河南省教育厅自然科学基金(2008A208018)
- 作品数：9 被引量：38H指数：5
- 相关作者：王芳周延清周春娥段红英范红军更多>>
- 相关机构：河南师范大学中州大学周口市农业科学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测大豆SRAP标记被引量：5
- 2014年
- 以大豆为试验材料,提取了大豆的基因组DNA,对大豆进行SRAP-PCR扩增,并对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色。建立了一种行之有效、简便快捷的应用于大豆SRAP标记的PAGE银染检测方法。
- 王芳李晓静周延清
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳SRAP大豆
- TRAP标记技术在植物研究中的应用被引量：8
- 2008年
- 介绍了TRAP分子标记的原理、特点及操作流程,综述了这种新型分子标记在植物遗传图谱构建、重要性状的分子标记、种质资源的多样性研究以及标记辅助选择育种研究等方面的应用,并对其应用前景进行了展望。
- 王芳周延清
- 关键词：TRAP植物DNA分子标记遗传育种种质资源
- 农杆菌介导的大豆反义fad2-1基因转化烟草研究被引量：1
- 2010年
- 以烟草无菌苗叶片为外植体,通过根癌农杆菌介导法,将大豆反义油酸脱饱和酶基因导入烟草中,经梯度卡那霉素筛选,获得可在含75mg/L卡那霉素选择生根培养基上再生的抗性植株75株,其中67株抗卡那霉素植株的PCR分析扩增出目的片段;RT-PCR分析表明该基因在烟草中表达.结果表明大豆反义油酸脱饱和酶基因在烟草基因组中整合和表达.这为大豆反义油酸脱饱和酶基因转入大豆和表达奠定基础,也为烟草基因工程育种提供了依据.
- 范红军李敏周延清楚素霞邢延豪
- 关键词：烟草根癌农杆菌
- 大豆遗传多样性的SRAP分析被引量：10
- 2012年
- 利用分子标记SRAP(sequence-related amplified polymorphism)进行大豆遗传多态性的研究,利用从288对引物组合中筛选出的12对SRAP引物组合对113个大豆品种(系)和20个野生大豆材料进行扩增,共扩增出251条谱带,其中多态性条带220条,多态性谱带比率为87.6%,每条引物扩增条带数范围为15～27,平均每对引物产生18.3条多态性条带,期望杂合度为0.287 4,Shannon多样性指数为0.437 5。表明SRAP分子标记适用于大豆遗传多样性分析,供试大豆材料在分子水平上存在较大差异。
- 周春娥王芳周延清段红英路淑霞范红军张亚捷
- 关键词：大豆SRAP
- 根癌农杆菌介导反义fad2-1基因转化大豆的研究被引量：5
- 2010年
- 通过根癌农杆菌介导法将反义fad2-1基因导入大豆子叶节,研究了农杆菌菌液浓度、预培养时间、共培养时间、恢复培养时间、乙酰丁香酮浓度和pH值对大豆子叶节形成丛生芽的影响,建立了有效的转化体系,获得了转基因大豆再生植株。PCR、PCR-Southern blotting检测结果表明,反义fad2-1基因成功转入并整合于大豆基因组。GC检测结果表明,转反义fad2-1基因大豆种子油酸含量比非转基因大豆种子的油酸含量提高了14.44%,而亚油酸含量降低了20.27%。
- 周延清刘艳菊李敏段红英周春娥王芳苑保军
- 关键词：大豆根癌农杆菌
- 利用正交设计优化大豆SRAP-PCR反应体系被引量：2
- 2014年
- 以133个大豆品种为试验材料,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、d NTP、引物、模板5种因素4个水平对大豆SRAP反应体系进行优化,建立了适合于大豆的SRAP-PCR优化反应体系,该反应体系为:模板DNA 30 ng,Mg Cl22.0 mmol/L,d NTP250μmol/L,上下引物各0.5μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,1×PCR buffer 2.5μL,加双蒸水至终体积25μL。优化的PCR反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸7 min,35个循环。
- 王芳王岚周延清
- 关键词：大豆SRAP正交设计
- 大豆蛋白含量多样性分析被引量：5
- 2012年
- [目的]探索大豆品种遗传性适应范围,选育出蛋白含量较高及品质较好的品种。[方法]以分布在全国的113个大豆栽培品种和20个野生品种为材料,用凯氏定氮法测定其蛋白含量,对大豆蛋白含量的多样性进行分析。[结果]野生大豆的蛋白含量为49%～54%,均为高蛋白大豆,而栽培大豆的蛋白含量为36%～51%,既有高蛋白品种,又有低蛋白品种。方差分析显示,大豆蛋白含量表现为极显著差异,具有明显的多态性。[结论]筛选出了高蛋白大豆,为大豆的品种鉴定、种质资源保护和开发利用提供了理论和技术依据。
- 王芳冯冲简在荣赵国欣李领川赵明
- 关键词：大豆蛋白含量多样性
- 大豆脂肪酸脱饱和酶反义基因转化根癌农杆菌研究被引量：1
- 2011年
- 根据NCBI中大豆fad2-1序列设计引物,用PCR方法从大豆的基因组DNA中扩增大豆脂肪酸脱饱和酶基因,克隆到pMD18-Tvector中,转化大肠杆菌JM109菌株,进行测序与比对。然后,将其反向克隆到表达载体pBt,转化农杆菌菌株LBA4404,经双酶切鉴定和PCR扩增检测,获得具有该基因的农杆菌工程菌。结果表明,克隆的fad2-1基因为1 196 bp,基因序列与NCBI中已发表的fad2-1序列只有4%的差异,相似性大于95%,说明克隆的基因是大豆fad2-1基因;构建了该基因的反向表达载体,转入农杆菌内。这为利用农杆菌介导法把该反义基因转入大豆,改良脂肪酸成分奠定了基础。
- 周延清田苗苗王芳陈艳梅张永华苑保军
- 关键词：大豆反义技术根癌农杆菌
- 相关序列扩增多态性分子标记及其在植物研究中的应用被引量：1
- 2011年
- 在阐述相关序列扩增多态性(SRAP)的原理和流程后,详细论述了SRAP标记目前在植物遗传多样性分析、遗传图谱构建、绘制基因组转录图谱、重要性状基因标记、标记测序与基因克隆等方面的研究进展及应用前景。
- 王芳华慧颖李晓静耿风华
- 关键词：相关序列扩增多态性分子标记基因克隆
