中国农业科学院院长基金(2013JB18)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：林矫矫傅志强洪炀韩宏晓朱传刚更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海师范大学更多>>
- 发文基金：中国农业科学院院长基金中国博士后科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
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- 日本血吸虫dysferlin基因的克隆及重组蛋白免疫原性的分析被引量：1
- 2013年
- 为评估日本血吸虫dysferlin重组蛋白(rSjDF)的免疫原性,利用PCR技术扩增SjDF基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjDF,诱导表达重组蛋白rSjDF,并用重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗体。应用间接免疫荧光技术对SjDF进行蛋白组织定位。应用Western-blot、ELISA及Bio-Plex悬液芯片技术检测重组蛋白诱导的免疫反应。间接免疫荧光试验表明SjDF主要分布于血吸虫体被表膜。Western-blot结果显示rSjDF能被该重组蛋白免疫小鼠血清识别,具有良好的免疫原性。rSjDF能诱导小鼠产生高水平的特异性IgG、IgG1、IgG2a抗体和IL-2、IL-4、IL-12p70、IL-10、IFN-g等细胞因子。结果表明,制备的重组抗原能刺激小鼠产生较强的免疫反应,为筛选新的血吸虫疫苗候选分子奠定了基础。
- 熊雅念魏梅梅洪炀黄莉妮孟培培艾德宙韩艳辉傅志强林矫矫
- 关键词：日本血吸虫DYSFERLIN基因克隆免疫应答
- 日本血吸虫肌钙蛋白T(SjTnT)基因克隆表达及免疫保护效果评估被引量：1
- 2014年
- 目的克隆、表达日本血吸虫肌钙蛋白T(SjTnT)编码cDNA,评估重组抗原抗血吸虫感染的免疫保护效果。方法利用PCR技术扩增SjTnT基因,构建重组表达质粒pET28a(+)-SjTnT并诱导表达,用重组蛋白rSjTnT免疫BALB/c小鼠制备免疫血清。利用免疫印迹试验(Western blotting)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测rSjTnT诱导的免疫反应。采用rSjTnT免疫小鼠,评估其诱导的免疫保护效果。结果成功克隆、表达了日本血吸虫SjTnT基因。Western blotting显示rSjTnT能被该重组蛋白免疫小鼠血清识别,具有良好的免疫原性。rSjTnT能诱导小鼠产生高水平的特异性IgG抗体。动物免疫保护试验表明,rSjTnT能诱导小鼠产生33.89%的减虫率以及43.94%的肝脏减卵率。结论制备的rSjTnT在小鼠体内能诱导产生部分抗血吸虫感染的免疫保护效果,为评估SjTnT的生物学功能奠定了基础。
- 王馨茁洪炀韩宏晓李长健曹晓丹陆珂李浩朱传刚傅志强林矫矫
- 关键词：日本血吸虫肌钙蛋白T克隆免疫保护
- 日本血吸虫SjRAD23基因的克隆表达及基因重组抗原的免疫保护效果被引量：1
- 2014年
- 辐射敏感蛋白23具有核苷酸切除修复功能,在泛素蛋白酶体途径中起到重要作用。本研究利用PCR技术克隆了日本血吸虫辐射敏感蛋白23(Sj RAD23)编码的c DNA序列,成功获得Sj RAD23的基因序列,其ORF为1 053 bp。构建Sj RAD23基因重组表达质粒p ET28a(+)-Sj RAD23,并在大肠杆菌BL21中成功诱导表达,重组蛋白在上清和沉淀中都有存在。利用免疫组化技术检测该蛋白在虫体的分布情况,该蛋白广泛分布在日本血吸虫虫体被膜。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫小鼠血清中检测到较高水平的特异性Ig G、Ig G1和Ig G2a。Western blotting分析显示重组蛋白能够被日本血吸虫成虫可溶性抗原免疫小鼠血清所识别。用重组蛋白r Sj RAD23免疫结果与206佐剂对照组比较,r Sj RAD23在BALB/c小鼠中诱导了35.94%减虫率,40.59%肝脏减卵率。结果表明Sj RAD23具有作为疫苗候选分子的潜力。
- 李长健张旻洪炀韩艳辉曹晓丹韩宏晓傅志强朱传刚陆珂李浩林矫矫
- 关键词：日本血吸虫免疫保护
