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小黑杨环锌指蛋白基因的克隆与表达分析被引量：5: 2009年; 用cDNA-AFLP技术从小黑杨中克隆与盐胁迫反应相关的cDNA片段,进一步应用RACE技术克隆出具有完整开放读码框的小黑杨环锌指蛋白基因(PsnRZF),该基因全长1061bp,其中5'非翻译区为184bp,3'非翻译区为82bp,开放读码框为795bp,编码264个氨基酸,预测蛋白的分子量为30.25kDa,理论等电点为8.04。实时定量PCR检测的结果显示,正常生长条件下该基因在根、茎、叶中都表达;NaCl胁迫下,该基因在根、茎、叶中的表达量升高。在叶中的表达量随着处理时间的延长而逐渐升高,胁迫处理后第6天表达量达到最高。; 王雷周博如吴丽丽吕澈妍曲跃军郑威姜廷波; 关键词：小黑杨 RACE 实时定量PCR

用AFLP标记构建白桦遗传连锁图谱被引量：1: 2009年; 用AFLP的方法分析中国白桦×欧洲白桦的78个F1个体,并按照拟测交作图策略,建立了中国白桦和欧洲白桦遗传连锁图谱。从群体的45对引物组合中分离出343个分离位点,χ2检验表明,其中有311个符合1:1拟测交分离位点。在这些位点中168个来自中国白桦,143个来自欧洲白桦。软件分析表明,中国白桦的168个位点构成9个连锁群,11个三联体和14个连锁对,55个为非连锁位点,连锁标记覆盖的总距离为1909.2cM,平均图距为16.9cM;来自欧洲白桦的143个位点构成12个连锁群,4个三联体和9个连锁对,21个为非连锁位点,连锁标记覆盖的总距离为1857.3cM,平均图距为15.2cM。; 吕澈妍周博如王雷吴丽丽姜廷波; 关键词：欧洲白桦

转金属硫蛋白基因(MT_1)烟草抗Cd^(2+)胁迫的生理特性分析被引量：5: 2007年; 将柽柳(Tamarixsp.)金属硫蛋白基因(MT1,GenBank登录号:AB298390)插入植物表达载体pBI121,取代花椰菜病毒35S启动子下游的gus基因,利用农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1导入烟草(Nicotiana tobacum)基因组。对具有卡那霉素抗性,且经PCR-Southern检测和Northern杂交表现阳性的转基因株系进行抗Cd2+分析表明,金属硫蛋白基因的过量表达提高了转基因植株的抗Cd2+能力,在含200μmol L-1和400μmol L-1Cd2+的MS培养基上,转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系;在生理性状上表现为转基因植株MDA含量及POD活性明显低于非转基因株系,叶绿素含量和SOD活性比非转基因株系明显增加。; 姜廷波陈虹唐鑫华丁宝建王玉成李凤娟李绍臣; 关键词：烟草柽柳金属硫蛋白镉离子

NaCl胁迫下星星草生理响应及分子机制的研究被引量：3: 2010年; 研究了星星草在NaCl持续胁迫过程中POD、SOD、MDA、Pro的变化情况。结果表明:SOD活性随着胁迫时间的延长呈现先逐渐增强后逐渐减弱的趋势,峰值出现在持续胁迫的第6天。而POD活性则呈现平稳增长的趋势,但在胁迫处理的第10天骤然增加。在NaCl胁迫过程中,Pro含量增加;MDA含量除在持续胁迫的第4天高于对照外,其余胁迫时间变化并不明显。利用Real-ti me PCR方法研究了NaCl胁迫下CAT、DHAR、TRX基因在转录水平上的表达情况,结果显示3种基因的表达量均高于对照,有效降低了活性氧对星星草的伤害。; 王雷吴丽丽曲跃军吕澈妍郑威姜廷波; 关键词：星星草 NACL胁迫生理响应基因表达

