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江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(ZY320911)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
单琳
胡博
赵昀
林丹丹
张胤晟
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相关机构:
苏州大学
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发文基金:
江苏省普通高校研究生科研创新计划项目
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作者
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包光明
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刘海燕
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张胤晟
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单琳
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南通大学学报...
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2010
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小鼠白细胞介素15慢病毒载体的构建和表达
被引量:2
2010年
目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒。方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15基因的编码区,并进行基因测序;构建含有IL-15基因的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG,Western Blot检测IL-15基因在MEG细胞中的表达。结果:含有小鼠IL-15基因编码区的慢病毒穿梭质粒构建成功,基因测序结果完全正确;含有小鼠IL-15基因的慢病毒载体包装成功;所得病毒上清可成功感染MEG细胞,流式细胞术检测阳性率可达98%;Western Blot结果证明小鼠IL-15基因在MEG细胞中正常表达。结论:成功扩增、克隆了小鼠IL-15基因,并建立其慢病毒表达系统,从而为后续的基础及应用研究工作奠定了基础。
胡博
林丹丹
张胤晟
包光明
单琳
赵昀
刘海燕
关键词:
白细胞介素15
慢病毒载体
小鼠
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