安徽省自然科学基金(KJ2008A085)
- 作品数：7 被引量：20H指数：2
- 相关作者：王明丽赵俊王兴满胡勇汤仁树更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 动物细胞培养物中支原体污染的检测被引量：14
- 2010年
- [目的]建立检测细胞培养物中支原体快速有效的方法。[方法]从6种常见污染细胞的支原体16sRNA中选择2段高度保守的核酸序列作为引物,用PCR和DNA荧光染色法来检测实验室中25种动物细胞株。[结果]用DNA荧光染色法检测实验室中25种动物细胞株阳性率为24%,可疑阳性为16%;而用PCR法检测阳性率为36%。[结论]PCR法较DNA荧光染色法灵敏度更高、特异性更强,将2种方法结合应用效果更好。
- 赵俊王兴满胡勇陈敬贤王明丽
- 关键词：支原体细胞培养聚合酶链反应
- 重组犬α干扰素急性毒性试验研究
- 2010年
- 为观察小鼠体内重组犬α干扰素急性毒性反应,进行重组犬α干扰素临床安全用药试验。结果表明:在连续观察14 d内,各组小鼠外部表现及行为特征均正常,体温和体重的变化也在正常范围之内,内脏病理解剖无器官病变情况,血液生化指标检查;注射1.0×106IU/只雌性小鼠ALT为(85.2±5.2)U/L,较正常对照组高,其他各组生化指标与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。可见,该试验设定的最高剂量1.0×106IU/只及其以下剂量对小白鼠均无明显毒性作用,在临床上应用该重组犬α干扰素是安全的。
- 罗畅民赵俊汤仁树李京培胡勇王燕来王明丽
- 关键词：急性毒性实验小鼠
- 人巨细胞病毒感染老龄小鼠的外周血T细胞亚群检测与分析被引量：1
- 2010年
- 目的在人巨细胞病毒(HCMV)感染的BALB/c小鼠模型基础上,研究小鼠细胞免疫应答状态。方法建立先天性潜伏感染的老龄小鼠(平均月龄≥18个月)模型,分别为HCMV先天性潜伏感染组(A)、先天性潜伏感染再激活组(B)及正常对照组(C),每组小鼠数均为6只。分别取各组小鼠外周血白细胞进行病毒分离、PCR和RT-PCR检测HC-MVUL83基因DNA和相应mRNA来验证模型小鼠感染状态。采用流式细胞术对小鼠外周血T细胞亚群进行检测。结果 A组和B组小鼠病毒分离出HCMV,C组为阴性。A组小鼠可以用PCR检测出HCMVUL83DNA,但RT-PCR检测不出相应的mRNA;B组小鼠用PCR、RT-PCR均可检测出相应产物;而C组均为阴性。A、B、C三组小鼠外周血中CD3+细胞构成比值分别为0.3305、0.0658和0.4318,组间差异有显著性(P<0.01);A、B、C三组中CD4+细胞的构成比值依次为0.6608、0.5998、0.6578,B组与A组及C组差异均有显著性(P<0.01),而在A组和C组间差异无显著意义(P>0.05);CD8+细胞比在A、B、C三组中的构成比值依次为0.2327、0.1150、0.1862,组间差异均有显著性(P<0.01);CD4+CD8+细胞在A、B、C三组中的比值依次为0.0990、0.1682、0.1192,组间差异有显著性(P<0.05)。结论 HCMV先天性潜伏感染及HCMV先天性潜伏感染再激活均可使老龄小鼠的细胞免疫功能降低,尤以后者显著。表明HCMV对先天性潜伏感染再激活老龄小鼠的细胞免疫状态有明显的抑制作用。
- 吴琼赵俊王明丽
- 关键词：巨细胞病毒感染
- 婴幼儿先天性巨细胞病毒感染性感觉神经性耳聋的研究进展被引量：3
- 2010年
