重庆市科委基金(2002012)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：陈健王曙光李大江更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 凋亡素基因转染对人胆管癌细胞凋亡作用的研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨凋亡素对人胆管癌细胞凋亡的影响。方法以PCR方法获得凋亡素基因,然后运用T4连接酶将凋亡素基因和含荧光蛋白基因的质粒pAdtrack-CMV连接,通过酶切和测序证实成功构建重组质粒。再以DOTAP脂质体介导凋亡素基因转染人胆管癌细胞株QBC939。通过TUNEL染色证实凋亡素能否导致人胆管癌细胞的凋亡。结果酶切和测序均证实了成功构建含凋亡素基因和荧光蛋白基因的重组质粒。TUNEL染色显示凋亡素基因的转染引发人胆管癌细胞株QBC939的凋亡率与对照组相比具有非常显著的差异(P<0.01)。结论凋亡素能诱导培养的人胆管癌细胞的凋亡,在胆管癌的基因治疗上有深入研究的价值。
- 陈健王曙光
- 关键词：凋亡素转染人胆管癌细胞
- 腺病毒介导凋亡素基因转染对人胆管癌细胞Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:初步探讨在凋亡素基因转染引发人胆管癌细胞凋亡的同时对Bcl-2蛋白的影响。方法:采用含凋亡素基因的重组腺癌毒感染人胆管癌细胞株QBC939,通过光镜、荧光观察其凋亡情况,在感染后7d收集细胞,采用Western-blot检测其Bcl-2蛋白情况。结果:含凋亡素基因的重组腺病毒感染胆管癌细胞株QBC9397d后其Bcl-2蛋白的表达较空病毒组和空白对照组明显降低。结论:凋亡素基因在诱导人胆管癌细胞凋亡时会导致Bcl-2蛋白的降低,可能有助于凋亡素的作用。
- 陈健李大江王曙光
- 关键词：凋亡素基因腺病毒载体胆管癌细胞BCL-2蛋白
- 腺病毒介导凋亡素基因对人胆管癌细胞凋亡的研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨凋亡素基因转染对人胆管癌细胞凋亡的影响,为胆管癌的治疗探索新方法。方法采用含凋亡素基因的重组腺病毒感染胆管癌细胞株QBC939,在确定其感染复数后通过光镜、荧光观察其凋亡情况,同时通过TUNEL染色统计凋亡率。结果胆管癌细胞株QBC939的重组腺病毒的感染复数为65,在感染后第3天凋亡素基因能引发胆管癌细胞株QBC939的凋亡,并且随着时间的推移其作用越明显,在第7天凋亡率达到61.9%。结论凋亡素能明显引发人胆管癌细胞的凋亡,在胆管癌的治疗上具有较大潜力。
- 陈健李大江王曙光
- 关键词：凋亡素基因腺病毒载体基因治疗胆管癌
- 腺病毒介导凋亡素基因对裸鼠种植性人胆管癌的治疗研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨腺病毒介导凋亡素基因对裸鼠种植性人胆管癌的治疗。方法建立裸鼠皮下种植性人胆管癌模型,观察肿瘤内注射含凋亡素基因的重组腺病毒后种植瘤的体积变化、毒副作用和组织学变化,同时计算抑瘤率。结果在治疗12d后含凋亡素基因的腺病毒治疗组的种植瘤体积为(92.31±28.31)mm,较空病毒组(288.86±113.13)mm和生理盐水组(344.86±113.87)mm相比具有显著差别(P<0.01)。同时抑瘤率达到72.10%,明显高于空病毒治疗组11.9%(P<0.01)。在治疗期间没有观察到毒副作用。组织学结果也提示凋亡素基因是通过引发胆管癌细胞的凋亡来抑制肿瘤生长的。结论含凋亡素基因的重组腺病毒对胆管癌具有治疗作用。
- 陈健李大江王曙光
- 关键词：凋亡素基因腺病毒载体基因治疗人胆管癌
- 凋亡素基因重组腺病毒的构建被引量：2
- 2006年
- 目的构建携凋亡素基因的腺病毒载体,为进一步研究凋亡素基因功能及其作用机制建立基础。方法Pmel酶切线性化已经构建好的含凋亡素基因的穿梭质粒pAdTrack-CMV-VP3,然后电转化到BJ5183-AD-1细胞中进行同源重组。PacⅠ酶切出含凋亡素基因的腺病毒DNA,然后转染293细胞进行包装获得重组腺病毒,运用RT-PCR鉴定重组腺病毒。用氯化铯梯度离心纯化病毒。用物理和生物方法确定病毒的滴度。结果PacⅠ酶切证实同源重组成功。绿色荧光观察证实病毒包装成功并且具有感染力,RT-PCR证实了重组腺病毒具有凋亡素蛋白的编码。重组腺病毒的浓度为84.52×109VP/ml,滴度为6.561×109PFU/ml。结论成功构建含凋亡素基因的重组腺病毒,它的滴度足以满足体内外实验。
- 陈健李大江王曙光
- 关键词：凋亡素基因腺病毒载体基因治疗
