温岭市科技局基金(2010WLCA0046)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：郑志辉林红霞丁玎杨鹏翔林峰更多>>
- 相关机构：温州医科大学温州医学院更多>>
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- 应用DHPLC技术分析浙江沿海地区ESBLs基因类型的研究
- 2013年
- 目的应用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测超广谱β-内酰胺酶(extend spectrumβ-lactamases,ESBLs)基因型,了解浙江沿海地区ESBLs基因型分布情况。方法收集171株多重耐药肠杆菌及标准菌株采用多重PCR进行头孢克肟-M型(CTX-M)扩增,扩增产物经DHPLC分析,确定临床菌株基因分型。结果171株多重耐药肠杆菌经表型试验有142株临床菌株ESBLs表型阳性,经多重PCR扩增109株携带CTX-M基因,其中52株为CTX-M-1产物,57株为CTX-M-9产物,检出率达76.8%(109/142)。其中大肠埃希菌携带CTX-M基因比例最高(92.3%),其次是肺炎克雷伯菌(72.3%)和阴沟肠杆菌(60.0%)。109株临床菌株PCR产物经DHPLC分析检测出4种CTX-M基因型,33株携带CTX-M-3、19株携带CTX-M-15、5株携带CTX-M-9、52株携带CTX-M-14。结论 CTX-M型ESBLs菌株检测出4种基因型,CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-9和CTX-M-14,其中CTX-M-14型是CTX-M型ESBLs主要型别。浙江沿海地区携带CTX-M型ESBLs的细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌为多见。
- 林红霞郑志辉丁玎杨鹏翔
- 关键词：变性高效液相色谱超广谱Β-内酰胺酶肠杆菌
- 实时荧光定量PCR检测儿童下呼吸道感染的WU多瘤病毒
- 2012年
- 目的建立并应用检测儿童下呼吸道感染WU多瘤病毒（WU polyomavirus）的实时荧光定量PCR（real-time fluorescentquantitativePCR，FQ—PCR）方法。方法选择WU多瘤病毒的VP2基因作为检测的目标基因，设计FQ—PCR引物和检测探针，以重组质粒为标准品建立标准曲线，并对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价；应用该方法对温州医学院附属温岭医院收集的临床下呼吸道感染患儿的痰液、咽拭子846份及血清标本846份进行定量检测。结果本研究建立FQ—PCR检测方法，质粒标准曲线的方差系数为0．998，灵敏度可达到50拷贝；应用该方法检测700份痰液标本，检测到7例阳性标本，146份咽试子标本中未检测到阳性标本，总阳性率为1．00％（7／700），846份血清标本未检测到阳性标本。结论本研究建立的rQ—PCR方法可以特异、快速、灵敏地对儿童下呼吸道感染的WU多瘤病毒进行定量检测；痰液标本较咽拭子或血清标本更适用于WU多瘤病毒感染的核酸检测。
- 林红霞郑昌华郑志辉欧阳后先郑敏巧吴锋林峰侯建毅吕建新
- 关键词：聚合酶链反应荧光抗体技术