转星星草金属硫蛋白基因烟草的获得及其抗重金属镉能力分析被引量：6: 2009年; 用农杆菌介导法将星星草金属硫蛋白基因(MT)转化烟草,PCR及PCR-Southern检测的结果表明,该基因已导入烟草中。Real-Time PCR检测显示,该基因在转基因后代中的转录水平高于非转基因植株。Cd2+胁迫下,转基因植株能够正常生长,鲜重、株高、叶绿素含量、Cd2+含量和SOD活性均高于非转基因植株,表明MT基因的过量表达可提高转基因烟草的抗Cd2+能力。; 王雷曲跃军杜人杰吴丽丽王玉成姜廷波; 关键词：烟草金属硫蛋白

过量表达铁蛋白基因的转基因烟草抗Co^(2+)能力分析被引量：1: 2009年; 目的:将烟草铁蛋白基因NtFer1的完整cDNA序列克隆到植物表达载体pBI121中,利用农杆菌(Agrobactri-um tumefaciens)介导的叶盘法将NtFer1导入烟草(Nicotiana tobacum L.)基因组。对卡那抗性植株进行PCR-Southern检测,并将进一步经Northern杂交证明NtFer1基因表达量增加的转基因株系进行抗Co2+分析。结果表明,NtFer1的过量表达提高了转基因植株的抗Co2+能力。在含150μmol·L-1Co2+的MS培养基上,转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系;在生理性状上表现为叶绿素含量、POD活性和SOD活性比非转基因株系明显增加,转基因植株MDA含量明显低于非转基因株系。结果表明,NtFer1大量表达能够增强转基因株系抗氧化能力,提高植物抗Co2+能力。; 杜人杰曲跃军吴丽丽王雷姜廷波包怡红王玉成; 关键词：烟草铁蛋白生理特性转基因

抑制性消减杂交技术研究Cd^(2+)胁迫下星星草基因表达被引量：1: 2010年; 通过对Cd2+胁迫下星星草抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)cDNA文库的分析,从正向和反向消减文库中筛选出33个特异表达的阳性克隆,26个镉胁迫诱导表达,7个为镉胁迫抑制表达。序列分析表明,有29个与数据库中有同源性,其中功能已知的25个,未知功能有4个,剩余4个为无同源序列的新基因。已知功能序列中,19个为胁迫后诱导表达,6个为胁迫后抑制表达,其中谷胱甘肽还原酶(GSR)基因、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)基因、细胞膜CP5蛋白基因和ABC家族蛋白基因等与星星草抗镉离子胁迫密切相关。; 曲跃军杜人杰王雷吕澈妍吴丽丽姜廷波; 关键词：镉胁迫星星草抑制性消减杂交

白桦AFLP遗传连锁图谱的构建被引量：10: 2009年; 以80个中国白桦(Betula platyphylla Suk)×欧洲白桦(Betula pendula Roth)的F1个体为作图群体,利用扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)标记,按照拟测交作图策略,分别构建了中国白桦和欧洲白桦的分子标记遗传连锁图谱。从64对AFLP引物组合中筛选出34对多态性丰富的引物组合,这些入选的引物组合在分离群体中共检测到451个多态性位点。χ2检验结果表明,有362个位点符合1:1分离(拟测交分离位点),41个位点符合3:1分离,20个位点符合1:3分离,28个位点属偏分离位点。在符合拟测交分离的位点中,201个位点来自中国白桦,161个位点来自欧洲白桦。利用2点连锁分析,来自中国白桦的201个标记构成了14个连锁群(4个以上标记),10个三连体和14个连锁对,45个为非连锁位点,连锁标记覆盖的总图距为1296.1cM,平均图距15.5cM。而来自欧洲白桦的161个标记构成了17个不同的连锁群(4个以上标记),8个三连体和4个连锁对,15个为非连锁位点,连锁标记覆盖的总图距为1035.8cM,平均图距12cM。; 高福玲姜廷波; 关键词：欧洲白桦 AFLP 遗传连锁图谱

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黑龙江省重点科技攻关项目(GB06B303-5)