四种脂溶性维生素可在5 min内实现快速分离。各组分的最低检出限(RSN=3)分别为1.5、3.0、15、1.5μg/mL,线性关系良好,样品加标回收率在90.0%~110.0%之间,相对标准偏差为0.53%~5.46%。将所建立方法应用于维生素片样品分析,取得了良好的分析结果。该方法简单方便、重复性好、准确可靠。; 郑署施文君王晓曦李静谷雪闫超; 关键词：加压毛细管电色谱紫外检测脂溶性维生素

以聚乙二醇/甲醇为二元致孔剂的新型磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱的合成与色谱评价被引量：7: 2014年; 使用新型二元致孔剂聚乙二醇(PEG)/甲醇,以N,N-二甲基-N-甲基丙烯酰胺基丙基-N,N-二甲基-N-丙烷磺酸内盐(SPP)为单体,季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,通过原位聚合法制备磺酸甜菜碱型两性离子亲水毛细管整体柱。对各反应物的配比进行了优化。结果表明,当单体与致孔剂的质量比为1∶2.5,并且致孔剂中PEG与甲醇的质量比为1∶2,单体内部SPP与PETA的质量比为1∶1,AIBN为总质量的0.1%时为最优配比;PEG/甲醇二元致孔剂的加入实现了对整体柱内部孔径大小的调节,得到了结构更为均一,渗透性、机械稳定性良好的毛细管整体柱,并且理论塔板数与传统制备方法相比有显著提高,在毛细管液相色谱模式下最高可达2.4×105塔板/m。将制备的整体柱应用于毛细管液相色谱和加压毛细管电色谱分离酚类、核苷类等极性小分子混合物,得到了很好的分离效果。; 况媛媛王彦谷雪李静阎超; 关键词：毛细管液相色谱加压毛细管电色谱

基于气相色谱-质谱联用技术的乙型肝炎血清代谢标志物的探究被引量：10: 2015年; 探索了乙型肝炎患者和健康人血清代谢组的差异,寻找与疾病相关的潜在标志物。收集乙肝患者30例、健康对照35例,以气相色谱-质谱联用技术作为研究平台,应用主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析进行模式识别,然后通过变量重要性因子、非参数检验,结合数据库检索筛选鉴定有差异的代谢物。确认10个代谢物存在显著差异,其中柠檬酸、乌头酸、谷氨酰胺、N,N-二甲基甘氨酸、丙二酸与乙型肝炎患者组的相关性较好,受试者工作特征曲线下面积为0.975,具有较好的特异度和敏感度。因此这5个代谢物能够作为潜在的区分乙型肝炎患者和正常人的血清小分子标志物,有助于进一步了解病理机制,确定治疗目标。; 侯玉洁祝文君陈长功王彦段志军阎超; 关键词：气相色谱-质谱联用乙型肝炎代谢组学

去氢木香内酯干预人乳腺癌MCF-7细胞机制的探究被引量：1: 2015年; 目的:探讨去氢木香内酯对乳腺癌MCF-7细胞凋亡、线粒体跨膜电位及代谢物的影响,为研究去氢木香内酯诱导MCF-7细胞凋亡的作用机制提供新的视角。方法:采用流式细胞仪测定不同浓度去氢木香内酯(0、2、4、8μg/m L)对MCF-7细胞凋亡及线粒体跨膜电位的影响;GC-TOFMS测定去氢木香内酯作用前后,MCF-7细胞内具有显著性变化的代谢差异物。结果:研究结果表明,去氢木香内酯能诱导MCF-7细胞的凋亡、促进线粒体跨膜电位的降低;正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)多维统计方法对代谢组学数据分析得到柠檬酸、D-核糖、脯氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸等16种代谢差异物。结论:推测去氢木香内酯通过引起线粒体跨膜电位降低而破坏了线粒体的结构,进一步阻碍了线粒体的功能,导致了细胞内代谢物的紊乱,最终诱导了细胞的凋亡。; 王桂明杨婵鲁阳芳谷雪王彦闫超; 关键词：MCF-7细胞去氢木香内酯线粒体跨膜电位

上海市自然科学基金(12ZR1413600)

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