广东省自然科学基金(501237)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 胸腺素α_1调节鸡脾脏淋巴细胞免疫功能的信号转导途径
- 2008年
- 在无菌条件下,从健康墟岗黄鸡体内取出脾脏,分离淋巴细胞并进行体外培养。在细胞培养液中分别加入终浓度为0.01 mol/L咖啡碱、0.05 mol/L EDTA、0.01 mol/L氯化锂和5μg/mL甲派氟丙嗪,然后用10μg/mL胸腺素α1(Tα1)处理,再加入20μg/mL ConA,研究Ca2+-肌醇磷脂-蛋白激酶系统和cAMP-肌醇磷脂-蛋白激酶系统在Tα1调节淋巴细胞免疫功能中的作用,揭示Tα1调节免疫功能的信号转导机制。结果表明,咖啡碱处理能显著增强Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达,提高培养液中IL-2浓度(P<0.05);而EDTA处理能显著抑制Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌的作用(P<0.05);氯化锂和甲派氟丙嗪对Tα1的免疫调节作用的影响不明显(P>0.05)。结果提示,Tα1调节鸡脾脏淋巴细胞的增殖和IL-2的基因表达与分泌的作用,主要通过cAMP、Ca2+和PKC等第二信使的介导。
- 王丙云梁敏计慧琴陈胜锋陈志胜
- 关键词：胸腺素Α1信号转导
- 不同冷冻保护剂对鸡胚胎干细胞冻存与复苏的影响被引量：3
- 2008年
- 通过计算复苏后细胞存活率以及观察细胞生长状态,比较了二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)和甘油3种冷冻保护剂对鸡ES细胞的冷冻保存效果。结果显示:1)当DMSO的浓度为5%、10%和15%时,鸡ES细胞复苏后的存活率分别为73.57%、85.47%和78.90%;当EG浓度为5%、10%、和15%时,复苏后细胞存活率分别为68%、74.30%和67.70%;当甘油浓度为5%、10%和15%时细胞的复苏存活率分别为31.20%、51.40%和50.60%。在相同浓度下,以DMSO保护效果最佳,EG次之,甘油最差。同一种保护剂,以10%浓度的保存效果最好;2)以DMSO为冷冻保护剂,复苏后的鸡ES原代培养在饲养层上可以较好的生长,并形成集落,当浓度为10%时AKP阳性克隆数最高为23.5个。上述结果提示.以10%的DMSO作为鸡ES细胞的冷冻保护剂效果最佳。
- 王丙云黄文静计慧琴陈胜锋陈志胜
- 关键词：鸡胚胎干细胞冷冻保存
- 鸭胚胎干细胞分离与鉴定
- 2010年
- 采用药勺法分离仙湖3号肉鸭鸭胚的胚盘细胞,并以鸭胚成纤维细胞作为饲养层,培养鸭胚胎干细胞。在此基础上,通过对体外培养的鸭胚胎干细胞形态观察,碱性磷酸酶染色(AKP)以及胚胎阶段表面特异性抗原(SSEA-1)免疫组化等方法,分离与鉴定鸭胚胎干细胞。结果表明传至第3代的鸭胚胎干细胞经AKP和SSEA-1鉴定均为阳性,AKP染色为深蓝色,SSEA-1染色呈绿色荧光,表明培养至第3代的鸭胚胎干细胞仍保持干细胞未分化特性,具有胚胎干细胞的特征。结果提示本试验分离、培养的鸭胚盘细胞为鸭胚胎干细胞。
- 高健潜张春红王丙云陈金顶
- 关键词：胚胎干细胞
- 胸腺素α_1对鸡脾脏淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响被引量：1
- 2008年
- 为进一步阐明胸腺素α1(Tα1)的作用机制,采用MTT比色法、RT-PCR相对半定量法和RIA法研究了不同浓度的Tα1对离体培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达及其分泌的影响。结果表明,10μg/mL和1μg/mL Tα1处理鸡脾脏淋巴细胞能显著提高由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化率(P<0.05),显著提高鸡脾脏淋巴细胞IL-2基因表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P<0.05),且以10μg/mL浓度的效果最佳。0.1μg/mL的Tα1对脾脏淋巴细胞增殖转化和IL-2基因表达与分泌无显著作用(P>0.05)。提示,Tα1对鸡免疫功能的调节同其剂量有关,并可能在基因转录水平上调节IL-2的分泌。
- 王丙云梁敏计慧琴陈胜锋
- 关键词：胸腺素Α1淋巴细胞增殖IL-2
- 胸腺九肽对鸡脾淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响被引量：4
- 2007年
- 采用MTT比色法、相对半定量RT-PCR法和放射免疫测定(RIA)法研究了不同浓度的胸腺九肽对离体培养的鸡脾淋巴细胞增殖转化I、L-2基因表达与分泌的影响。结果表明,用10 ng/mL和1 ng/mL胸腺九肽处理鸡脾淋巴细胞8 h后,能显著增加由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化反应,显著提高IL-2基因的表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P<0.05);100 ng/mL的胸腺九肽虽有增强脾淋巴细胞增殖转化反应以及提高IL-2基因表达和分泌能力的趋势,但与对照组无显著差异(P>0.05)。提示,胸腺九肽能增强鸡脾淋巴细胞的增殖转化反应,并主要在基因转录水平上促进IL-2的合成与分泌,其作用与剂量大小有关。
- 王丙云梁敏计慧琴陈胜锋
- 关键词：淋巴细胞增殖IL-2基因
