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黑籽南瓜离体再生体系与转基因技术研究被引量：10: 2009年; 以黑籽南瓜为试验材料,子叶为外植体,建立了黑籽南瓜组织培养再生体系,并对转基因常用的抗生素浓度进行了筛选。试验结果表明:萌发4天的子叶是诱导芽再生的最佳外植体,MS+1.0 mg/L BA是诱导芽再生的最适培养基,1/2MS+0.5 mg/L GA3是适合再生苗壮苗和生根的培养基。100 mg/L卡那霉素、50 mg/L潮霉素适于南瓜的转基因,初步的转基因研究验证了此转化体系的有效性。; 李长生赵传志李爱芹夏晗; 关键词：黑籽南瓜转基因

拟南芥和烟草幼嫩种子RNA不同提取方法的比较被引量：10: 2009年; 拟南芥和烟草在植物分子生物学研究中都占有非常重要的地位，为了后续试验的顺利进行，欲探索适合提取拟南芥及烟草幼嫩种子总RNA的经济快捷的方法。采用4种方法分别对拟南芥和烟草幼嫩种子的总RNA进行了提取和分析，3种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作。Trizol法提取的RNA质量低。CTAB-异丙醇法提取的总RNA产量最高，并具有提取步骤少，操作时间短，价格便宜等优点，可用于大量样品提取；百泰克试剂盒提取时间短，可在常温下操作；CTAB—LiCl法提取的总RNA基本无基因组DNA的污染，但是不利于小分子RNA的沉淀。经紫外分光光度计检测，3种方法提取的总RNAOD260/OD230。均在1．80～1．97，表明蛋白质及其他有机溶剂的污染很少，OD260/OD230在2．03～2．37，表明盐类小分子的污染也较少；电泳检测28SrRNA和18SrRNA条带清晰，28SrRNA的亮度基本为18SrRNA的2倍。所提取的总RNA质量较高。将CTAB．异丙醇法提取的拟南芥总RNA用于反转录，可获得高质量的cDNA，dscDNA清晰的分布在100~3000bp之间。; 谢传胜宋国琦王兴军夏晗赵传志毕玉平; 关键词：拟南芥烟草 RNA提取

植物脂质转运蛋白的研究被引量：9: 2009年; 植物脂质转运蛋白(Lipid transfer protein,LTP)是一类小分子碱性蛋白,占植物可溶性总蛋白的4%左右,目前已经在许多植物中克隆了LTP的编码基因。LTP是一种多功能的蛋白,除了被认为参与了磷脂在生物膜之间的运输外,LTP还在生物膜、角质和脂质的形成、植物的生殖发育以及信号的转导等生物过程中发挥了重要的作用,另外LTP作为一种食物过敏原和防御蛋白引起了科研人员越来越多的兴趣。本文综述了LTP的生物学功能,对LTP在农业上的应用前景做了展望。; 李长生赵传志李爱芹李兴圃赵光敬王兴军; 关键词：植物防御

微RNA在植物抗逆过程中的作用被引量：3: 2008年; 微RNA(microRNA,miRNA)通过降解靶基因的mRNA或者抑制其靶基因的翻译控制生物体的多项重要生物途径,影响生物体不同组织器官的发育。本文重点综述了与植物抗逆相关的miRNA的最新研究进展。; 赵传志李长生张传坤毕玉平王兴军; 关键词：微RNA 植物抗逆

油体蛋白与人成骨蛋白-1基因融合植物表达载体的构建及融合蛋白性质预测: 2009年; 克隆大豆油体蛋白特异启动子及油体蛋白基因的全长序列,利用连接PCR的方法,通过一个肠肽酶位点将人成骨蛋白成熟肽编码序列连接到油体蛋白基因3’端并克隆到表达载体pCAMB IA1302中,构建"油体蛋白-肠肽酶-人成骨蛋白"植物表达载体。通过酶切、PCR和测序鉴定,证明表达载体构建成功,将其命名为pCAM-oleo-Bmp7。通过蛋白分析软件DNAstar、S ignalP3.0和ProtComp v8.0等软件对重组蛋白的理化性质、二级结构、信号肽和细胞定位进行了分析和预测,证明融合蛋白很好的保留了原来两个蛋白的二级结构和理化性质。; 赵传志苏磊李爱芹夏晗李长生王兴军; 关键词：成骨蛋白生物反应器植物表达载体

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山东省农业科学院青年科研基金(2007YQN001)