国家高技术研究发展计划(2003AA216070)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
- 相关作者：周玲王湛曾毅唐安洲莫武宁更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心广西医科大学第一附属医院基因技术股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ad5F35重组腺病毒载体研究进展被引量：6
- 2006年
- 莫武宁唐安洲周玲
- 关键词：重组腺病毒载体外源基因生物学领域理化性质分离纯化基因片段
- Ad-LMP2重组腺病毒疫苗在恒河猴体内免疫效果的研究被引量：7
- 2006年
- 目的 观察带有EBV-LMP2的非复制型Ad-LMP2重组腺病毒疫苗免疫恒河猴诱导的针对EBV-LMP2的特异性细胞和体液免疫应答.方法 分别使用高剂量（4.5×10^11VP/kg）、中剂量（1.5×10^11VP/kg）、低剂量（0.5×10^11VP/kg）三个剂量的Ad-LMP2重组腺病毒,肌内注射免疫恒河猴,每5 d免疫一次,共免疫6次,第7周时使用ELISPOT方法检测猴外周血细胞毒性T细胞应答,同时应用免疫酶方法检测血清中抗LMP2抗体.结果 3个剂量免疫恒河猴均可以诱导出有效的细胞免疫应答及一定的抗体应答,免疫应答水平的高低与病毒剂量的高低有一定的关系,较高剂量产生的细胞及体液免疫应答水平比低剂量的要高.抗腺病毒中和抗体和抗LMP2抗体免疫2周后就可以检测到,其中抗LMP2抗体在免疫3～4周时滴度较高,7周时则与3～4周时接近或有所下降.结论 非复制型Ad-LMP2重组腺病毒疫苗可以有效的诱导恒河猴产生EBV-LMP2特异性细胞和体液免疫反应.
- 王湛周玲吴小兵卢觅佳宣尧仙左建民李峰王琦叶树清曾毅
- 关键词：EPSTEIN-BARR病毒恒河猴
- Ad5F35-LMP2重组腺病毒的构建及鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的构建Ad5F35-LMP2重组腺病毒。方法分别以EcoRⅠ单酶切pSH-LMP2和pDC316,将LMP2目的基因片段和线性化的pDC3l6连接,克隆构建pDC3l6-LMP2,以PCR和酶切的方法鉴定插入方向正确。pDC3l6-LMP2与腺病毒骨架pBHG-fiber5/35共转染293细胞构建重组腺病毒Ad5F35-LMP2,PCR及间接免疫荧光进行鉴定。结果经PCR和酶切鉴定证实pDC3l6-LMP2构建成功。pDC3l6-LMP2与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功。经PCR证实重组腺病毒Ad5F35-LMP2构建完成,间接免疫荧光鉴定LMP2蛋白能在细胞膜上有效表达。结论本实验成功构建了含EB病毒LMP2全序列的Ad5F35-LMP2重组腺病毒,为下一步进行该重组病毒生物安全性能和生物学功能研究及今后应用Ad5F35-LMP2重组腺病毒对鼻咽癌患者进行基因免疫治疗奠定了基础。
- 莫武宁周玲吴小兵王湛唐安洲黄光武曾毅
- 关键词：鼻咽癌重组腺病毒基因免疫治疗