- 先天性巨细胞病毒感染是引起婴幼儿感觉神经性耳聋的重要原因,也是先天性巨细胞病毒感染最常见的后遗症。耳聋的症状可在新生儿期出现,也可在出生后一段时间(通常在1岁左右)出现。对患儿使用安全范围内的抗病毒药物治疗可以改善听力。本文就婴幼儿先天性巨细胞病毒感染性感觉神经性耳聋的研究进展作一综述。
- 丁婷婷王明丽
- 关键词：巨细胞病毒感觉神经性耳聋
- HCMV pp65在原核细胞中的表达、纯化及其抗血清的制备被引量：1
- 2010年
- 目的采用原核表达系统获得HCMV pp65目的蛋白,免疫家兔制备该蛋白特异性抗血清。方法构建表达GST-HCMV pp65融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达,经GST亲和层析纯化后的pp65蛋白免疫家兔,获得兔多克隆抗血清。采用ELISA、SDS-PAGE电泳及Western blot检测纯化后的蛋白,并以间接免疫荧光染色法检测鉴定该蛋白的抗原性。结果成功构建PGEX-5X-pp65重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得可溶性的融合蛋白;GST亲和层析纯化后的蛋白免疫家兔获得特异性抗血清。结论在原核细胞中成功获得了融合蛋白pp65,免疫家兔后获得具有高度特异性抗血清。为进一步揭示该蛋白的功能及作用机制奠定了重要基础。
- 王兴满吴琼汤仁树甘霖赵俊王明丽
- 关键词：原核细胞免疫血清
- 人重组α干扰素联合顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究
- 2011年
- 目的:探讨人重组α干扰素(rhIFN-α)及联合应用顺铂对骨肉瘤细胞(MG-63)凋亡的影响。方法:将rhIFN-α和顺铂分别和联合作用于MG-63细胞,光镜下观察细胞形态学改变,用MTT检测MG-63细胞增殖抑制情况,流式细胞仪法检测MG-63细胞凋亡情况,Hoechest 33258染色和DNAladder检测细胞凋亡。结果:10 000 IU/ml rhIFN-α对细胞增殖抑制情况较明显(34.12±2.11)%;单独应用顺铂组对细胞增殖抑制率为(24.74±2.22)%;顺铂联合应用干扰素可明显提高MG-63细胞的增殖抑制作用到(69.41±1.72)%、(58.81±2.23)%、(48.23±1.12)%。结论:rhIFN-α对MG-63细胞的增殖抑制效应具有剂量依赖性特点,10 000IU/ml rhIFN-α能明显诱导MG-63细胞凋亡,而且不同剂量的rhIFN-α均能明显促进顺铂诱导的细胞凋亡。提示化疗时联合应用rhIFN-α可提高骨肉瘤细胞对化疗药物的敏感性。
- 陈国富丁婷婷赵俊王明丽尹宗生
- 关键词：干扰素骨肉瘤细胞凋亡
- 重组猪α干扰素急性毒性研究被引量：1
- 2009年
- [目的]研究小白鼠体内重组猪α干扰素急性毒性反应,为临床安全用药提供依据。[方法]依据急性毒性实验原则,将小白鼠分为2大组:腹腔注射组和肌肉注射组,每组又分高、中、低3个剂量组,同时设正常对照组。给药后14d内连续观察小鼠行为活动等指标和毒性反应程度,取血作血液学检查和生化检查,以获得重组猪α干扰素初步毒性资料,并在实验结束时处死小白鼠进行剖检。[结果]各组小鼠外部表现及行为特征均正常,体温和体重的变化也在正常范围之内,内脏病理解剖无器官病变情况,血液、生化指标与正常对照组无明显差异。[结论]该实验设定的猪α干扰素最高剂量(5.0×105IU/只)及其以下剂量,均对小白鼠无明显毒性作用,在临床上应用重组猪α干扰素是安全的。
- 王兴满赵俊李京培刘伯玉汤仁树俞海洋胡勇王燕来王明丽
- 关键词：重组猪Α干扰素急性毒性小白鼠
